NovoCyte Advanteon 流式細(xì)胞儀（1-3激光）建立在大獲成功的 NovoCyte 和 NovoCyte Quanteon 基礎(chǔ)之上,。該系統(tǒng)為高要求的科學(xué)家們提供了一套先進(jìn)的功能，而且操作非常簡單,。NovoCyte Advanteon 流式細(xì)胞儀能夠適應(yīng)日益復(fù)雜的多色流式細(xì)胞檢測,。該系統(tǒng)可靈活配置 1 至 3 個激光器，并提供最多 21 個熒光通道和 23 個獨(dú)立的檢測器,。

安捷倫 NovoCyte Advanteon 流式細(xì)胞儀（1-3激光）可針對您的特定需求量身定制,，同時可輕松升級以滿足您未來的需求。當(dāng)需要實(shí)現(xiàn)高通量檢測時,，可以將 NovoSampler Q 集成到不同的實(shí)驗(yàn)室自動化平臺中,。這款進(jìn)樣器可以高效處理 FACS 管（使用 40 管流式管架）和 24、48,、96 及 384 孔板,。對于 NovoCyte Advanteon 而言,，直觀且享譽(yù)業(yè)界的 NovoExpress 軟件現(xiàn)在更加先進(jìn)，能夠在數(shù)據(jù)采集,、分析和報告方面提供出色的用戶體驗(yàn),。

特性

1、更高靈活性,，使用 1 至 3 個激光器提供多達(dá) 21 種顏色選擇,，支持定制和升級

2、樣品回收模式用于在采集結(jié)束時收集未使用的樣品

3,、出色的靈敏度和分辨率

4,、直觀且強(qiáng)大的軟件，用于數(shù)據(jù)采集,、分析和報告

5,、智能設(shè)計功能和無人值守操作，可簡化您的工作流程

6,、自動化功能,，可滿足高通量檢測需求

7、動態(tài)范圍寬達(dá) 7.2 個數(shù)量級,，無需調(diào)節(jié)增益檢測器電壓

8,、高速采集,，采集速率高達(dá) 100000 事件/秒

9,、每個實(shí)驗(yàn)中均能實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的絕對細(xì)胞計數(shù)，無需使用參比微球

性能指標(biāo)

工作原理

高靈敏度的光電檢測器

硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態(tài)半導(dǎo)體器件,，具備光子能級靈敏度,，動態(tài)范圍為 7.2 個數(shù)量級，是一款具有光子計數(shù)功能的緊湊檢測器,。NovoCyte Advanteon 設(shè)計中的創(chuàng)新光學(xué)器件包含 21 個獨(dú)立的 SiPM,，可收集并處理來自每個熒光通道的信號。

出色的散射光分辨率,，可檢測小顆粒

NovoCyte Advanteon 散射光檢測光學(xué)系統(tǒng)和信號處理電子器件經(jīng)過優(yōu)化,，可以分辨粒徑小至 0.1 µm 的顆粒。憑借這種優(yōu)異的分辨率,，可輕松識別和分析血小板,、細(xì)菌和各種亞微米顆粒。

無論流速快慢,，結(jié)果保持一致

NovoCyte Advanteon 的流體反饋控制機(jī)制可始終確保非常穩(wěn)定的流速,。各種樣品流速下均能實(shí)現(xiàn)出色的穩(wěn)定性，可在不同的操作條件下提供一致的結(jié)果,。如圖所示,，與市面上其他系統(tǒng)相比,，不同流速下的 CVs 顯著降低。

應(yīng)用

凋亡分析

細(xì)胞凋亡也稱為細(xì)胞程序性死亡,，是細(xì)胞調(diào)控自身死亡的過程,，通過激活特定通路使細(xì)胞發(fā)生收縮、凝聚,，并最終通過吞噬作用被清除,。這與壞死細(xì)胞死亡形成鮮明對比，壞死細(xì)胞死亡時細(xì)胞失控死亡并裂解,，可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響,。因此，凋亡細(xì)胞以非常有序的方式死亡,，可限制其對周圍細(xì)胞和組織的破壞,。

多種方法可用于測定細(xì)胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細(xì)胞儀具有自動補(bǔ)償設(shè)置和寬熒光檢測動態(tài)范圍,，可輕松對檢測進(jìn)行定量,，無需調(diào)整 PMT 電壓

免疫表型分析

免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài)、治療效率以及對疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān),。免疫表型分析可快速識別候選細(xì)胞類型,、亞類和功能。由于免疫細(xì)胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能,，因此監(jiān)測多種免疫細(xì)胞群的頻率以及特定細(xì)胞亞群（如單核細(xì)胞,、NK 細(xì)胞、T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞）的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要,。NovoCyte 流式細(xì)胞儀可同時定量分析多種白細(xì)胞,，以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測機(jī)體對傳染病的免疫反應(yīng)。

細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖是一種重要功能,，是高度結(jié)構(gòu)化的事件,，如果不受控制，會導(dǎo)致疾病,。我們可以通過絕對細(xì)胞計數(shù)或使用染料（例如 CFSE）測量增殖,。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生分裂時，染料在子細(xì)胞之間平均分配,，隨著染料的不斷稀釋,，我們可以測量 CFSE 熒光隨時間的損失。此外,，還繪制染料的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 與細(xì)胞濃度隨時間的變化曲線,，以揭示兩者之間的反比關(guān)系。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細(xì)胞活化的變化,。

圖：使用 CFSE 測量 Jurkat T 細(xì)胞增殖,。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細(xì)胞,，并通過 NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞隨時間的變化，以測定細(xì)胞分裂,。每個峰值都對應(yīng)于一個單獨(dú)的時間點(diǎn),。B) 使用隨細(xì)胞分裂產(chǎn)生的信號稀釋，繪制絕對細(xì)胞計數(shù)與 CFSE 的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 隨時間的變化曲線,。

細(xì)胞因子檢測

細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞對病原體,、自身免疫或治療藥物的激活反應(yīng)所必需的小分子。細(xì)胞因子的信號傳導(dǎo)可以調(diào)節(jié)基因調(diào)控,、先天免疫反應(yīng)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)以及炎癥,。因此，測量細(xì)胞因子產(chǎn)生并確定細(xì)胞因子產(chǎn)生的來源對于深入了解免疫反應(yīng)非常重要,?；谖⑶虻牧魇郊?xì)胞術(shù)檢測是測量細(xì)胞因子的高效方法，可以使用具有不同熒光強(qiáng)度的混合微球來測量單個樣品中的多種可溶性分析物,。

細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測

對細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測和分析有助于細(xì)胞亞群和細(xì)胞過程的額外表征,。為分析非細(xì)胞表面蛋白質(zhì)，需要進(jìn)行細(xì)胞固定和破膜,。然而,，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細(xì)胞內(nèi)染色）不兼容。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時,，需要特別注意,。最常見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定，然后用 100% 甲醇破膜,。雖然這種方法適用于多種抗體,，但請注意,，并非每種磷酸特異性抗體都適用,。

此外，在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細(xì)胞群,，需要對表面蛋白連接的磷酸化蛋白進(jìn)行染色,。必須特別考慮這些表位對固定劑的敏感性，并采取相應(yīng)預(yù)防措施,，避免損害表位,。因此，樣品在固定前可能需要對特定的表面標(biāo)記物進(jìn)行染色

細(xì)胞周期分析

正常的人體細(xì)胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體,。在細(xì)胞分裂的過程中,，DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量,。利用 NovoCyte 流式細(xì)胞儀,，可以進(jìn)行詳細(xì)的細(xì)胞周期分析,，了解腫瘤細(xì)胞分化、細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞與化合物之間的相互作用,。

圖：在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時后,，使用 ACEA NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析 A549 細(xì)胞的細(xì)胞周期分布。NovoExpress 內(nèi)置的細(xì)胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）,、S 期（黃色）和 G2/M 期（藍(lán)色）的細(xì)胞,。與正常未處理的細(xì)胞相比，MG132 處理的細(xì)胞停滯在 G2/M 期,，而 5-FU 處理的細(xì)胞停滯在 G0/G1 期,。