在分子生物學(xué)研究中，RNA提取是非常重要的基礎(chǔ)步驟,，而提取效率和純度直接影響后續(xù)實驗的成功,。Trizol試劑是一款高效、可靠的核酸提取試劑,，為科研人員提供專業(yè)解決方案,。

Trizol產(chǎn)品特點：

1、高效提取RNA

Trizol試劑基于經(jīng)典的酸性酚-氯仿分離法,，可從細胞,、組織、植物等多種樣本中快速提取高純度的RNA,?？蓾M足多種實驗需求，省時高效,。

2,、高純度

提取的RNA具有較高的純度和完整性，A260/280值通常在1.8-2.0,，wan全滿足分子生物學(xué)實驗的要求,。

3、適用范圍廣

樣本類型：適用于細胞,、組織,、細菌、酵母和病毒等多種樣本,。

下游實驗：提取的核酸可直用于Northern,，點雜交，純化mRNA,，體外翻譯,，RNase protectionassay，cDNA克隆,，以及RT-PCR,；也可以用于基因表達芯片分析,、高通量測序等對RNA質(zhì)量要求較高的實驗，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,。

需要的試劑

需要的耗材

操作步驟：

1、細胞裂解

★ 組織樣本

Trizol用量：每50-100mg組織加1mL Trizol,，樣品體積不應(yīng)超過Trizol體積的10％,。

（1）將動物或植物組織切成小塊，在液氮中磨碎或用勻漿器勻漿處理,；

（2）將研磨好的組織粉末快速轉(zhuǎn)入裝有1mL Trizol的2mL離心管中,，在渦旋振蕩器上迅速振蕩混勻，置于冰上,， 待所有的樣品研磨完,；

（3）裂解產(chǎn)物應(yīng)呈澄清的透明粘稠液體。對于富含蛋白,、脂肪或多糖物質(zhì)的組織樣品如肌肉,、脂肪組織和植物結(jié)節(jié)部位等，勻漿后仍會存留有不溶物質(zhì),，可于4℃ 12,000xg離心10min,，然后吸取上清至一新的離心管中。

★ 細胞樣本

（1）貼壁細胞：吸盡培養(yǎng)液,，每10cm2培養(yǎng)面積（6孔板單孔或35mm平皿）加入1mL Trizol,，用加樣器吹打數(shù)次，以確保細胞wan全裂解,，然后轉(zhuǎn)移至離心管中,；

注：Trizol的使用量應(yīng)由培養(yǎng)皿表面 積決定，而非由細胞數(shù)目決定,。Trizol量不足可能導(dǎo)致提取的RNA中有DNA污染,。

（2）懸浮細胞：離心收集細胞，吸盡液體,，每5-10×10⁶動植物或酵母細胞,，或每1×10⁷細菌細胞加入1mL Trizol， 用加樣器吹打,，使其wan全裂解,，然后轉(zhuǎn)移至離心管中。

注：添加Trizol前切勿洗滌細胞 ,，以免RNA降解,。必要時可以用勻漿器來裂解某些細菌或者酵母細胞。

2,、液相分離

（1）裂解產(chǎn)物于室溫放置5min,，使核酸-蛋白復(fù)合物wan全分離（注：此時樣品可在-80℃長期保存）,；

（2）每1mL Trizol加入0.2mL氯仿，蓋緊管蓋,，劇烈振蕩15s,，室溫放置2-3min；

（3）4℃ 12,000xg離心15min,，樣品會分成三層：桔黃色的下層有機相,，中間層和無色的上層水相；

（4）吸取含總RNA的上層水相至一新的離心管中,，吸取水相的體積為所用Trizol試劑的60％,。

3、RNA回收

（1）按照每1mL Trizol的最初使用量加入0.5mL異丙醇,，顛倒數(shù)次混勻,，室溫放置10min；

（2）4℃ 12,000xg離心10min,，棄除上清,，可見膠狀的RNA沉淀；

（3）按照每1mL Trizol的最初使用量加入1mL 75%乙醇,，顛倒數(shù)次混勻,，洗滌沉淀；

（4）4℃ 12,000xg離心5min,，棄除上清,；

（5）室溫倒置5-10min晾干或真空抽干（不要使用真空干燥離心機，以免RNA過干,，難以溶解）,；

（6）加入適量（如25uL） DEPC-ddH₂O或TE緩沖液，用加樣器吹打數(shù)次溶解RNA,；

（7）通過RNA電泳以及紫外分光光度計檢測,，確定RNA的濃度、純度和完整性,；

（8）所得的RNA應(yīng)立即使用或適量分裝后-80℃保存,，避免反復(fù)凍融。

僅需幾步操作,，即可得到高質(zhì)量的RNA,，簡便且高效。除Trizol(abs60154)外,，Absin還有Trizol（總RNA抽提試劑盒）(abs9331)包含有RNA提取全流程的試劑,。

Absin產(chǎn)品線：

爆款產(chǎn)品：試劑盒(mIHC、IHC,、凋亡,、ELISA,、ChIP、Co-IP,、TR-FRET,、生化檢測、殘留檢測,、多因子檢測),；細胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠，胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細胞因子),、分化試劑盒；分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒),；化合物大包裝,；輔助試劑、耗材/儀器,、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...

特色產(chǎn)品：雞胚提取物CEE,、B27、N2,、霍亂毒素B亞單位CTB,、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX,、重組人胰島素Insulin,、人源低密度脂蛋白LDL...