Universal Color DNA Purification Kit

通用型彩色 DNA 純化回收試劑盒

通用型彩色DNA純化回收試劑盒 核酸提取

目錄號:43018

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn) 

產(chǎn)品簡介：

本試劑盒既能從TAE 或TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段，又能用于直接純化 PCR 產(chǎn)物,，滿足多種實驗需要,。Buffer GS 溶液中含有 pH 指示劑，可根據(jù)顏色來判斷溶膠或 PCR 產(chǎn)物回收是否達(dá)到優(yōu)良狀態(tài),。使用本產(chǎn)品可回收 100bp~8kb 大小的DNA 片段,，回收率可達(dá) 80%,，該試劑盒操作簡便,，得到的 DNA 片段可用于酶切、連接,、測序等實驗,。

產(chǎn)品特點：

1.        快速：步驟少，操作簡便,，整個操作僅需 15 分鐘。

2.        高效：每個離心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段,，回收效率在 85%以上,。

注意事項：

1.   Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對吸附柱造成的影響,。

2.   使用前請先檢查Buffer BL,、Buffer GS 是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象,，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,，即可恢復(fù)澄清。

3.  溶液Buffer GS 含有 pH 指示劑,，為黃色,，指示 pH≤7.5。

4.    切膠時，紫外照射時間應(yīng)盡量短,，以免對 DNA 造成損傷,。

5.    回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少,、洗脫體積越小,，回收率越低。

操作步驟：

第一次使用前,，請先在 Buffer WB2 中加入無水乙醇,，并打?qū)礃?biāo)記，加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽,。

一,、從瓊脂糖凝膠中回收DNA 片段

1.   柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 400 ul Buffer BL，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,，將吸附柱重新放回收集管中。（請使用當(dāng)天處理過的柱子）

2.    切膠：在長波紫外燈下,，用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,，盡量切除不含 DNA 的凝膠。

3.    稱重：將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠,，放入 1.5 ml 離心管中,，稱取凝膠重量（去除空管重量）。如果凝膠重量為 100mg,，其體積可視為 100ul,。

4.    溶膠：加入等體積 Buffer GS，60℃水浴,，每隔 2 ~ 3 min 上下振蕩,，直到凝膠wan全溶解。

（如果凝膠濃度大于 2%,，應(yīng)加入 2 倍體積 Buffer GS,。對于回收<300 bp 的小片段，可在凝膠wan全溶解后,，再加入 0.5 倍膠塊體積的異丙醇以提高回收率,。）

5.   吸附：待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中，室溫靜置 2 min,，然后 12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液。

（如果總體積超過 750 ul,，可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中）

6.    漂洗：加入 500 ul 漂洗液Buffer WB2,，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液。

7.    二次漂洗：重復(fù)操作步驟 6,。

8.    干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min，甩干膜上殘留的乙醇,，防止其抑制下游反應(yīng),。

9.   回收：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液 Buffer EB,，室溫放置 2 min,，12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段。

（注意：為增加回收效率,，可將洗脫液在 65℃預(yù)熱,，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min,，再次離心收集,。）

二、 從 PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收 DNA 片段

1.   柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 400 ul 平衡液Buffer BL,，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液，將吸附柱重新放回收集管中,。（請使用當(dāng)天處理過的柱子）

2.   加結(jié)合液：估計PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積,，向其中加入等體積溶液Buffer GS，充分混勻,。

（注意：對于回收小于 150bp 的小片段可將溶液 Buffer GS 的體積增加到 3 倍以提高回收率）

3.   吸附：將上一步所得溶液加入一套吸附柱中,，室溫放置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,。

（ 注意：吸附柱容積為 750ul，若樣品體積大于 750ul,，可分批加入）

4.    漂洗：加入 500ul Buffer WB2,，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,。

5.    二次漂洗：重復(fù)操作步驟 4。

6.   干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min,，甩干膜上殘留的乙醇，防止其抑制下游反應(yīng),。

7.   洗脫：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中,，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液Buffer EB,，室溫放置 2 min。12,000 rpm 離心 1 min,，收集 DNA 片段,。（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在 60℃預(yù)熱,，也可將得到的溶液重新加入到離心管中,，室溫放置 2 min，再次離心收集,。）

通用型彩色DNA純化回收試劑盒 核酸提取