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細(xì)胞中如果污染細(xì)菌,，最常見的有枯草桿菌等革蘭陽性菌以及大腸桿菌、假單孢菌等革蘭陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見,。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,，會很快出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH 改變,。
也有少數(shù)培養(yǎng)液肉眼觀察無多少改變,，只能在鏡下發(fā)現(xiàn)菌體才知污染。所以,，每天應(yīng)仔細(xì)觀察,。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多,、增粗,，最后變圓脫落死亡，造成實驗失敗和細(xì)胞株(系)丟失,。
細(xì)胞污染的來源
無菌觀念薄弱,，穿戴不注意
進(jìn)細(xì)胞房不換鞋，不戴口罩,，不戴手套,，是細(xì)胞房的大忌諱！有更嚴(yán)格的細(xì)胞房連帽子都要戴上,。為什么呢,？換鞋是為了隔離真菌。戴口罩是為了防止口腔支原體不會污染細(xì)胞了,。不戴手套,，根本就清除不掉你手上的細(xì)菌真菌，要不你試試看拿火燎一下你的手,，焦了才算滅菌,。
紫外線和酒精滅菌，不能亂用
能滅菌,，但是紫外和酒精最多只能滅細(xì)菌,，對真菌傷害很小。你不戴手套,，僅用噴壺噴手是沒有什么用的,。超凈臺為什么盡量要用酒精棉球而不是用酒精噴壺呢？因為用酒精棉球的話,，可以在滅菌的同時把菌體從手上擦下去,。而噴壺只能短暫滅菌而已，所以要多用棉球,，少用噴壺,。
使用生物安全柜，別超安全線
生物安全柜的玻璃窗是有警戒線的，超過這個警戒線,，生物安全柜的風(fēng)簾就起不到太大作用,，且會引入室內(nèi)空氣中的真菌，比如你的臭鞋里的酵母啥的,。還會讓你給細(xì)胞送溫暖的呼吸里,，自動帶上支原體。
拿細(xì)胞培養(yǎng)瓶的時候不注意操作
用細(xì)胞培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)的時候,，最忌諱的是你拿瓶子的時候,，手拿著有蓋子的那一面。因為一般來說瓶蓋開關(guān)是最容易接觸到瓶口的,，你手拿著培養(yǎng)瓶,，那手的虎口夾縫里所含有的真菌很容易就接觸到瓶蓋上，一旦造成污染,，就是很嚴(yán)重的,。
實驗用品亂擺放
生物安全柜里操作的時候，門前最忌諱堆一堆雜七雜八的東西,，槍頭盒,、血清、管子,，培養(yǎng)皿,、移液器、酒精噴壺,、酒精燈,，堆了一大堆。有的都堵住了安全柜門前的出風(fēng)口,。一來會導(dǎo)致操作起來并不是井井有條,，會導(dǎo)致動作幅度過大,，擾亂氣流,。二來這些東西一旦擋住風(fēng)口，也會擾亂生物安全柜的氣流,，氣流變化會導(dǎo)致外部不潔凈的空氣流入,，也同樣會導(dǎo)致生物安全柜的潔凈作用失效。
不注意清潔水浴鍋
水浴鍋是比較容易忽視的,，復(fù)蘇細(xì)胞的時候,，37℃，對細(xì)菌真菌來說這就是溫床啊,。復(fù)蘇完,，濕漉漉的凍存管，任你再怎么噴酒精也并沒有什么意義了。那要怎么辦,，水浴鍋一來是定期清潔,，二來是加一些抑菌劑
水盤污染
培養(yǎng)箱的水盤也是坐擁37℃溫床的水環(huán)境。水盤里若是飄著特別大的一塊塊霉斑,。一污染就一箱子全報廢了,，培養(yǎng)箱要定期用0.1%的新潔爾滅或者84清洗(交替使用，防止微生物耐藥),。水盤也一樣,，水盤中加入飽和的磷酸氫二鈉可以有效預(yù)防細(xì)菌真菌，但是需要定期加入去離子水防止析出,。
滅菌滅不好
細(xì)胞房所使用的槍頭,，必須要經(jīng)過濕熱滅菌， 用報紙包裹好槍頭,，是因為滅菌鍋一般在細(xì)胞房外面,，所以要保證內(nèi)部槍頭盒結(jié)晶?？靖墒菫榱朔乐箖?nèi)部有水分,，當(dāng)你開啟槍頭盒后，有水的地方更容易被霉菌的孢子所接觸附著,，也就更容易污染,。所以這個也必須要注意！
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