雨蛙素誘導(dǎo)小鼠慢性胰腺炎動物模型
- 公司名稱 伊萊博生物科技(上海)有限公司
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- 更新時間 2025/6/19 14:41:41
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雨蛙素誘導(dǎo)小鼠慢性胰腺炎動物模型
雨蛙素誘導(dǎo)小鼠慢性胰腺炎動物模型:
一,、實驗動物選擇
?品系與性別?:C57BL/6雄性小鼠(8-10周齡,,體重20-25g),部分研究使用PRSS1轉(zhuǎn)基因小鼠增強(qiáng)人類慢性胰腺炎(CP)相似性
,。?飼養(yǎng)條件?:SPF級環(huán)境,,實驗前禁食12小時(自由飲水)
。
二,、雨蛙素配制與給藥方案
?母液配制?
溶解1 mg雨蛙素于1 mL生理鹽水,,配成1 mg/mL母液,過濾除菌后分裝凍存
。?工作液濃度?
使用前稀釋至5-10 μg/mL(生理鹽水),,常用注射劑量50 μg/kg,。
?給藥方案?
?基礎(chǔ)方案?:每周3次腹腔注射(50 μg/kg),持續(xù)6-7周
,。?強(qiáng)化方案?:聯(lián)合LPS(10-15 mg/kg)加重纖維化,,末次雨蛙素注射后追加LPS
。?急性轉(zhuǎn)慢性?:通過多次急性誘導(dǎo)(如每周多次雨蛙素注射)模擬慢性病程
,。
三,、模型評估指標(biāo)
?病理學(xué)觀察?
?HE染色?:腺泡細(xì)胞變小、炎性細(xì)胞浸潤,、間質(zhì)纖維化,。
?膠原沉積?:ku味酸-天狼星紅染色定量纖維化程度
。?免疫組化?:檢測α-SMA表達(dá),,反映胰腺星狀細(xì)胞活化
,。?生化指標(biāo)?
血清定粉酶、脂肪酶水平
,。炎癥因子(IL-6,、IL-1β、TNF-α)檢測
,。?分子機(jī)制分析?
Western blot檢測NF-κB/p65,、IL-6等通路蛋白
。qPCR分析纖維化相關(guān)基因(如Smad3)