原代神經(jīng)干細胞

1. 犧牲胎齡14-16天的SD大鼠,，刮除腹部手術(shù)區(qū)域的毛發(fā)，75%乙醇全身浸泡消毒,。

2. 解剖孕鼠,，取出子宮并沖洗。

3. 取出胚胎,，置于含有冰冷的HBSS液平皿中,。

4. 手shu顯wei鏡下剝離出大腦半球，小心地剝?nèi)ツX膜和血管,。

5. 剝?nèi)ツX膜和血管的大腦皮質(zhì),，用冰冷的HBSS液清洗三次。

6. 將大腦皮質(zhì)剪成1mm³的小塊,，用1ml槍頭輕輕吹打后,，使之成為細胞懸液，并通過70um的篩網(wǎng)過濾,。

7. 將收集到的細胞懸液離心后,，用神經(jīng)干細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)液重懸，然后離心,，棄掉上清液,。

8. 經(jīng)計數(shù)和活力觀察,，將細胞密度調(diào)至1×10⁶/ml，以1.5×10⁵/ml的細胞密度種入T25培養(yǎng)瓶中,，同時加入FGF-2和EGF于5%CO₂,、37℃環(huán)境中培養(yǎng)，直到神經(jīng)干細胞分裂,、增殖形成較大的神經(jīng)細胞球后再作傳代處理,。

9. 細胞傳代，將神經(jīng)細胞球懸液移至離心管,，經(jīng)低速離心后,，吸棄上清液，加入神經(jīng)干細胞完quan培養(yǎng)液,，用200ul槍頭吹打,，使之成為單個細胞懸液,，定量加入神經(jīng)干細胞完quan培養(yǎng)液后,，進行細胞計數(shù)和活力觀察。

10. 傳代后的細胞既可用來誘導(dǎo)分化,，也可以繼續(xù)種瓶培養(yǎng),，還可以冷凍保存以備后用。

11. 神經(jīng)干細胞的分化和鑒定,。

原代神經(jīng)干細胞

伊萊博生物科技（上海）有限公司,，公司總部位于上海長江軟件園。2022年1月與上海交通大學(xué)藥學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,，主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),，專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新，建立了包含腫瘤生物學(xué),、病理學(xué),、免疫學(xué)、細胞生物學(xué),、生物化學(xué)與分子生物學(xué)以及動物實驗等學(xué)科的研究服務(wù)體系,，為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展做出了重要貢獻。

     伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗,，具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系,。目前已自建細胞、分子,、病理等實驗平臺近1000平方米,，擁有精良的儀器設(shè)備、細胞庫,、樣本保存庫等,。動物實驗中心近1800平方米,，可滿足同時飼養(yǎng)清潔級和SPF級動物。核心實驗技術(shù)團隊主要來自中國科學(xué)院大學(xué),、復(fù)旦大學(xué),、上海交通大學(xué)等重點高校及科研機構(gòu)，能夠為客戶提供研究方案策劃,、項目實施及項目深度分析等方面的技術(shù)支持,。公司目前參與研究項目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤,、內(nèi)分泌,、生殖、免疫,、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域,。