產(chǎn)品描述：

Western及IP細(xì)胞裂解液，是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞的裂解液,。本細(xì)胞裂解液裂解的細(xì)胞,，可以用于PAGE,，Western，免疫沉淀和免疫共沉淀,。使用本裂解液時,，用戶可以根據(jù)具體用途自行添加特定抑制劑或者不添加抑制劑。Western及IP細(xì)胞裂解液的主要成分為Tris-HCl,，NaCl,，去垢劑?？梢杂行б种频鞍椎慕到?，并維持原有的蛋白間相互作用。

使用本裂解液獲得的蛋白樣品,，如果用于酶活性檢測或一些生物小分子的檢測,，需要測試標(biāo)準(zhǔn)品用本裂解液稀釋后是否會顯著影響標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果本裂解液對于標(biāo)準(zhǔn)曲線無顯著影響,，則可以使用本裂解液,。用Western及IP細(xì)胞裂解液裂解得到的蛋白樣品，可用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,。由于含有較高濃度的去垢劑等干擾物質(zhì),，不能用Bradford法測蛋白濃度。 

使用方法：

1,、對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品
（1）取適當(dāng)量的裂解液,，根據(jù)需要自行確定添加適當(dāng)?shù)囊种苿┗虿惶砑右种苿?br style="box-sizing: border-box; font-family: "Microsoft YaHei"; text-wrap: wrap; background-color: rgb(255, 255, 255);"/>（2）對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 100~200uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1~2sec 后,，細(xì)胞就會被裂解。
（3）對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞,，用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入 100~200uL裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 5~10×105 細(xì)胞/管,，然后再裂解,。大團的細(xì)胞較難裂解充分,，而少量的細(xì)胞由于裂解液容易和細(xì)胞充分接觸，相對比較容易裂解充分,。
（4）充分裂解后,，10000~14000g離心3~5min，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE,、Western、免疫沉淀,、免疫共沉淀,、酶或生物小分子檢測等操作。
注：裂解液用量說明：通常6孔板每孔細(xì)胞加100uL 裂解液已經(jīng)足夠,，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量至 150uL 或 200uL,。
2、對于組織樣品
（1）取適當(dāng)量的裂解液,，根據(jù)需要自行確定添加適當(dāng)?shù)囊种苿┗虿惶砑右种苿?br style="box-sizing: border-box; font-family: "Microsoft YaHei"; text-wrap: wrap; background-color: rgb(255, 255, 255);"/>（2）把組織切成細(xì)小的碎片,。
（3）按照每 20mg 組織加入 100~200uL 裂解液的比例加入裂解液。
（如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
（4）用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。
（5）充分裂解后，10000~14000g 離心 3~5min,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western,、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作,。
（6）如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分,。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗,。直接裂解的優(yōu)點是比較方便,，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分,。

注意事項：

1,、若頻繁使用本品，可以短期4℃保存,。若不是頻繁使用本品,，建議第一次使用本品的時候?qū)⒘呀庖悍盅b凍存,，避免反復(fù)凍融。
2,、若需添加蛋白酶或磷酸酶抑制劑,，可使用我司的廣譜蛋白酶抑制劑混合物（abs9161），廣譜磷酸酶抑制劑混合物（abs9162）,，以及PMSF,，或者自行準(zhǔn)備。
3,、裂解樣品的所有步驟需在冰上或4℃進(jìn)行,。
4、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。