NovoCyte Quanteon 4激光流式細(xì)胞儀是大獲成功的 NovoCyte 流式細(xì)胞儀系列的新一代產(chǎn)品,。NovoCyte Quanteon 4激光流式細(xì)胞儀，可以配置多達(dá) 25 個獨立的光電倍增管,，滿足各種高要求的樣品 panel,。Quanteon 采用專有的光電倍增管技術(shù)，提供出色的靈敏度,、穩(wěn)定性及寬達(dá) 7.2 個數(shù)量級的動態(tài)范圍?？梢栽谕粋€視圖中對極弱和強的熒光信號進(jìn)行捕獲并設(shè)門,，無需費時費力的反復(fù)調(diào)整 PMT,。

在開發(fā)復(fù)雜多色 panel 時，Quanteon 可節(jié)省數(shù)小時的設(shè)置和分析時間,。出色的液路系統(tǒng)提供穩(wěn)定,、一致的樣品輸送，具有高重現(xiàn)性和極低的 CV,。體積法絕對計數(shù)功能無需使用昂貴的微球,，節(jié)省您的時間和金錢。

特性

1,、全自動清洗和關(guān)機功能使操作更加簡單

2,、使用 NovoSampler Q 實現(xiàn)高效、無人值守的自動化操作

3,、靈活的樣品處理,，即使對于非常小的樣品體積也能實現(xiàn)有效的混合，此外還兼容常規(guī)的孔板形式,、條形碼和實驗室自動化系統(tǒng)的內(nèi)置 API,。

4、簡便易用的 NovoExpress 軟件提供自動補償功能,、細(xì)胞周期分析模塊,、細(xì)胞增殖模塊、熱圖和批處理功能,。

性能指標(biāo)

工作原理

高靈敏度的光電檢測器

硅光電倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固態(tài)半導(dǎo)體器件,，具備光子能級靈敏度，動態(tài)范圍為 7.2 個數(shù)量級,。SiPM 是一款具有光子計數(shù)功能的緊湊檢測器,，由設(shè)計緊湊、可同時運行的雪崩光電二極管陣列組成,。NovoCyte Quanteon 設(shè)計中的創(chuàng)新光學(xué)器件包含 25 個獨立的 SiPM,，可收集并處理來自每個熒光通道的信號。

出色的散射光分辨率,，可檢測小顆粒

NovoCyte Quanteon 散射光檢測光學(xué)系統(tǒng)和信號處理電子器件經(jīng)過優(yōu)化,，可以分辨粒徑小至 0.1 µm 的顆粒。憑借這種優(yōu)異的分辨率,，可輕松識別和分析血小板,、細(xì)菌和各種亞微米顆粒。

高重現(xiàn)性和穩(wěn)定性

NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 的液路系統(tǒng)專為提供高性能而設(shè)計,。NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 擁有其他流式細(xì)胞儀很難實現(xiàn)的液路一致性和穩(wěn)定性,。使用蠕動泵的其他儀器通常會受到液路脈動的影響，導(dǎo)致絕對細(xì)胞計數(shù)不一致和不準(zhǔn)確。

應(yīng)用

凋亡分析

細(xì)胞凋亡也稱為細(xì)胞程序性死亡,，是細(xì)胞調(diào)控自身死亡的過程,，通過激活特定通路使細(xì)胞發(fā)生收縮、凝聚,，并最終通過吞噬作用被清除,。這與壞死細(xì)胞死亡形成鮮明對比，壞死細(xì)胞死亡時細(xì)胞失控死亡并裂解,，可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響,。因此，凋亡細(xì)胞以非常有序的方式死亡,，可限制其對周圍細(xì)胞和組織的破壞,。

多種方法可用于測定細(xì)胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細(xì)胞儀具有自動補償設(shè)置和寬熒光檢測動態(tài)范圍,，可輕松對檢測進(jìn)行定量,，無需調(diào)整 PMT 電壓

免疫表型分析

免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài)、治療效率以及對疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān),。免疫表型分析可快速識別候選細(xì)胞類型,、亞類和功能。由于免疫細(xì)胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能,，因此監(jiān)測多種免疫細(xì)胞群的頻率以及特定細(xì)胞亞群（如單核細(xì)胞,、NK 細(xì)胞、T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞）的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要,。NovoCyte 流式細(xì)胞儀可同時定量分析多種白細(xì)胞,，以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測機體對傳染病的免疫反應(yīng)。

細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖是一種重要功能,，是高度結(jié)構(gòu)化的事件,，如果不受控制，會導(dǎo)致疾病,。我們可以通過絕對細(xì)胞計數(shù)或使用染料（例如 CFSE）測量增殖,。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生分裂時，染料在子細(xì)胞之間平均分配,，隨著染料的不斷稀釋,，我們可以測量 CFSE 熒光隨時間的損失。此外,，還繪制染料的平均熒光強度 (MFI) 與細(xì)胞濃度隨時間的變化曲線,，以揭示兩者之間的反比關(guān)系。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細(xì)胞活化的變化,。

圖：使用 CFSE 測量 Jurkat T 細(xì)胞增殖,。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細(xì)胞,，并通過 NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞隨時間的變化，以測定細(xì)胞分裂,。每個峰值都對應(yīng)于一個單獨的時間點,。B) 使用隨細(xì)胞分裂產(chǎn)生的信號稀釋，繪制絕對細(xì)胞計數(shù)與 CFSE 的平均熒光強度 (MFI) 隨時間的變化曲線,。

細(xì)胞因子檢測

細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞對病原體、自身免疫或治療藥物的激活反應(yīng)所必需的小分子,。細(xì)胞因子的信號傳導(dǎo)可以調(diào)節(jié)基因調(diào)控,、先天免疫反應(yīng)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)以及炎癥。因此,，測量細(xì)胞因子產(chǎn)生并確定細(xì)胞因子產(chǎn)生的來源對于深入了解免疫反應(yīng)非常重要,。基于微球的流式細(xì)胞術(shù)檢測是測量細(xì)胞因子的高效方法,，可以使用具有不同熒光強度的混合微球來測量單個樣品中的多種可溶性分析物,。

細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測

對細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測和分析有助于細(xì)胞亞群和細(xì)胞過程的額外表征。為分析非細(xì)胞表面蛋白質(zhì),，需要進(jìn)行細(xì)胞固定和破膜,。然而，許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法（用于細(xì)胞內(nèi)染色）不兼容,。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時,，需要特別注意。最常見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定,，然后用 100% 甲醇破膜,。雖然這種方法適用于多種抗體，但請注意,，并非每種磷酸特異性抗體都適用,。

此外，在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細(xì)胞群,，需要對表面蛋白連接的磷酸化蛋白進(jìn)行染色,。必須特別考慮這些表位對固定劑的敏感性，并采取相應(yīng)預(yù)防措施,，避免損害表位,。因此，樣品在固定前可能需要對特定的表面標(biāo)記物進(jìn)行染色

細(xì)胞周期分析

正常的人體細(xì)胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體,。在細(xì)胞分裂的過程中,，DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍，隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量,。利用 NovoCyte 流式細(xì)胞儀,，可以進(jìn)行詳細(xì)的細(xì)胞周期分析，了解腫瘤細(xì)胞分化、細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞與化合物之間的相互作用,。

圖：在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時后,，使用 ACEA NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析 A549 細(xì)胞的細(xì)胞周期分布。NovoExpress 內(nèi)置的細(xì)胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期（綠色）,、S 期（黃色）和 G2/M 期（藍(lán)色）的細(xì)胞,。與正常未處理的細(xì)胞相比，MG132 處理的細(xì)胞停滯在 G2/M 期,，而 5-FU 處理的細(xì)胞停滯在 G0/G1 期,。