試劑簡(jiǎn)介

Alexa Fluor 405-Streptavidin是一種結(jié)合了藍(lán)色熒光染料（Alexa Fluor 405）與鏈霉親和素（Streptavidin）的生物偶聯(lián)物，應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究中的熒光標(biāo)記,、檢測(cè)和信號(hào)放大,。

【Alexa Fluor 405的化學(xué)性質(zhì)與光譜特性】

化學(xué)結(jié)構(gòu)

Alexa Fluor 405的核心結(jié)構(gòu)包含磺酸基團(tuán)（-OSO??）、苯環(huán),、哌啶環(huán)及環(huán)己烯酮基團(tuán),，并通過(guò)琥珀酰亞胺酯（NHS ester）實(shí)現(xiàn)與蛋白的偶聯(lián)。其分子中帶有三個(gè)三乙胺（Et?NH?）離子,，增強(qiáng)了水溶性和穩(wěn)定性,。

光學(xué)特性

激發(fā)與發(fā)射波長(zhǎng)：激發(fā)峰（Ex）為400–402 nm，發(fā)射峰（Em）為420–424 nm,。

摩爾吸收系數(shù)：ε = 35,000 L·mol?1·cm?1,，表明其吸光能力強(qiáng)。

斯托克斯位移：約20 nm（如Ex 401 nm,，Em 422 nm）,，有助于減少背景干擾。

熒光壽命：約1.6 ns,，適合時(shí)間分辨熒光檢測(cè)。

優(yōu)勢(shì)

相比UV激發(fā)的藍(lán)色染料（如Cascade Blue）,，Alexa Fluor 405可在可見(jiàn)光（405 nm激光）下激發(fā),，減少自體熒光干擾，信號(hào)較亮,。

與綠色熒光染料（如FITC）光譜重疊小,，適合多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。

Streptavidin的結(jié)構(gòu)與特性

四聚體蛋白：分子量約52–66 kDa,，由四個(gè)相同亞基組成,，每個(gè)亞基可結(jié)合一個(gè)生物素分子。

較高親和力：與生物素的解離常數(shù)（Kd）為10?1? M,，是已知較強(qiáng)的非共價(jià)相互作用之一,。

穩(wěn)定性：耐受pH（4–10）、高溫（70℃以下）及有機(jī)溶劑,，適合多種實(shí)驗(yàn)條件,。

【補(bǔ)充信息】

狀態(tài)：凍干粉

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥保存，有效期 6 個(gè)月,。

復(fù)溶后溶液：需添加0.2 mM 硫柳汞防腐,，4℃避光保存 6 個(gè)月,；長(zhǎng)期儲(chǔ)存建議分裝后-20℃冷凍，避免反復(fù)凍融,。

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