在ELISA試劑盒的使用過程中常見問題有很多如,, 加樣器不確,;尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響極大,; 保溫設(shè)備不良,; 洗滌用水不規(guī)范。
如何解決這些問題呢:
1在使用過程校正加樣器,;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭,、法國(guó)等);
2 仔細(xì)校正溫度到37℃,,水浴箱為佳,;
3 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水,、礦泉水等,;
4 認(rèn)真閱讀使用說明書。
樣品加樣:
1 加樣不準(zhǔn)確,; 2 沒有混勻,。 加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,,再檢查,,以防漏加、錯(cuò)加,。
2 加樣后,,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,,導(dǎo)致非特異性吸附。 洗滌 洗滌不* ①每次注水洗滌,,應(yīng)靜止30秒鐘,;②選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分,;
3 可選用塑料洗滌瓶,。 加酶反應(yīng) 漏加 滴加后,認(rèn)真檢查各孔 結(jié)果判斷 ①包括陰性對(duì)照孔在內(nèi),,各孔顯色普遍偏深,;②包括陽(yáng)性對(duì)照在內(nèi),各孔均無顯色,;③陽(yáng)性對(duì)照不顯色,,而其它樣本顯色正常;
4 有些標(biāo)本顯色不深,,判斷陽(yáng)性困難,。 ①可能是洗滌不充分,;加樣過量;溫育時(shí)間過長(zhǎng)溫度過高,;按說明書重新操作,。如無改善, 可與生產(chǎn)廠家聯(lián)系,;②可能是漏加樣本或酶液,;溫育時(shí)間過短溫度過低;試劑保存不當(dāng)活性下降,;按說明書重新 操作,。如無改善,可與生產(chǎn)廠家聯(lián)系,;③陽(yáng)性對(duì)照漏加,、錯(cuò)加或失效。重新操作,。如無改善,,可與廠家聯(lián)系,索要對(duì)照品,; ④重新操作,。使用酶標(biāo)儀,測(cè)定光吸收度,,按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷,。 ELISA試劑盒保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過高,,也不得凍存(凍存后,,酶液將失效)。 對(duì)照品 對(duì)照品為凍干品 按對(duì)照管標(biāo)示,,加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶,,充分溶解混勻??砂凑f明書使用,。
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