Firefly Luciferase,Recombinant重組螢火蟲熒光素酶,基本結(jié)構(gòu)
【參數(shù)信息】
英文名稱:Firefly Luciferase,Recombinant
中文名稱:重組螢火蟲熒光素酶
CAS NO:61970-00-1
分子量:~60kDa
狀態(tài):液體
檢測(cè)范圍:≤1 femtomole ATP(0.2μg luciferase)
純度:≥95%
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)是一種分子量~60kD的蛋白,,在ATP,、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以催化螢光素
(Luciferin)氧化成氧化熒光素,,在此氧化過程中釋放出生物螢光,。這一熒光可通過化學(xué)發(fā)光儀或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。
本品是北美螢火蟲來(lái)源的熒光素酶基因進(jìn)行克隆表達(dá)得到的重組酶,,提供一種可靠且可依賴的工具進(jìn)行研究或配制ATP或熒光素底
物檢測(cè)用的生物發(fā)光檢測(cè)試劑盒,。重組熒光素酶能避免天然純化熒光素酶可能存在的季節(jié)和區(qū)域變化。
螢火蟲熒光素酶是常用的報(bào)告基因之一,,用來(lái)研究基因調(diào)控和功能,,以及藥物篩選實(shí)驗(yàn)。還能用于微量ATP的檢測(cè),。
【基本結(jié)構(gòu)特征】
分子量:約60-62 kDa(單體形式),,天然形式為120 kDa異源二聚體,。
結(jié)構(gòu)域:
N端大結(jié)構(gòu)域:含β-桶和β-片層,形成αβαβα五層折疊,。
C端小結(jié)構(gòu)域:與N端通過裂隙分隔,,活性位點(diǎn)位于裂隙中。
關(guān)鍵殘基:Lys529,、Thr343,、His245參與底物結(jié)合與催化;每個(gè)亞基含4個(gè)游離硫基,,其中1個(gè)為活性必需,。
空間構(gòu)象:催化時(shí)發(fā)生構(gòu)象閉合,防止水分子干擾反應(yīng),。
熱穩(wěn)定性改良
耐熱突變體(如日本螢火蟲源)在40°C孵育25分鐘后活性保留>90%,,50°C仍具活性,適用于高溫反應(yīng)體系,。
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