諾博萊德 ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate

ECL Plus超敏發(fā)光液 顯色與信號檢測

產(chǎn)品貨號：PE8898

產(chǎn)品名稱：ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate

產(chǎn)品規(guī)格：2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2

產(chǎn)品簡介：

別名：ECL超敏發(fā)光液 ECL發(fā)光液

英文名稱：ECL Western Blotting Substrate

中文名稱：ECL Plus超敏發(fā)光液

規(guī)格：2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2

儲存條件：2-8℃，avoid light,，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

產(chǎn)品介紹

NobleRyder  PE8898  ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關聯(lián)的蛋白或核酸底物,。這一du特的發(fā)光底物系統(tǒng)是目前zui靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑，具有ji高靈敏度和高信噪比,，發(fā)光迅速,，熒光可使X感光膠片感光達12小時以上，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測,。同時該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數(shù)（1：2000-1：10000）,，極其節(jié)省抗體。

ECL Plus級發(fā)光液,，是一種可廣泛應用于免疫學實驗的化學發(fā)光試劑,。實驗效果優(yōu)于市面上某zhiming品牌的超敏級發(fā)光液。

ECL Plus超敏發(fā)光液與辣根過氧化物酶進行反應,，產(chǎn)生熒光,，可以通過膠片和相對應的儀器進行信號收集。

ECL Plus靈敏度ji高,，是市面上普通DAB的1000倍以上,，在western實驗中，HRP標記的抗體（1mg/ml）能達到10萬級稀釋,，是某品牌的2-5倍左右,。ji高的靈敏度可以讓及大幅度的節(jié)省抗體成為可能，在這種情況下需要降低一抗或者二抗的稀釋度,，避免得到的是過暗的條帶,，難以比較。

ECL Plus超敏發(fā)光液發(fā)光時間長,，將兔的IgG制備成蛋白上樣樣品,，進行正常的免疫印跡實驗（上面提到的都是這種情況情況下的稀釋度，斑點試驗的稀釋度會更高）,，在化學發(fā)光拍照儀器上進行信號收集,，在20分鐘后，熒光強度與初始的熒光強度基本無變化,，30分鐘后二抗?jié)舛雀叩臒晒馍杂兴p,，其他的基本沒有變化,。

用途：用于HRP標記抗體的Western Blot和HRP標記探針的核酸雜交。

安全性：無特殊毒性,，按普通化學品處理,。

使用方法（僅供參考）：

1. 常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜,、HRP 標記抗體或核酸探針孵育,、洗膜。注意用 HRP 標記 IgG 或用一抗-鏈親 和素-生wu素-HRP 夾心法,。核酸雜交膜用 HRP 標記探針雜交,，洗膜。

2. 在洗滌膜上的 HRP 標記二抗的同時,，新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液 A 和 B 混合,， 放置使之恢復室溫否則會減弱熒光強度。建議立即使用工作液,，室溫放置數(shù)小時后仍可使用但 靈敏度略有減低,。

3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜wan全干燥,。將膜wan全浸入并與發(fā)光工作液充分接觸（約 0.125mL 發(fā)光工作液/cm2膜）,。室溫孵育 3 分鐘后立即壓片曝光。孵育時間過長不會增加靈敏度,，有時還會導致曝光條帶異常,。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應，使用過少的發(fā)光工作液不利于反應進行,，也會導致膜上條帶曝光不均勻和靈敏度明顯降低,。為達節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。

4. 用鑷子夾起膜,，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液,。但勿洗去發(fā)光液。

5. 在 X 光膠片暗盒內(nèi)面鋪一張面積大于膜的保鮮膜,。將雜交膜貼在保鮮膜上,，將保鮮膜折起來wan全包裹雜交膜，去除氣泡和皺褶,，可剪去邊緣部多余的保鮮膜,。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。 用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi),，最好蛋白帶面向上。

6. 在黑暗中放入 X 感光膠片,，分別曝光不同的時間如數(shù)秒到數(shù)分鐘,。顯影沖洗,。

注意事項：

1. 步驟 1-5 可在日光燈下操作；但發(fā)光液暴露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低,，移到暗房操作可避免,。戴手套可以避免在膜上留下手印，保持膜的潔凈,。

2. 長時間曝光或蛋白質(zhì)過量,，將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。曝光不足則條帶模糊,。

3. 發(fā)光工作液孵育約 3 分鐘后膜上的條帶發(fā)光,。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋白條帶 發(fā)光較弱,，肉眼雖不可見但能使 X 膠片曝光,。不能單憑肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時間。肉眼不可見的熒光實際上可持續(xù)數(shù)小時并使 X 膠片感光,，因而弱帶可曝光 1-10 小時,。如果曝光后條帶不 佳，可用洗膜緩沖液洗膜,，重新孵育二抗,，然后重新用 ECL 發(fā)光和曝光。

4. 由于超敏發(fā)光液的高靈敏度,，強烈推薦大多數(shù)進口抗體起始濃度為一抗 1：1000-1：4000,，二抗 1：2000-1：5000?？贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶,，導致失敗,！

5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時會淬滅熒光,，應選擇高質(zhì)量保鮮膜，例如“克林萊”牌保鮮膜,。

6. 使用肉眼可見的預染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標簽可幫助確定膠片上條帶的準確 位置和大小,。

7. NaN3 能抑制 HRP 活性，回收二抗時應避免使用 NaN3,，如必需使用勿超過 0.01%,。

ECL Plus超敏發(fā)光液 顯色與信號檢測

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NobleRyder  PE8898  ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate 2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2