Stable 大腸桿菌克隆 感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
組成 BC118-01
Stable Competent cells 20×100?l
pUC19（0.1ng/µl） 5?l
儲(chǔ)存條件：-70℃保存，避免反復(fù)凍融。不適合在液氮中保存,。
產(chǎn)品介紹：
本公司生產(chǎn)的Stable感受態(tài)細(xì)胞是采用Stable菌株經(jīng)特殊工藝制備得到的感受態(tài)細(xì)胞,。Stable菌株特別適用
于具有末端重復(fù)序列的逆轉(zhuǎn)錄病毒或慢病毒質(zhì)粒的構(gòu)建和擴(kuò)增，也適用于重復(fù)DNA序列的克隆和擴(kuò)增,。Stable
具有與Stbl3和Stbl4不同的基因型,，比Stbl3和Stbl4生長(zhǎng)速度更快，性能更好,。核酸內(nèi)切酶(endA1)基因的缺
失有利于提高質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量,。ΔlacZM15基因的存在可用于藍(lán)白斑篩選。菌株還具有抗T1噬菌體感染
的特點(diǎn),。Stable感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率大于10 8 cfu/μg,。
基因型:
F′ proA+B+ lacI q Δ(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR )/Δ(ara-leu) 7697 araD139 fhuA ΔlacX74 galK16 galE15e14-
?80dlacZΔM15 recA1 relA1 endA1 nupG rpsL (StrR ) rph spoT1 Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)
菌株抗性：對(duì)氨芐、,、,、和敏感。具有四環(huán)素和抗性,。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化步驟
1.將感受態(tài)細(xì)胞置于冰水浴中化凍,。待細(xì)胞剛化凍后，加入 1-5μl 含有 1-100ng 的質(zhì)粒 DNA 或 5-10μl 連接
產(chǎn)物到細(xì)胞中,，用手指管底,，輕輕混勻。
2.冰水浴中放置 30 分鐘,，不要晃動(dòng),。
3.42℃熱擊 60 秒鐘，不要晃動(dòng),。
4.冰水浴中放置 2 分鐘,，不要晃動(dòng)。
5.加入 500μl 的室溫的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基,。
6.置于 37℃搖床中,，150-200rpm 震蕩復(fù)蘇培養(yǎng) 60 分鐘。
7.取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上,。待液體吸干后,，倒置平板，37℃培養(yǎng) 12-18 小時(shí),。
（平板劃線分離法：復(fù)蘇培養(yǎng)結(jié)束后,，12000rpm離心30秒鐘，棄掉上清,，留100μl左右的液體,，用200μl吸頭輕
輕吹打散菌塊,，取10μl重懸的菌液分多點(diǎn)滴在平板上，傾斜吸頭,，用吸頭頭部的側(cè)面將滴在平板上的液體來
回劃線,。這個(gè)方法可以獲得更大的單克隆菌落。此方法主要適用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化用涂布法,。）
（質(zhì)粒快速轉(zhuǎn)化步驟：對(duì)于氨芐抗性的質(zhì)粒,，將步驟 2 的時(shí)間縮短到 5 分鐘,，步驟 4 完成后，可直接涂
布或劃線于含氨芐抗性的 LB 平板上,。其它抗性的質(zhì)粒仍需 60 分鐘的復(fù)蘇培養(yǎng),。）


南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專業(yè)研發(fā),、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、 外泌體、ELISA 試劑盒,、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑。產(chǎn)品在免疫學(xué),、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表,，被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可,。
品牌優(yōu)勢(shì)
1,、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高,、線性好,、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好,；
2,、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過 QA,、QC 檢測(cè)才可出庫(kù),；
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抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富，一抗 1 萬余種,，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種,。


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