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在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，也經(jīng)常會對細(xì)胞進(jìn)行凍存操作,。細(xì)胞凍存通常是指將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝,，以便長期儲存的一種技術(shù),。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,。
細(xì)胞凍存液，作為細(xì)胞凍存時必須使用的一種溶液,，不僅僅是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,，在細(xì)胞的購買、寄贈,、交換和運送過程中也起著關(guān)鍵作用,，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。
如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高,、滲透壓改變,、脫水、pH值改變,、蛋白變性等,，從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護劑,，在凍存細(xì)胞時將細(xì)胞懸浮于凍存液中,，可使冰點降低，提高細(xì)胞膜對水的通透性,，在緩慢的凍結(jié)條件下,，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞，可以防止或減少冷凍冰晶對細(xì)胞的損傷作用,。這樣就使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,，在需要時直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性。
傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液
傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合,，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%,，統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液,。
含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，
如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜)，最后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲存,。
(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量的死亡,。)
無血清細(xì)胞凍存液
無血清細(xì)胞凍存液,，不含血清,，含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分,、pH調(diào)節(jié)劑等成分,。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒,、霉菌和支原體等污染,，確保凍存細(xì)胞安全。通用于各種動物細(xì)胞株,。2-8℃即可穩(wěn)定保存,，無需冷凍，即取即用,。凍存細(xì)胞,，無需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上,。
用途
1.無血清細(xì)胞凍存液用于造血干細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存。
2.無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞,、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲,。
3.無血清細(xì)胞凍存液用于其他類型哺乳動物細(xì)胞的儲存。
產(chǎn)品性能
1.不含牛血清,，無動物源組分,。
傳統(tǒng)的凍存液，一般由胎牛血清,、DMSO等組分組成,。胎牛血清取自牛，因此,，難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域,。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途，無動物源組分,。
2.2-8℃即可穩(wěn)定保存,，無需冷凍，即取即用,。
為了避免反復(fù)凍融,，傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液，需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存,。細(xì)胞沉淀加無血清細(xì)胞凍存液,，直接放入-80℃長期儲存即可，無需再進(jìn)行分裝。
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