1 ,、過表達慢病毒構(gòu)建及包裝實驗特點：

1.1 直接包裝成為假病毒顆粒,，對分裂和非分裂細胞均有感染作用，適合RNAi研究和體內(nèi)實驗中難于轉(zhuǎn)染的細胞 (比如神經(jīng)元細胞,、干細胞或其它原代細胞),。

1.2 可以通過簡單方式，在短時間內(nèi)獲得穩(wěn)定表達特定基因的多種細胞株,。

1.3 可用于基因敲除,、基因**和轉(zhuǎn)基因動物研究。

1.4 無需轉(zhuǎn)染試劑,，操作簡便,。

1.5 可以根據(jù)客戶需要制備多種標(biāo)記。

2,、過表達慢病毒構(gòu)建及包裝實驗原理：

慢病毒（Lentivirus）是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種,。構(gòu)建的siRNA / miRNA慢病毒載體，與化學(xué)合成的siRNA和基于瞬時表達載體構(gòu)建的普通siRNA載體相比,，一方面可以擴增替代瞬時表達載體使用,，另一方面，Lentivirus-siRNA克隆經(jīng)過慢病毒包裝系統(tǒng)包裝后,，可用于感染依靠傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑難于轉(zhuǎn)染的細胞系如原代細胞,、懸浮細胞和處于非分裂狀態(tài)的細胞，并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,，進行長時間的穩(wěn)定表達,。

3 、過表達慢病毒構(gòu)建及包裝流程：

3.1 含有目的基因的慢病毒表達載體的構(gòu)建和質(zhì)粒純化提取,。

注：客戶也可以提供構(gòu)建好的重組慢病毒表達載體,。

3.2 慢病毒表達載體與包裝系統(tǒng)共轉(zhuǎn)染病毒包裝細胞。

3.3 收集病毒液,。

3.4 純化和濃縮病毒,。

3.5 分裝,、- 80 oC保存。

3.6 滴度測定及無菌檢測,。

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