諾博萊德 West Pico ECL超敏發(fā)光液，West Pico ECL Substrate

West Pico ECL超敏發(fā)光液  顯色與信號檢測

產(chǎn)品貨號：PE8808

產(chǎn)品名稱：West Pico ECL超敏發(fā)光液

產(chǎn)品規(guī)格：2*12.5ml/ 2*50ml

產(chǎn)品簡介：

英文名稱：West Pico ECL Substrate

中文名稱：West Pico ECL超敏發(fā)光液

規(guī)格：2*12.5ml/ 2*50ml

純度：＞99%

儲存條件：2-8℃,，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品介紹：

NobleRyder PE8808 West Pico ECL超敏發(fā)光液,，West Pico ECL Substrate用于檢測直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。由于采用了du特的發(fā)光底物系統(tǒng),，West Pico ECl超敏發(fā)光液是目前zui靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑：
(1) 可在日光燈下進行發(fā)光操作;

產(chǎn)品說明：

West Pico 超敏發(fā)光液用于檢測直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原,。用于HRP標(biāo)記抗體的Western Blot和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交。由于采用了du特的發(fā)光底物系統(tǒng),，West Pico超敏發(fā)光液是目前zui靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測試劑：

具有ji高靈敏度和高信噪比,；可在日光燈下進行發(fā)光操作；發(fā)光迅速,，熒光可使X光膠片感光達12小時以上,，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測；可使用更高的抗體稀釋倍數(shù)(1:2000～1:10000),，極其節(jié)省抗體,。

使用方法:

1. 執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜和Western Blot步驟。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生wu素-HRP夾法,。

2. Western Blot最后一次洗膜的同時新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液A和B,，放入干凈容器中混合。建議立即使用工作液,，室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降低,。

3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜wan全干燥,。將膜wan全浸入發(fā)光工作液(0.125mL發(fā)光工作液/cm2膜)中,，與發(fā)光工作液充分接觸。室溫孵育3分鐘,，準(zhǔn)備立即壓片曝光,。孵育時間過長不會增加靈敏度，有時還會導(dǎo)致曝光條帶異常,。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng),，使用過少的發(fā)光工作液不利反應(yīng)進行，也會導(dǎo)致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度,。為達節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量,。

4. 用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液,。但勿洗去發(fā)光液,。

5. 打開X光膠片暗盒，在暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜,。將Western Blot膜貼在保鮮膜上,，將保鮮膜折起來wan全包裹Western Blot膜，去除氣泡和皺褶,，可剪去邊緣部多余的保鮮膜,。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋Western Blot膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi),，蛋白帶面向上,。

6. 暗房內(nèi)壓X光膠片，分別曝光不同的時間如數(shù)秒到數(shù)分鐘,。顯影沖洗,。

注意事項：

1. 步驟1～5可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之,。戴手套可以避免在膜上留下手印,。

2. 長時間曝光或蛋白過量，將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關(guān)系,。曝光不足則條帶模糊,。

3. 發(fā)光工作液孵育約3分鐘后膜上的條帶發(fā)光,。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可使X光膠片曝光,。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時間,。肉眼不可見的熒光實際上可持續(xù)數(shù)小時并使X光膠片感光，因而弱帶可曝光1-10小時,。如果曝光后條帶不佳,，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗,，然后重新用ECL發(fā)光和曝光,。

4. 由于超敏發(fā)光液極其靈敏，強烈推薦大多數(shù)進口抗體起始濃度為一抗1:1000～1:4000,，二抗1:2000～1:5000,。抗體濃度過高將造成高背景或沒有條帶,，導(dǎo)致失敗,。

5. 某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜,。

6. 使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白Marker和熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小,。

7. NaN3能抑制HRP活性，回收第二抗體應(yīng)避免使用NaN3,，如必需使用勿超過0.01%,。

 備注：產(chǎn)品信息可能會有優(yōu)化升級。請以實際標(biāo)簽信息為準(zhǔn),。    

West Pico ECL超敏發(fā)光液  顯色與信號檢測

產(chǎn)品訂購信息：

NobleRyder PE8808 West Pico ECL超敏發(fā)光液，West Pico ECL Substrate  2*12.5ml/ 2*50ml