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中文名稱：豬β萘酚ELISA試劑盒科研

操作程序：

① 加抗體包被 → 4℃,，洗滌三次,、拋干

② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次,、拋干

③ 加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次,、拋干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分鐘,，加終止液

⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值

豬β萘酚ELISA試劑盒科研顯色的重要性

顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),，此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素,。在一定時間內(nèi),，陰性孔可保持無色,，而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強,。適當提高溫度有助于加速顯色進行,。在定量測定中,，加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,，時間一般不需要嚴格控制,，有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色*況適當縮短或延長反應(yīng)時間，及時判斷,。

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,，再延長反應(yīng)時間,，可使本底值增高,。OPD底物液受光照會自行變色,，顯色反應(yīng)應(yīng)避光進行，顯色反應(yīng)結(jié)束時加入終止液終止反應(yīng),。OPD產(chǎn)物用酸終止后,，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色,。

TMB受光照的影響不大,，可在室溫中置于操作臺上，邊反應(yīng)觀察結(jié)果,。但為保證實驗結(jié)果的穩(wěn)定性,，宜在規(guī)定的適當時間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,，約40分鐘顯色達,，隨即逐漸減弱,，至2小時后即可*消退至無色,。TMB的終止液有多種,，疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止,。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間（12-24小時）不褪,，是目視判斷的良好終止劑,。此外,，各類酸性終止液則會使藍色轉(zhuǎn)變成黃色,，此時可用特定的波長（450nm）測讀吸光值,。

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