JM109 大腸桿菌克隆感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海富雨生物科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/2/11 11:47:52
- 訪問次數(shù) 42
聯(lián)系方式:陳壽彬18956075901 查看聯(lián)系方式
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JM109 大腸桿菌克隆感受態(tài)細胞
產(chǎn)品信息:
組成 BC103-01 BC103-02
JM109 Competent cells 10×100µl 20×100µl
pUC19(0.1ng/µl) 5µl 5µl
儲存條件:-70℃保存,,避免反復(fù)凍融.
產(chǎn)品介紹:
本公司生產(chǎn)的 JM109 感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌 JM109 菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于
DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化,。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,,轉(zhuǎn)化效率可達 10 8 cfu/µg,-70℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變,。
每支感受態(tài)可以酌情分裝使用,,降低了實驗的成本。質(zhì)量穩(wěn)定,,使用方便,,質(zhì)優(yōu)價廉。
基因型:endA1recA1gyrA96thihsdR17(rk-mk+)relA1supE44D(lac-proAB)[F’traD36proABlacI qZΔM15]
產(chǎn)品特點:
JM109 菌株來源于 E.coli K12 菌株,,是提取高質(zhì)量質(zhì)粒 DNA 的理想菌株,。缺失核酸內(nèi)切酶 (endA1),提
高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量,;重組酶缺陷型(recA1)減少插入片段的同源重組概率,,保證了插入 DNA 的穩(wěn)定
性。hsdR17 突變導(dǎo)致 EcoK 核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,,使得異源 DNA 不被內(nèi)源核酸酶系統(tǒng)降解。lacI qZΔM15 的存
在使 JM109 可用于構(gòu)建克隆,,藍白斑篩選實驗,。
操作步驟(以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進行):
提示
?
感受態(tài)細胞應(yīng)保存在-70℃,不可多次凍融和放置時間過長,,以避免降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率,。
?
進行轉(zhuǎn)化操作時,應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件的要求進行,。
?
為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功,,可以保留部分連接反應(yīng)液,,以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到,。
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中,,如需分裝可將剛?cè)诨毎麘乙悍盅b到無菌預(yù)冷的離心管中,置于冰浴中,。
(一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100μl,,可以根據(jù)實際情況分裝使用。應(yīng)注意所用 DNA 體積
不要超過感受態(tài)細胞懸液體積的十分之一,。)以下實驗以 100μl 感受態(tài)細胞為例,。
2. 向感受態(tài)細胞懸液中加入目的 DNA,輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,,在冰浴中靜置 30 分鐘,。
3. 將離心管置于 42℃水浴中放置 60 秒鐘,然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中,,使細胞冷卻 2 分鐘,,該過程不要
搖動離心管。(此步驟也可將離心管置于室溫進行,,時間不需十分準(zhǔn)確,,夏季或室溫較高時,可放置
5-8 分鐘左右,;如果室溫較低,,可延長時間至 8-15 分鐘左右。條件允許建議使用 42℃熱激方法,。)
4. 向每個離心管中加入 500μl 無菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基(不含抗生素),,混勻后置于 37℃,150rpm,,搖
床振蕩培養(yǎng) 60 分鐘,,目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達,使菌體復(fù)蘇,。
5. 無菌條件下,,取適量菌液加到含相應(yīng)抗生素的 LB 固體培養(yǎng)基平板上,用無菌的細菌涂布器或玻璃珠將
細胞均勻涂開,。等平板中的液體吸收后,,倒置平板,37℃培養(yǎng) 12-16 小時,。(涂布用量可根據(jù)具
體實驗來調(diào)整,。轉(zhuǎn)化質(zhì)粒在 10ng 左右,90mm 平皿涂布 100µl,55mm 平皿涂布 50µl,;連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)
化菌液建議離心后倒掉大部分上清,,余 200µl,取 100µl 用于涂布,。)
6. 保留剩余的菌液于 4℃冰箱中,,視平板上菌落生長情況決定去留。
相關(guān)試劑及培養(yǎng)基的制備方法:
1. LB 液體培養(yǎng)基:稱取 10g Tryptone,,5g Yeast Extract 和 10g NaCl 置于 1L 燒杯中,。加入約 800ml 的
去離子水,溶解后用 2mol/L 的 NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH 值至 7.0,。加去離子水定容至 1L,。分裝
后,121℃高壓滅菌 20 分鐘,。
2. SOB 和 SOC 培養(yǎng)基:稱取 20g Tryptone,,5g Yeast Extract,0.5g NaCl 置于 1L 燒杯中加入約 800ml 的
去離子水,,溶解后再補加 10ml 250mM KCl 溶液,,滴加 5M NaOH(約 0.2ml)調(diào) pH 至 7.0。加
入去離子水將培養(yǎng)基定容至 1L,。121℃滅菌 20 分鐘,。使用時加入 5ml 滅菌的 2M MgCl2溶液(此種
培養(yǎng)基稱為 SOB)。再補加經(jīng) 0.22μm 過濾除菌的 1M 葡萄糖溶液 2ml(此種培養(yǎng)基為 SOC),。
3. 轉(zhuǎn)化復(fù)蘇細菌用的液體 LB 培養(yǎng)基或 SOC 培養(yǎng)基:可以一次高壓 50ml 液體培養(yǎng)基,,無菌狀態(tài)按 1ml
每管分裝于高壓滅菌的 1.5ml 離心管中,裝于自封袋中,,凍存于-20℃中,,每次用一支??梢詷O大地避
免培養(yǎng)基污染和減少勞動量,。
4. LB 固體選擇培養(yǎng)基:100ml LB 液體培養(yǎng)基中加入 1.5g 瓊脂粉,搖勻后,,121℃高壓滅菌 20 分鐘,。
冷卻至 50℃左右時加入相應(yīng)濃度的抗生素(如 AMP 濃度通常為 100μg/ml),混勻后倒在細菌用的無菌
培養(yǎng)皿中,,等瓊脂凝固后即可使用,。
5. IPTG:稱量 1.9g IPTG(MW=238.31)充分溶解于 40ml 滅菌水,濃度為 200mmol/L,。用無菌
0.22μm過濾膜過濾除菌。小份分裝后,-20℃保存,。
6. X-gal:用 DMF(二甲基甲酰胺)配制成 20mg/ml,,小份分裝(1ml/份)后,-20℃避光保存,。
南京萬木春生物科技有限公司(Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒,、 抗體、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué),、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝,、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻發(fā)表,,被國內(nèi)外多所大學(xué)、研究機構(gòu)和藥學(xué)平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可,。
品牌優(yōu)勢
1、產(chǎn)品優(yōu)勢:產(chǎn)品具有高特異性,、回收率高,、線性好、變異系數(shù)低,、穩(wěn)定性好,;
2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,,每批次產(chǎn)品必須通過 QA,、QC 檢測才可出庫;
3,、實力強大: 標(biāo)準(zhǔn)實驗室,、研發(fā)中心,動物房 ,;
4,、技術(shù)支持:技術(shù)部 5*8 小時技術(shù)問題及時解答;
5,、服務(wù)周到:發(fā)貨及時,,三個工作日順豐快遞,;售后無憂,包退包換,。
6,、研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品:ELISA 試劑盒:人,、大小鼠,、牛、兔,、山羊,、倉鼠、豬,、馬,、雞、犬,、豚鼠,、猴、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo),;
抗體:兔多抗,、鼠單抗種類豐富,一抗 1 萬余種,,二抗 100 多種,;
重組蛋白:多項發(fā)明,原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白 1000 余種,。
掃一掃,,加微信
聯(lián)系電話:19156044901 (同微信) ,QQ: 3361589519
產(chǎn)品信息:
組成 BC103-01 BC103-02
JM109 Competent cells 10×100µl 20×100µl
pUC19(0.1ng/µl) 5µl 5µl
儲存條件:-70℃保存,,避免反復(fù)凍融.
產(chǎn)品介紹:
本公司生產(chǎn)的 JM109 感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌 JM109 菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于
DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化,。使用 pUC19 質(zhì)粒檢測,,轉(zhuǎn)化效率可達 10 8 cfu/µg,-70℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變,。
每支感受態(tài)可以酌情分裝使用,,降低了實驗的成本。質(zhì)量穩(wěn)定,,使用方便,,質(zhì)優(yōu)價廉。
基因型:endA1recA1gyrA96thihsdR17(rk-mk+)relA1supE44D(lac-proAB)[F’traD36proABlacI qZΔM15]
產(chǎn)品特點:
JM109 菌株來源于 E.coli K12 菌株,,是提取高質(zhì)量質(zhì)粒 DNA 的理想菌株,。缺失核酸內(nèi)切酶 (endA1),提
高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量,;重組酶缺陷型(recA1)減少插入片段的同源重組概率,,保證了插入 DNA 的穩(wěn)定
性。hsdR17 突變導(dǎo)致 EcoK 核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,,使得異源 DNA 不被內(nèi)源核酸酶系統(tǒng)降解。lacI qZΔM15 的存
在使 JM109 可用于構(gòu)建克隆,,藍白斑篩選實驗,。
操作步驟(以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進行):
提示
?
感受態(tài)細胞應(yīng)保存在-70℃,不可多次凍融和放置時間過長,,以避免降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率,。
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進行轉(zhuǎn)化操作時,應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件的要求進行,。
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為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功,,可以保留部分連接反應(yīng)液,,以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到,。
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中,,如需分裝可將剛?cè)诨毎麘乙悍盅b到無菌預(yù)冷的離心管中,置于冰浴中,。
(一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100μl,,可以根據(jù)實際情況分裝使用。應(yīng)注意所用 DNA 體積
不要超過感受態(tài)細胞懸液體積的十分之一,。)以下實驗以 100μl 感受態(tài)細胞為例,。
2. 向感受態(tài)細胞懸液中加入目的 DNA,輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,,在冰浴中靜置 30 分鐘,。
3. 將離心管置于 42℃水浴中放置 60 秒鐘,然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中,,使細胞冷卻 2 分鐘,,該過程不要
搖動離心管。(此步驟也可將離心管置于室溫進行,,時間不需十分準(zhǔn)確,,夏季或室溫較高時,可放置
5-8 分鐘左右,;如果室溫較低,,可延長時間至 8-15 分鐘左右。條件允許建議使用 42℃熱激方法,。)
4. 向每個離心管中加入 500μl 無菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基(不含抗生素),,混勻后置于 37℃,150rpm,,搖
床振蕩培養(yǎng) 60 分鐘,,目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達,使菌體復(fù)蘇,。
5. 無菌條件下,,取適量菌液加到含相應(yīng)抗生素的 LB 固體培養(yǎng)基平板上,用無菌的細菌涂布器或玻璃珠將
細胞均勻涂開,。等平板中的液體吸收后,,倒置平板,37℃培養(yǎng) 12-16 小時,。(涂布用量可根據(jù)具
體實驗來調(diào)整,。轉(zhuǎn)化質(zhì)粒在 10ng 左右,90mm 平皿涂布 100µl,55mm 平皿涂布 50µl,;連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)
化菌液建議離心后倒掉大部分上清,,余 200µl,取 100µl 用于涂布,。)
6. 保留剩余的菌液于 4℃冰箱中,,視平板上菌落生長情況決定去留。
相關(guān)試劑及培養(yǎng)基的制備方法:
1. LB 液體培養(yǎng)基:稱取 10g Tryptone,,5g Yeast Extract 和 10g NaCl 置于 1L 燒杯中,。加入約 800ml 的
去離子水,溶解后用 2mol/L 的 NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH 值至 7.0,。加去離子水定容至 1L,。分裝
后,121℃高壓滅菌 20 分鐘,。
2. SOB 和 SOC 培養(yǎng)基:稱取 20g Tryptone,,5g Yeast Extract,0.5g NaCl 置于 1L 燒杯中加入約 800ml 的
去離子水,,溶解后再補加 10ml 250mM KCl 溶液,,滴加 5M NaOH(約 0.2ml)調(diào) pH 至 7.0。加
入去離子水將培養(yǎng)基定容至 1L,。121℃滅菌 20 分鐘,。使用時加入 5ml 滅菌的 2M MgCl2溶液(此種
培養(yǎng)基稱為 SOB)。再補加經(jīng) 0.22μm 過濾除菌的 1M 葡萄糖溶液 2ml(此種培養(yǎng)基為 SOC),。
3. 轉(zhuǎn)化復(fù)蘇細菌用的液體 LB 培養(yǎng)基或 SOC 培養(yǎng)基:可以一次高壓 50ml 液體培養(yǎng)基,,無菌狀態(tài)按 1ml
每管分裝于高壓滅菌的 1.5ml 離心管中,裝于自封袋中,,凍存于-20℃中,,每次用一支??梢詷O大地避
免培養(yǎng)基污染和減少勞動量,。
4. LB 固體選擇培養(yǎng)基:100ml LB 液體培養(yǎng)基中加入 1.5g 瓊脂粉,搖勻后,,121℃高壓滅菌 20 分鐘,。
冷卻至 50℃左右時加入相應(yīng)濃度的抗生素(如 AMP 濃度通常為 100μg/ml),混勻后倒在細菌用的無菌
培養(yǎng)皿中,,等瓊脂凝固后即可使用,。
5. IPTG:稱量 1.9g IPTG(MW=238.31)充分溶解于 40ml 滅菌水,濃度為 200mmol/L,。用無菌
0.22μm過濾膜過濾除菌。小份分裝后,-20℃保存,。
6. X-gal:用 DMF(二甲基甲酰胺)配制成 20mg/ml,,小份分裝(1ml/份)后,-20℃避光保存,。
E ,、感受態(tài)細胞 | |||
E-1 、大腸桿菌克隆感受態(tài)細胞 | |||
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
BC101-01 | 0 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC101-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC102-01 | DH5α 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC102-02 | DH5α 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC103-01 | JM109 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC103-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC104-01 | XL1-Blue 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC104-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC105-01 | Mach 1-T1 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC105-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC117-01 | Turbo 感受態(tài)細胞 | 100ul ×10 | 包 |
BC117-02 | 100ul ×20 | 包 | |
BC118-01 | Stable 感受態(tài)細胞 | 100ul ×20 | 包 |
BC106-01 | DH10B 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC106-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC107-01 | OmniMAX2-T1 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC107-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC108-01 | Stbl3 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC115-01 | Stbl4 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC109-01 | XL10-Gold 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC110-01 | JM110 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC111-01 | DB3. 1 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC112-01 | DH10BAC 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC113-01 | NEB 10-beta 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
BC114-01 | BJ5183-AD- 1 感受態(tài)細胞 | 100μl ×20 | 包 |
E-2 ,、大腸桿菌表達感受態(tài)細胞 | |||
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
BC201-01 | BL21(DE3) 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC201-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC202-01 | BL21(DE3) pLysS 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC202-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC203-01 | M15 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC203-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC204-01 | Rosetta(DE3) 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC204-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC205-01 | OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC205-02 | 100ul ×20 | 包 | |
BC206-01 | T7 表達感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC206-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC207-01 | T7pLysY 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC207-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC208-01 | Shuffle T7-K12 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC208-02 | 100μl ×20 | 包 | |
BC209-01 | Shuffle T7-B 感受態(tài)細胞 | 100μl ×10 | 包 |
BC209-02 | 100μl ×20 | 包 | |
E-3 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | |||
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
BC401-01 | NEB 10-beta 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
BC402-01 | BJ5183 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
BC403-01 | BJ5183-AD- 1 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
BC404-01 | 0 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
BC405-01 | DH5α 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
E-4 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 | |||
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
BC301-01 | LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 | 100ul ×20 | 包 |
BC302-01 | AGL1 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 | 100ul ×20 | 包 |
BC303-01 | EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 | 100ul ×20 | 包 |
BC304-01 | GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞 | 100ul ×20 | 包 |
E-5 ,、農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | |||
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
BC305-01 | LBA4404 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
BC306-01 | AGL1 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受電轉(zhuǎn)態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
BC307-01 | EHA105 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |
BC308-01 | GV3101 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞 | 50μl ×20 | 包 |


品牌優(yōu)勢
1、產(chǎn)品優(yōu)勢:產(chǎn)品具有高特異性,、回收率高,、線性好、變異系數(shù)低,、穩(wěn)定性好,;
2、質(zhì)量保證:產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,,每批次產(chǎn)品必須通過 QA,、QC 檢測才可出庫;
3,、實力強大: 標(biāo)準(zhǔn)實驗室,、研發(fā)中心,動物房 ,;
4,、技術(shù)支持:技術(shù)部 5*8 小時技術(shù)問題及時解答;
5,、服務(wù)周到:發(fā)貨及時,,三個工作日順豐快遞,;售后無憂,包退包換,。
6,、研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品:ELISA 試劑盒:人,、大小鼠,、牛、兔,、山羊,、倉鼠、豬,、馬,、雞、犬,、豚鼠,、猴、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo),;
抗體:兔多抗,、鼠單抗種類豐富,一抗 1 萬余種,,二抗 100 多種,;
重組蛋白:多項發(fā)明,原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白 1000 余種,。

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