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SW0808 ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG)顯色與信號(hào)
- 公司名稱(chēng) 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) SW0808
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2025/3/18 16:21:41
- 訪問(wèn)次數(shù) 7
ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG)顯影液 抗體稀釋液SDS-PAGE電泳ECL Western Blotting Detection Kit膜封閉液
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 kit |
---|---|---|---|
貨號(hào) | SW0808 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
主要用途 | 經(jīng)顯影和定影后,可以在膠片上顯示出條帶 |
諾博萊德 ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG),ECL Western Blotting Detection Kit(Rabbit IgG)
ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG)顯色與信號(hào)檢測(cè)
產(chǎn)品貨號(hào):SW0808
產(chǎn)品名稱(chēng):ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG),ECL Western Blotting Detection Kit(Rabbit IgG)
產(chǎn)品規(guī)格:1盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
英文名稱(chēng):ECL Western Blotting Detection Kit(Rabbit IgG)
中文名稱(chēng):ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG)
規(guī)格:1盒
儲(chǔ)存條件:-20℃,,avoid light,1 year
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
SDS-PAGE電泳后,,蛋白質(zhì)按照分子量大小分離,,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)后,,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),,再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),加入發(fā)光底物后,,能讓膠片感光,。經(jīng)顯影和定影后,可以在膠片上顯示出條帶(抗原所在位置),。
保存:
-20℃避光密閉保存,,一年有效。若經(jīng)常使用,,可將封閉試劑,,抗體稀釋液和 ECL 顯色液存放于 2-8℃以方便使用。
操作步驟:(僅供參考)
常規(guī)電泳轉(zhuǎn)膜后:
1) 清洗轉(zhuǎn)印膜:將膜剝離下后,,作好標(biāo)記,,一般在左上角剪一缺口。室溫用 TBS-T 漂洗 3 次每次 5min,以盡量洗去轉(zhuǎn)印膜上的 SDS,,防止影響后面的抗體結(jié)合,。
2) 按 5g 封閉試劑加 100ml 雙蒸水計(jì),配制膜封閉液,,配好的膜封閉液為乳白色懸液,,將漂洗過(guò)的轉(zhuǎn)印膜放入封 閉液內(nèi),置搖床孵育,,室溫封閉 30min,。用 TBS-T 緩沖液(PH7.6)洗膜,室溫漂洗 3 次每次 5min,。
3) 將 10×抗體稀釋液用雙蒸水稀釋成 1×(10ml 10×抗體稀釋液加入 90ml 雙蒸水,,混勻,可 4℃保存三個(gè)月),。 此稀釋液可作為一抗和二抗的稀釋液,。
4) 用 1×的抗體稀釋液稀釋一抗。根據(jù)用量以及一抗的推薦稀釋濃度來(lái)稀釋一抗,。將雜交膜放入雜交袋中,,加入 一抗工作液,封口,,4℃孵育過(guò)夜或 37℃搖動(dòng)孵育 2h,。此用過(guò)的抗體一般可回收第二天再使用一次。注:如果所 加一抗不同,可在此步將膜沿電泳方向剪成條,,分別作好標(biāo)記,,分開(kāi)孵育。
5) 用 TBS-T 緩沖液(PH7.6)洗膜,,室溫漂洗 3 次每次 5min,。
6) 用 1×的抗體稀釋液稀釋二抗。根據(jù)用量,,按 10ml 抗體稀釋液加入 1-2 ul HRP 標(biāo)記二抗的比例,配制二抗工作 液,。將雜交膜放入雜交袋中,,加入二抗工作液,封口,,37℃搖動(dòng)孵育 1h,。此用過(guò)的抗體一般可回收第二天再使用 一次。
7) 用 TBS-T 緩沖液(PH7.6)洗膜,,室溫漂洗 3 次每次 10min,。
8) 根據(jù)用量,取 ECL 發(fā)光液 A,、B 等量混勻,,加在膜正面,暗室顯色 1-5 分種,。傾去顯色液,,小心用紙吸去顯色液,在上面蓋一層平整的透明紙,。再取出感光膠片,,做好標(biāo)記,輕輕的放在膜上,,顯色 30 秒到 1 分鐘,,取出膠片 浸入顯影液中,觀察顯色情況,,再放入定影液中 1 分鐘,。根據(jù)條帶強(qiáng)弱,再次感光時(shí)可減短或者加長(zhǎng)感光時(shí)間(從 5 秒到 30 分鐘)以期達(dá)到理想結(jié)果,。
注意事項(xiàng):
1. 請(qǐng)根據(jù)一抗來(lái)源選擇試劑盒,。
2. 可以根據(jù)顯色結(jié)果來(lái)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間。如背景過(guò)深,,可延長(zhǎng)膜封閉時(shí)間,,加長(zhǎng)最終漂洗次數(shù)與時(shí)間。如果條 帶過(guò)弱,可增加抗體濃度,,可延長(zhǎng)抗體孵育時(shí)間或加長(zhǎng)感光時(shí)間,。
3. TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:稱(chēng)取 NaCl 8.5g ,,Tris 1.21g ,,用 800ml 的雙蒸水溶解,用鹽酸調(diào) PH 到 7.6,, 再加入 0.5ml Tween-20,,用雙蒸水加至1000ml,混勻即可,。(也可按照自己的配制習(xí)慣來(lái)配制)
ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG)顯色與信號(hào)檢測(cè)
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
NobleRyder SW0808 ECL化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)試劑盒(兔IgG),ECL Western Blotting Detection Kit(Rabbit IgG) 1盒
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