DB3. 1 大腸桿菌克隆感受
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海富雨生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/11 11:43:24
- 訪問(wèn)次數(shù) 48
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DB3.1 大腸桿菌克隆感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
組成 BC111-01
DB3.1 Competent cells 20×100µl
DB3.1 Competent cells 20×100µl
pUC19（0.1ng/µl） 5µl
儲(chǔ)存條件：-70℃保存,，避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品介紹：
本公司生產(chǎn)的大腸桿菌DB3.1細(xì)胞含有gyrA462基因,，對(duì)λ噬菌體的ccdB基因產(chǎn)物的毒性具有抵抗作用,，特
別適用于轉(zhuǎn)化和擴(kuò)增包含ccdB基因的質(zhì)粒載體。使用pUC19質(zhì)粒檢測(cè),，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)107 cfu/µg,，-70℃保存幾
個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。每支感受態(tài)可以酌情分裝使用,，降低了實(shí)驗(yàn)的成本,。質(zhì)量穩(wěn)定，使用方便,，質(zhì)優(yōu)價(jià)
廉,。
基因型：
F-gyrA462endA1Δ(sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(SmR )xyl-5λ-leumtl1
抗生素耐藥性：細(xì)胞具有抗性。
操作步驟（以下操作均按無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）：
提示
?
感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-70℃,，不可多次凍融和放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
?
進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí),，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無(wú)菌條件的要求進(jìn)行,。
?
為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液,，以重新轉(zhuǎn)化,，將損失降到。
1. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中,，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無(wú)菌預(yù)冷的離心管中,，置于冰浴中。
（一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為 50-100μl，可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用,。應(yīng)注意所用 DNA體積
不要超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一,。)以下實(shí)驗(yàn)以 100μl 感受態(tài)細(xì)胞為例。
2. 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的 DNA,，輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物,，在冰浴中靜置 30 分鐘。
3. 將離心管置于 42℃水浴中放置 60 秒鐘,，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻 2 分鐘,，該過(guò)程不
要搖動(dòng)離心管,。（此步驟也可將離心管置于室溫進(jìn)行，時(shí)間不需十分準(zhǔn)確,，夏季或室溫較高時(shí),，可放
置
5-8 分鐘左右；如果室溫較低,，可延長(zhǎng)時(shí)間至 8-15 分鐘左右,。條件允許建議使用 42℃熱激方法。）
4. 向每個(gè)離心管中加入500μl 無(wú)菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）,，混勻后置于37℃ ,150rpm,，搖
床振蕩培養(yǎng) 60 分鐘，目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá),，使菌體復(fù)蘇,。
5. 無(wú)菌條件下，取適量菌液加到含相應(yīng)抗生素的 LB 固體培養(yǎng)基平板上,，用無(wú)菌的細(xì)菌涂布器或玻璃珠將
細(xì)胞均勻涂開(kāi),。等平板中的液體吸收后，倒置平板,，37℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí),。（涂布用量可根據(jù)具
體實(shí)驗(yàn)來(lái)調(diào)整。轉(zhuǎn)化質(zhì)粒在 10ng 左右,，90mm 平皿涂布 100µl,，55mm 平皿涂布 50µl；連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)
化菌液建議離心后倒掉大部分上清,，余 200µl,，取 100µl 用于涂布。）
6. 保留剩余的菌液于 4℃冰箱中,，視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留,。
相關(guān)試劑及培養(yǎng)基的制備方法：
1. LB 液體培養(yǎng)基：稱取 10g Tryptone，5g Yeast Extract 和 10g NaCl 置于1L 燒杯中。加入約 800ml 的去
離子水,，溶解后用 2mol/L 的 NaOH 溶液調(diào)節(jié) pH 值至 7.0,。加去離子水定容至 1L。分裝
后,，121℃高壓滅菌 20 分鐘,。
2. SOB 和 SOC 培養(yǎng)基：稱取 20g Tryptone，5g Yeast Extract,，0.5g NaCl 置于 1L 燒杯中加入約 800ml 的
去離子水,，溶解后再補(bǔ)加 10ml 250mM KCl 溶液，滴加 5M NaOH（約 0.2ml）調(diào) pH 至 7.0,。加
入去離子水將培養(yǎng)基定容至 1L,。121℃滅菌 20 分鐘。使用時(shí)加入5ml 滅菌的 2M MgCl2溶液（此種培
養(yǎng)基稱為 SOB）,。再補(bǔ)加經(jīng) 0.22µm 過(guò)濾除菌的 1M 葡萄糖溶液2ml（此種培養(yǎng)基為 SOC）,。
3. 轉(zhuǎn)化復(fù)蘇細(xì)菌用的液體 LB 培養(yǎng)基或 SOC 培養(yǎng)基：可以一次高壓 50ml 液體培養(yǎng)基，無(wú)菌狀態(tài)按 1ml
每管分裝于高壓滅菌的 1.5ml 離心管中,，裝于自封袋中,，凍存于-20℃中，每次用一支,?？梢詷O大地避
免培養(yǎng)基污染和減少勞動(dòng)量。
4. LB 固體選擇培養(yǎng)基：100ml LB 液體培養(yǎng)基中加入1.5g 瓊脂粉,，搖勻后,，121℃高壓滅菌 20 分鐘。冷
卻至 50℃左右時(shí)加入相應(yīng)濃度的抗生素（如 AMP 濃度通常為 100µg/ml）,，混勻后倒在細(xì)菌用的無(wú)菌
培養(yǎng)皿中,，等瓊脂凝固后即可使用。
5. IPTG：稱量 1.9g IPTG（MW=238.31）充分溶解于40ml 滅菌水,，濃度為200mmol/L,。用無(wú)菌0.22μm過(guò)
濾膜過(guò)濾除菌。小份分裝后,，-20℃保存,。
6. X-gal：用 DMF（二甲基甲酰胺）配制成 20mg/ml，小份分裝（1ml/份）后,，-20℃避光保存,。
南京萬(wàn)木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑,。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝,、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表，被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可。
品牌優(yōu)勢(shì)
1,、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高,、線性好,、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好,；
2,、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過(guò) QA,、QC 檢測(cè)才可出庫(kù),；
3、實(shí)力強(qiáng)大： 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室,、研發(fā)中心,，動(dòng)物房 ；
4,、技術(shù)支持：技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問(wèn)題及時(shí)解答,；
5、服務(wù)周到：發(fā)貨及時(shí),，三個(gè)工作日順豐快遞,；售后無(wú)憂，包退包換,。
6,、研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：ELISA 試劑盒：人,、大小鼠,、牛、兔、山羊,、倉(cāng)鼠,、豬、馬,、雞,、犬、豚鼠,、猴,、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo)；
抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬(wàn)余種，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明,，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。
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聯(lián)系電話：19156044901 （同微信） ,，QQ： 3361589519
E 、感受態(tài)細(xì)胞 | |||
| E-1 ,、大腸桿菌克隆感受態(tài)細(xì)胞 | |||
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
| BC101-01 | 0 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC101-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC102-01 | DH5α 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC102-02 | DH5α 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC103-01 | JM109 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC103-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC104-01 | XL1-Blue 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC104-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC105-01 | Mach 1-T1 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC105-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC117-01 | Turbo 感受態(tài)細(xì)胞 | 100ul ×10 | 包 |
| BC117-02 | 100ul ×20 | 包 | |
| BC118-01 | Stable 感受態(tài)細(xì)胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC106-01 | DH10B 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC106-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC107-01 | OmniMAX2-T1 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC107-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC108-01 | Stbl3 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC115-01 | Stbl4 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC109-01 | XL10-Gold 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC110-01 | JM110 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC111-01 | DB3. 1 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC112-01 | DH10BAC 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC113-01 | NEB 10-beta 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC114-01 | BJ5183-AD- 1 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×20 | 包 |
| E-2 ,、大腸桿菌表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞 | |||
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
| BC201-01 | BL21(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC201-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC202-01 | BL21(DE3) pLysS 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC202-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC203-01 | M15 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC203-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC204-01 | Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC204-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC205-01 | OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC205-02 | 100ul ×20 | 包 | |
| BC206-01 | T7 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC206-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC207-01 | T7pLysY 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC207-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC208-01 | Shuffle T7-K12 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC208-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC209-01 | Shuffle T7-B 感受態(tài)細(xì)胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC209-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| E-3 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | |||
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
| BC401-01 | NEB 10-beta 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC402-01 | BJ5183 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC403-01 | BJ5183-AD- 1 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC404-01 | 0 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC405-01 | DH5α 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| E-4 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | |||
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
| BC301-01 | LBA4404 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC302-01 | AGL1 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC303-01 | EHA105 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC304-01 | GV3101 農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞 | 100ul ×20 | 包 |
| E-5 、農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | |||
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 單位 |
| BC305-01 | LBA4404 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC306-01 | AGL1 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受電轉(zhuǎn)態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC307-01 | EHA105 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC308-01 | GV3101 農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞 | 50μl ×20 | 包 |
南京萬(wàn)木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑,。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝,、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表，被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可。 品牌優(yōu)勢(shì)
1,、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高,、線性好,、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好,；
2,、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過(guò) QA,、QC 檢測(cè)才可出庫(kù),；
3、實(shí)力強(qiáng)大： 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室,、研發(fā)中心,，動(dòng)物房 ；
4,、技術(shù)支持：技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問(wèn)題及時(shí)解答,；
5、服務(wù)周到：發(fā)貨及時(shí),，三個(gè)工作日順豐快遞,；售后無(wú)憂，包退包換,。
6,、研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：ELISA 試劑盒：人,、大小鼠,、牛、兔、山羊,、倉(cāng)鼠,、豬、馬,、雞,、犬、豚鼠,、猴,、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo)；
抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬(wàn)余種，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明,，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。
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