abs9160 NP-40裂解液
| 參考價(jià) | ￥ 2000 |
| 訂貨量 | ≥1盒 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 愛(ài)必信（上海）生物科技有限公司
- 品牌 absin
- 型號(hào) abs9160
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/8 11:49:44
- 訪問(wèn)次數(shù) 1329
產(chǎn)品標(biāo)簽
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生化試劑，分子生物學(xué)試劑,，血清,，細(xì)胞培養(yǎng)試劑，化學(xué)試劑,，免疫學(xué)試劑,，耗材，儀器,，定制服務(wù)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | abs9160 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 產(chǎn)品描述 | |
| NP-40裂解液描述 | NP-40,，也稱 Nonidet P-40（乙基苯基聚乙二醇），是一種常見(jiàn)的非離子型去垢劑,。 NP-40 裂解液（NP-40 Lysis Buffer）是一種比較溫和的細(xì)胞組織裂解液,，主要成分為 50mM Tris-HCl （pH 7.4），150mM NaCl,，1% NP-40 以及焦磷酸鈉,，正釩酸鈉，氟化鈉,，EDTA 和抑肽酶等多種抑制劑,，可廣譜且有效抑制蛋白降解，經(jīng)本品裂解所得的蛋白樣品,，適用于常規(guī)的蛋白免疫印跡（Western Blot）,，免疫沉淀（IP）和免疫共沉淀（Co-IP）等實(shí)驗(yàn)。經(jīng)本品裂解收集的蛋白樣品,，可使用增強(qiáng)型 BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定總蛋白濃度,。由于本品含有較高濃度的去垢劑，不適合用 Bradford 法來(lái)測(cè)定總蛋白濃度,。 |
| 使用方法 | A培養(yǎng)的細(xì)胞樣品 （1）充分融解 NP-40 裂解液,，之后混勻。取適當(dāng)量的裂解液,，使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF（Mw：174.2 g/mol）,，使其最終濃度為 1mM,。 （2）貼壁細(xì)胞：吸除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍（如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾，可忽略此步）,。按照六孔板的每孔細(xì)胞加入 150-250ul 裂解液的比例加量,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。裂解 15-30 分鐘,，通常裂解液接觸細(xì)胞 1-3 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解,。 懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞,，用手指彈散細(xì)胞。按照六孔板的每孔細(xì)胞加入 150-250ul 裂解液的比例加入裂解液,。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,，然后再裂解。 （3）充分裂解后,，10,000-14,000g 離心 3-5 分鐘,，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE,、WB 和免疫沉淀等實(shí)驗(yàn),。 【裂解液用量說(shuō)明】：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150ul 裂解液已經(jīng)足夠，如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200ul 或 250ul,。 NP-40裂解液 B組織樣品 （1）將剪切成細(xì)小的碎片,。 （2）充分融解 NP-40 裂解液，之后混勻,。取適當(dāng)量的裂解液,，使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF（Mw：174.2 g/mol），使其最終濃度為 1mM,。 （3）按照每 20mg 組織加入 150-250ul 裂解液的比例加量,。【注意：如果裂解不充分可以適當(dāng)添加用量,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可適當(dāng)降低用量?！?br style="box-sizing: border-box"/>（4）用玻璃勻漿器勻漿直至充分裂解,，此過(guò)程盡量控制在 1-2 分鐘內(nèi),，以減少蛋白的降解。 （5）充分裂解后,，10,000-14,000g 離心 3-5 分鐘,，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE,、WB 和免疫沉淀等實(shí)驗(yàn),。 （6）如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,，通過(guò)高強(qiáng)度的漩渦混勻器使樣品裂解充分,，之后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解的足夠充分. |
| 注意事項(xiàng) | 1,、裂解樣品的所有步驟都需在冰上或 4℃進(jìn)行,。 2、不同的細(xì)胞需要加入的裂解液的量可能會(huì)不同,，需要根據(jù)具體條件進(jìn)行條件篩選,； 3、為了您的自身安全,，使用試劑前,，請(qǐng)做好防護(hù)，如穿實(shí)驗(yàn)服,，帶手套等,。 |
| 基本信息 | |
| 儲(chǔ)存/保存方法 | -20℃凍存 |
| 溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究 |
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