試劑名稱(chēng)：iFluor 405 Phalloidin,，iFluor 405 鬼筆環(huán)肽

儲(chǔ)存：-20℃干燥避光保存至少1年,，冰袋運(yùn)輸。

產(chǎn)地：西安強(qiáng)化生物

分子量： ~1400

一,、描述與基本特性：

iFluor 405 鬼筆環(huán)肽是一種用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)F-actin的熒光標(biāo)記物,。

該試劑屬于一系列與肌動(dòng)蛋白結(jié)合的化合物，可通過(guò)熒光顯微鏡在Ex/Em = 400/421 nm下檢測(cè),。

Phalloidin-iFluor 405試劑可穩(wěn)定肌動(dòng)蛋白纖維,，防止其解聚，并且適用于固定細(xì)胞和懸浮細(xì)胞,，可與抗體結(jié)合進(jìn)行雙重染色,。

本品在固定樣本上使用簡(jiǎn)單，只需20-90分鐘的孵育和3次短洗,。

此外,，iFluor 405 Phalloidin具有高亮度、穩(wěn)定性和良好的熒光特性,，適用于細(xì)胞生物學(xué)研究中的F-actin染色,。

優(yōu)勢(shì)

高信噪比：非特異性背景低于抗體染色法，染色對(duì)比度明顯 。

光穩(wěn)定性：熒光亮度與穩(wěn)定性媲美Alexa Fluor 405-Phalloidin,，適合長(zhǎng)時(shí)間成像 ,。

多重標(biāo)記兼容性：可與熒光蛋白、量子點(diǎn),、二抗等聯(lián)合使用,，適用于共定位研究 。

二、作用機(jī)制

1. 特異性結(jié)合F-actin

結(jié)合位點(diǎn)：鬼筆環(huán)肽結(jié)合在F-actin亞基間的界面，將相鄰亞基“鎖定”在一起,，形成穩(wěn)定的復(fù)合物,。

親和力差異：對(duì)F-actin的親和力遠(yuǎn)高于G-actin（單體）,，因此僅標(biāo)記已聚合的肌動(dòng)蛋白絲。

2. 穩(wěn)定肌動(dòng)蛋白絲結(jié)構(gòu)

抑制解聚：

通過(guò)降低肌動(dòng)蛋白亞基從纖維末端的解離速率常數(shù)，阻止微絲解聚。

機(jī)制解析：

結(jié)合后改變F-actin構(gòu)象,，使肌動(dòng)蛋白單體處于與G-actin不同的狀態(tài)，阻礙ADP釋放,。

抑制F-actin的ATP水解活性,，進(jìn)一步穩(wěn)定纖維結(jié)構(gòu)。

降低臨界濃度：

將肌動(dòng)蛋白聚合的臨界濃度降低10-30倍,，促進(jìn)微絲形成,。

3. 對(duì)細(xì)胞動(dòng)態(tài)的影響

抑制細(xì)胞遷移：

顯微注射后，鬼筆環(huán)肽通過(guò)穩(wěn)定F-actin阻斷細(xì)胞遷移,，證明肌動(dòng)蛋白組裝/解組裝對(duì)運(yùn)動(dòng)性的重要性,。

注意：天然鬼筆環(huán)肽及衍生物無(wú)法穿透細(xì)胞膜，需顯微注射或細(xì)胞固定處理,。

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