蛋白質(zhì)翻譯后修飾分析概述檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì是生命活動的執(zhí)行者,，從信號轉(zhuǎn)導(dǎo)到細(xì)胞結(jié)構(gòu)維持wúsuǒbùzài。但dànbáizhì在翻譯完成后,，并非立即具備生物活性,，它們通常需要經(jīng)歷一系列“翻譯后修飾”（Post-Translational Modifications, PTMs），才能實現(xiàn)功能激活,、亞細(xì)胞定位調(diào)整或降解控制,。這些修飾賦予dànbáizhì更豐富的功能層次，是細(xì)胞精密調(diào)控的關(guān)鍵方式,。深入分析dànbáizhì的翻譯后修飾,，不僅是基礎(chǔ)生命科學(xué)研究的核心任務(wù)，也是疾病機制揭示與靶點發(fā)現(xiàn)的關(guān)鍵途徑,。

一,、dànbáizhì翻譯后修飾的多樣性與功能意義

dànbáizhì翻譯后修飾是在dànbáizhì合成后，通過酶促或非酶促方式引入化學(xué)基團或結(jié)構(gòu)改變的分子事件,。目前已鑒定的PTM種類超過400種,，zuì常見的包括：

• 磷酸化（Phosphorylation）：發(fā)生在Ser、Thr,、Tyr殘基,，是信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的核心調(diào)控機制；

• 乙?；ˋcetylation）：常見于賴氨酸殘基,，參與染色質(zhì)重構(gòu)與轉(zhuǎn)錄調(diào)控；

• 泛素化（Ubiquitination）：通過連接泛素多聚鏈決定dànbáizhì降解或功能調(diào)節(jié),；

• 甲基化（Methylation）：影響基因表達,、表觀遺傳狀態(tài)；

• 糖基化（Glycosylation）：關(guān)鍵于細(xì)胞間識別,、dànbáizhì穩(wěn)定性與免疫調(diào)控,；

• 硝化,、羥基化、棕櫚?；?、硫酸化等：涉及線粒體功能、受體激活,、dànbáizhì膜錨定等多方面調(diào)控,。

這些修飾廣泛分布于哺乳動物、植物,、微生物等不同生物體,，參與細(xì)胞周期、代謝穩(wěn)態(tài),、應(yīng)激反應(yīng)乃至病理狀態(tài)（如腫瘤,、自身免疫疾病、神經(jīng)退行性疾?。┑恼{(diào)控網(wǎng)絡(luò),。

二、翻譯后修飾研究的分析策略

當(dāng)前,，質(zhì)譜技術(shù)（Mass Spectrometry, MS）無疑是PTM研究的核心平臺,。基于高分辨率質(zhì)譜的dànbáizhì組學(xué)方法,，能夠在不依賴抗體的前提下,，實現(xiàn)對全局修飾位點的高通量、定量識別,。其基本流程包括：

1,、蛋白提取與酶解

通常使用yídànbáiméi將復(fù)雜樣本中的dànbáizhì切割為肽段，以暴露潛在的修飾位點,。為了提高修飾肽的檢出率,，需特別優(yōu)化裂解條件，避免修飾丟失,。

2,、富集修飾肽段

由于修飾肽段豐度低、信號弱,，必須通過特異性富集手段進行前處理,。例如：

• 磷酸化肽可用TiO?或Fe-NTA柱富集；

• 泛素化殘基可通過K-ε-GG抗體識別特異性標(biāo)記,；

• 乙?；某Ｓ每贵w免疫沉淀或強陽離子交換色譜（SCX）富集。

3、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析（LC-MS/MS）

采用納流液相色譜（nanoLC）與高分辨率質(zhì)譜（如Orbitrap,、Q Exactive）聯(lián)用,，可實現(xiàn)修飾肽段的分離與鑒定。串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）進一步對肽段碎片進行結(jié)構(gòu)解析,，實現(xiàn)修飾位點的jīngquè定位,。

4、數(shù)據(jù)分析與注釋

修飾肽段的識別通常依賴MaxQuant,、Proteome Discoverer等軟件,，結(jié)合Unimod數(shù)據(jù)庫對修飾類型進行匹配。為提高可信度,，研究者需設(shè)定嚴(yán)格的FDR（jiǎfā現(xiàn)率）閾值，并結(jié)合手動驗證與生物學(xué)重復(fù)評估數(shù)據(jù)可靠性,。

三,、特定修飾類型的研究亮點

1、磷酸化dànbáizhì組學(xué)

磷酸化是研究zuì深入的PTM類型之一,，在信號通路研究中應(yīng)用廣泛,。高通量磷酸化組分析已成功揭示如EGFR、MAPK等關(guān)鍵通路的激活位點,，在腫瘤靶點篩選中具有廣泛應(yīng)用,。

2、泛素化和SUMO化

泛素化研究逐漸由蛋白降解功能拓展至信號調(diào)控與應(yīng)激反應(yīng),。近年來,，小泛素樣修飾（SUMOylation）因其在DNA修復(fù)和病毒感染過程中的重要性而受到關(guān)注，成為dànbáizhì穩(wěn)態(tài)研究新熱點,。

3,、糖基化與免疫相關(guān)機制

糖基化修飾在細(xì)胞識別和免疫逃逸中的角色尤為關(guān)鍵，N-糖基化與O-糖基化異常被證實與癌癥免疫抑制機制密切相關(guān),。MS結(jié)合糖譜分析為抗體藥物優(yōu)化和生物制劑純化提供重要支撐,。

dànbáizhì翻譯后修飾研究正從“dànbáizhì功能注解的補充”上升為“細(xì)胞調(diào)控研究的核心”，是理解復(fù)雜生命現(xiàn)象bùkěhuòquē的一環(huán),。無論是信號通路構(gòu)建,、疾病標(biāo)志物篩選，還是藥物靶點發(fā)現(xiàn),，PTM分析都提供了bùkětìdài的視角,。而要高效開展PTM研究，不僅需要強大的實驗平臺,，更離不開標(biāo)準(zhǔn)化,、系統(tǒng)化的技術(shù)服務(wù)支持。百泰派克生物科技依托豐富的質(zhì)譜分析經(jīng)驗與全面的dànbáizhì組學(xué)解決方案，致力于為科研工作者提供高質(zhì)量的翻譯后修飾蛋白組分析服務(wù),，助力揭示細(xì)胞調(diào)控的核心機制,，加速科研成果轉(zhuǎn)化。

百泰派克生物科技特色項目

一,、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù,，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù),。對于未知理論序列的dànbáizhì,，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進行分析,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液,、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響,。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學(xué),、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué),、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù),。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,，適用于分析組織、細(xì)胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞,，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良,，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題,?？稍趩渭?xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白,。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq,。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景,；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾,；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別,。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo),。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案,，從dànbáizhì、多肽,、抗體,、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù),。公司實驗室遵循NMPA、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué),、代謝組學(xué),、生物藥物表征、單細(xì)胞分析,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式,、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,，滿足您一站式服務(wù)需求,；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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