我們知道,完整的ELISA試劑盒包含:①酶的底物,;②已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑),;③酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);④結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液,;⑤洗滌液,,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水,;⑥陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測(cè)定中),,參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);⑦酶反應(yīng)終止液,,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,,其濃度按加量及比色液的終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會(huì)受損嗎,?恒遠(yuǎn)與您一起探討,!
為其保存后可以使用,但不能反復(fù)凍融,,因?yàn)檫@是競(jìng)爭(zhēng)試劑盒,,這與激素試劑盒測(cè)定激素相似,存儲(chǔ)在20 000,,預(yù)涂板是20 000保存,,然后覺得奇怪,為什么這樣的操作指南的要求,,但正常的測(cè)試結(jié)果,。當(dāng)然,如果結(jié)果是正常的,,如病毒檢測(cè)試劑盒,,尤其是正多面體病毒,應(yīng)放在冰箱冷藏4 000,。所以我們建議解凍后運(yùn)行的時(shí)間盒,。
在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1~2小時(shí),,產(chǎn)物的天生可達(dá)。溫育常采用的溫度有43℃,、37℃,、室溫順4℃等。室溫溫育時(shí)要平置于操縱臺(tái)上即可,。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,,一般均采用水浴,,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,,使溫度迅速平衡,。操縱時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在劃定的范圍內(nèi),尺度室溫溫度是指20~25℃,,但詳細(xì)操縱時(shí)可根據(jù)仿單的要求控制溫育,。
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