流式細胞儀(Flow cytometer )是對細胞進行自動分析和分選的裝置,。它可以快速測量,、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理,、生物化學(xué)方面的特征參量,,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細胞計是一種零分辨率的儀器,,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,,總蛋白量等指標(biāo),而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少,。也就是說,,它的細節(jié)分辨率為零。
細胞儀的操作和使用
①打開電源,,對系統(tǒng)進行預(yù)熱,;
②打開氣體閾,調(diào)節(jié)壓力,,獲得適宜的液流速度,;開啟光源冷卻系統(tǒng);
③在樣品管中加入去離子水,,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng),;
④利用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品,調(diào)整儀器,,使在激光功率,、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上,,0和90散射的熒光強度最強,,并要求變異系數(shù)為最小,;
⑤選定流速,、測量細胞數(shù)、測量參數(shù)等,,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品,;同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測量進程,;
⑥樣品測量完畢后,,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng),;
⑦因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),,因此可關(guān)閉氣體,、測量裝置,而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理,;
⑧將所需結(jié)果打印出來,。
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