AC04L061,、AC04L062 EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑
| 參考價 | ￥800.00-￥2200.00 |
- 公司名稱 和元李記（上海）生物技術(shù)有限公司
- 品牌Life-iLab/李記生物
- 型號AC04L061,、AC04L062
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時間2025/6/9 7:26:22
- 訪問次數(shù) 1219
| 300uL | 800.00元 | 999 件可售 |
| 1mL | 2200.00元 | 999 件可售 |
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胎牛血清,，轉(zhuǎn)染試劑（高效），凍存液（普通）,，cck-8,，1640培養(yǎng)基，PBS液體,，凋亡試劑盒,，熒光素鉀鹽,，蛋白Mark，發(fā)光液（超敏）,，快速封閉
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 300uL,、1mL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | AC04L061、AC04L062 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
信使核糖核酸（mRNA）在細胞質(zhì)中啟動蛋白質(zhì)翻譯,，不需要進入細胞核,，可實現(xiàn)比DNA轉(zhuǎn)染更快的蛋白表達，且避免基因整合風險,。
EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑是一種結(jié)合了陽離子聚合物和脂質(zhì)體優(yōu)點的轉(zhuǎn)染試劑,，協(xié)同促進轉(zhuǎn)染復(fù)合物進入細胞，隨后在胞質(zhì)中釋放,，能夠在多種細胞類型中實現(xiàn)高效,、低毒的轉(zhuǎn)染效果。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑 | AC04L061 | 300 uL |
EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑 | AC04L062 | 1 mL |
運輸與保存
藍冰運輸,。4℃保存,，有效期 6 個月；-30℃至-10℃保存,，有效期12個月,。注：避免反復(fù)凍融。
使用方法（以 24 孔板為例,，其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請參考表 1）
1． 接種細胞
對于貼壁細胞：轉(zhuǎn)染前一天,，將細胞按照每孔1-2x10^5個細胞的量進行鋪板，使其在轉(zhuǎn)染時密度為60%-80% 為佳,。
對于懸浮細胞：轉(zhuǎn)染當天,，配制轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物之前,，用PBS清洗細胞1-2次，用250 μL Opti-MEM I 減血清培養(yǎng)基 (無血清) 重懸細胞,，在24孔板中進行細胞鋪板,，細胞密度為60-80%。
2． 準備轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物
(1) 對于每孔細胞,，將 0.5 μg待轉(zhuǎn)染mRNA加入到1.5mL離心管中,，加入2 μL轉(zhuǎn)染試劑與mRNA 混合，室溫孵育3 min,。
(2) 往上述混合物中加入100 μL Opti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無血清),，輕輕混勻，在室溫下靜置30 min,，形成轉(zhuǎn)染試劑-核酸復(fù)合物,。
(3) 30 min后,，往上述復(fù)合物中加入250 μL Opti-MEM I減血清培養(yǎng)基(無血清)，輕輕混勻,。
3． 轉(zhuǎn)染細胞
(1) 細胞用PBS清洗1-2次,，將上述350µL轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物加入每孔細胞。
(2) 在 37℃,，5% CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)12 h，無需更換新的培養(yǎng)液,，之后即可檢測轉(zhuǎn)染效果,。若需更長時間轉(zhuǎn)染,，可在轉(zhuǎn)染12 h后補充500 μL培養(yǎng)基 (含血清),，總體積達到 500μL,，即達到常規(guī)的培養(yǎng)皿使用培養(yǎng)液的量，12-36 h后再進行檢測,。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域,。
2. mRNA質(zhì)量：請務(wù)必使用高純度、無菌,、無污染、無內(nèi)毒素的優(yōu)質(zhì)mRNA,?？梢酝ㄟ^對mRNA進行加帽(相比于Cap0結(jié)構(gòu)，帶有Cap1 結(jié)構(gòu)的mRNA對于哺乳動物系統(tǒng)更適合),，使用N1-甲基-假尿苷修飾和添加poly(A)尾,，以增強mRNA的穩(wěn)定性和壽命,。
3. 整個實驗過程使用無RNA酶和無熱原性的材料,，如離心管、槍頭,、緩沖液,。
4. 細胞條件：細胞狀態(tài)會極大影響轉(zhuǎn)染效率，待轉(zhuǎn)染細胞應(yīng)處于良好生長狀態(tài),，建議使用生長處于指數(shù)期,、存活率大于90% 的細胞進行轉(zhuǎn)染,。如果細胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細胞，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。
5. 細胞培養(yǎng)液要求：EZ Trans mRNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染實驗要求采用無血清轉(zhuǎn)染體系(推薦使用Opti-MEM減血清培養(yǎng)基)，因為血清會影響復(fù)合物的形成及mRNA轉(zhuǎn)染效率,。
6. 由于某些特殊培養(yǎng)基中的成分可能會抑制陽離子聚合物介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染,，因此建議測試這些培養(yǎng)基與本產(chǎn)品的相容性，以確保最佳轉(zhuǎn)染效果,。
7. 試劑用量的優(yōu)化：RNA 濃度和轉(zhuǎn)染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響,，初次使用應(yīng)優(yōu)化mRNA 濃度和轉(zhuǎn)染試劑用量以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。通常情況下,，24孔板的推薦mRNA用量為0.2-1 μg,，轉(zhuǎn)染試劑推薦用量為2-4 μL。建議初次使用時,，可在推薦范圍內(nèi)進行不同用量的預(yù)實驗,，以優(yōu)化轉(zhuǎn)染效果。
表 1：不同培養(yǎng)體積對應(yīng)的待轉(zhuǎn)mRNA,、 EZ Trans,、稀釋液用量
培養(yǎng)器皿 | 培養(yǎng)液體積 （mL） | mRNA 量 （μg ） | 轉(zhuǎn)染試劑 (μL) | Opti-MEM I培養(yǎng)基a (μL) | Opti-MEM I培養(yǎng)基b (μL) |
96 孔板 | 0.1 | 0.1 | 0.4 | 20 | 50 |
24 孔板 | 0.5 | 0.5 | 2 | 100 | 250 |
12 孔板 | 1 | 1 | 4 | 200 | 500 |
6 孔板 | 2 | 2 | 8 | 400 | 1000 |
60 mm 培養(yǎng)皿 | 4 | 4 | 16 | 800 | 2000 |
100 mm 培養(yǎng)皿 | 10 | 10 | 40 | 2000 | 5000 |
注：該表使用量僅供參考，具體使用量還需根據(jù)細胞類型及其他實驗條件進行優(yōu)化,。a: 稀釋轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物所需培養(yǎng)基的量,；b: 加入轉(zhuǎn)染試劑-mRNA復(fù)合物的培養(yǎng)基的量。
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本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,，不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域。
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