大鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒實驗原理：

用純化的MT抗體包被微孔板,，制成固相載體,，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的MT抗體,、HRP標(biāo)記的親和素,，經(jīng)過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，計算樣品濃度,。

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品用途：僅供科研使用

檢測范圍：15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml

特 異 性：本試劑盒可同時檢測重組或天然的，且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)

大鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒操作步驟：

實驗開始前,，各試劑均應(yīng)平衡至室溫,，試劑不能直接在37 溶解；試劑或樣品配制時,，均需充分混勻,，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,，如樣品濃度過高時,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。

1、 加樣：分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。空白孔加樣品稀釋液 100 ,，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100 ,，注意不要有氣泡，加樣 時將樣品加于酶標(biāo)板底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,，37 溫育2小時,。為保證實驗結(jié)果有效

性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。

2,、 棄去液體，甩干,，不用洗滌,。每孔加檢測溶液A工作液 100 （臨用前配制），酶標(biāo)板加上覆膜,，37 溫育1小時,。

3、 棄去孔內(nèi)液體,，甩干,，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘,，大約400 /每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4,、 每孔加檢測溶液B工作液（臨用前配制）100 ,，加上覆膜，37 溫育1小時,。

5,、 棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，方法同步驟3。

6,、 每孔加底物溶液90 ,，酶標(biāo)板加上覆膜37 避光顯色（反應(yīng)時間控制在15-30分鐘，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,，后3-4孔梯度不明顯時,，即可終止）,。

7、 每孔加終止溶液50 ,，終止反應(yīng),，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物 液的加入順序相同,。

8,、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度（OD值）。

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