合肥國(guó)肽生物科技有限公司成立之初，便成功收購(gòu)了國(guó)內(nèi)幾家多肽,、抗體公司,，是目前國(guó)內(nèi)的專業(yè)多肽合成、抗體制備,、蛋白表達(dá)的規(guī)模型生產(chǎn)企業(yè),。國(guó)肽生物專長(zhǎng)于熒光標(biāo)記肽、同位素標(biāo)記肽,、人工胰島素,、藥物肽、化妝品肽,、長(zhǎng)肽困難肽等產(chǎn)品的合成與研發(fā),，致力于學(xué)術(shù)水平的科研提升，搭建學(xué)術(shù)交流平臺(tái),，促進(jìn)前沿,、專業(yè)的學(xué)術(shù)知識(shí)推廣，推動(dòng)多肽在生物醫(yī)學(xué)材料等領(lǐng)域的研究與應(yīng)用
我們擁有成熟的多肽合成純化方法,，利用SPPS方法和液相合成方法為客戶提供高品質(zhì)多肽,。我們的服務(wù)特點(diǎn)是:
1. 純度：我們提供粗品肽和純度純度為70%，75%,，80%,85%,90%,95%,98%,99%的純品多肽,。
2.脫鹽和轉(zhuǎn)鹽：根據(jù)客戶要求，我們可以對(duì)多肽進(jìn)行脫TFA鹽處理,，也可以轉(zhuǎn)為醋酸鹽,。
3.交貨期限：30個(gè)氨基酸之內(nèi)，一般2-3周,，1-2周,。
4.質(zhì)量控制：每條多肽都免費(fèi)提供合格的HPLC，MS和COA文件,。
5.售后服務(wù)：1-2周內(nèi)可以提出異議,，我們免費(fèi)復(fù)測(cè)，不合格免費(fèi)退貨,，1-3個(gè)月內(nèi)使用不合格可以免費(fèi)提供復(fù)測(cè),，樣品免費(fèi)保存3個(gè)月。
供應(yīng)各種修飾型多肽,。
1.磷酸化的Ser,、Tyr和Thr修飾的多肽：我們提供單磷酸化和多磷酸化多肽服務(wù),，目前我們已經(jīng)能夠提供四個(gè)磷酸化位點(diǎn)修飾的多肽。
2.5(6)-FAM,，F(xiàn)ITC,，CY5，RhodamineB,，PNA,，EDNAS/dabcyl等熒光標(biāo)記修飾的多肽：熒光標(biāo)記修飾多肽技術(shù)是我們國(guó)肽生物的代表性多肽合成技術(shù)，我們的這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)相當(dāng)成熟,。
3.生物素Biotin,，Lys(Biotin)修飾的多肽：生物素是維生素B2的組成部分，Biotin,，Lys(Biotin)修飾的多肽也是客戶經(jīng)常定制的多肽,。我們提供生物素修飾的多肽已經(jīng)有將近*的成功率。
4.含有一對(duì)或多對(duì)二硫鍵修飾的多肽：二硫鍵在蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定中起到重要作用,，目前我們已經(jīng)能夠?yàn)榭蛻籼峁┧膶?duì)二硫鍵修飾的多肽,。
5.含有同位素C13，N15修飾的多肽：同位素標(biāo)記的多肽主要應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域,，通常價(jià)格較高，為了滿足客戶需要,，我們接受微克級(jí)的同位素多肽定制,。
6.含有特殊氨基酸修飾的多肽：例如，D型氨基酸,，氨基酸衍生物,，脂肪族羧酸等等，都在我們接受的定制范圍內(nèi),。
國(guó)肽生物提供150個(gè)氨基酸以內(nèi)的長(zhǎng)肽合成服務(wù),。
多肽合成過(guò)程中，肽鏈過(guò)長(zhǎng)時(shí),，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)缺殘基,，氨基酸縮合困難等情況，基于這些現(xiàn)象,，我們開(kāi)發(fā)了三種有效提高反應(yīng)成功率的方案：
1. 微波合成法：對(duì)于合成過(guò)程中出現(xiàn)的一些難以縮合的氨基酸,，我們采用微波法進(jìn)行合成，該方法*,，并且大大縮短了反應(yīng)時(shí)間,。
2. 片段合成法：當(dāng)某些多肽用常規(guī)合成方法合成困難，我們也會(huì)采用將多肽中某一段的某幾個(gè)氨基酸縮合之后作為一個(gè)整體縮合到肽鏈上去,，這種方法也能夠解決許多合成中存在的問(wèn)題,。
3.酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是將固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之間的化學(xué)選擇性反應(yīng)形成酰胺鍵而實(shí)現(xiàn)多肽的連接,，該方法根據(jù)肽鏈中Cys的位置，將整條肽鏈分成多條序列分別合成,，終經(jīng)過(guò)液相縮合反應(yīng)得到目標(biāo)肽,，顯著地提高了終產(chǎn)物純度，廣泛適用于含有Cys的長(zhǎng)鏈多肽的合成,。
國(guó)肽生物擁有成熟的長(zhǎng)肽合成工藝,，能夠根據(jù)客戶定制的多肽序列，快速有效地設(shè)計(jì)合成方案并迅速開(kāi)始合成,，更快更好的為客戶提供所需的服務(wù)是我們不變的堅(jiān)持,。

多肽合成是一個(gè)固相合成順序一般從C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法,。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái),，經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善，到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù),，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法*的優(yōu)點(diǎn),，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種：固相合成和液相多肽合成,。
多肽合成技術(shù)
Merrifield*提出了固相多肽合成方法(SPPS)以來(lái),，此技術(shù)的優(yōu)勢(shì)受大眾青睞，所以目前大眾比較長(zhǎng)使用的多肽合成技術(shù)手段就是固相合成技術(shù),。固相合成肽技術(shù)是液相合成肽技術(shù)的升華,。液相合成技術(shù)，也可進(jìn)行多肽的合成,，通常此方法會(huì)導(dǎo)致消旋的副反應(yīng),，或在強(qiáng)堿存在時(shí)形成5(4H)-oxaylones和N-acylurea而受到影響。慶幸地是,， 這些副反應(yīng)能小化,，但是還不能*消除。
固相多肽合成原理
1963年,，Merrifield提出了固相多肽合成方法,，由于其合成方便，迅速,，成為多肽合成的方法,，而且?guī)?lái)了多肽有機(jī)合成上的一次革命，并成為了一支獨(dú)立的學(xué)科——固相有機(jī)合成,，固相合成的發(fā)明同時(shí)促進(jìn)了肽合成的自動(dòng)化,。
例如，國(guó)肽生物多肽合成主要是采用Fmoc合成法,。Fmoc合成法采用Fmoc為α-氨基的保護(hù)基,，側(cè)鏈保護(hù)采用芐醇類,。合成時(shí)將一個(gè) Fmoc－氨基酸衍生物共價(jià)交聯(lián)到樹(shù)脂上，用堿脫除Fmoc,，用三乙胺中和游離的氨基末端,，然后通過(guò)DCC活化、偶聯(lián)下一個(gè)氨基酸,，脫保護(hù)多采用HF 法或TFMSA（三氟甲磺酸）法,。
多肽合成服務(wù)種類
多肽合成服務(wù)通常有線性肽合成服務(wù)、多種難肽合成服務(wù),、修飾肽合成服務(wù),、以及部分多肽合成公司還會(huì)提供多肽定制服務(wù)，定制出有針對(duì)性的合成肽,。
目前有多肽合成公司提供的線性肽合成可達(dá)100個(gè)氨基酸,，在修飾肽合成上，能提供常見(jiàn)修飾,，磷酸化（Ser/Thr/Tyr）,，環(huán)化（酰胺環(huán)/二硫鍵環(huán)），熒光標(biāo)記（5(6)-FAM,，F(xiàn)ITC,，CY5，RhodamineB,，PNA,，EDNAS/dabcyl等），生物素標(biāo)記（Biotin,，Lys(Biotin)）/復(fù)合抗原（MAP）/含D型氨基酸,及各種氨基酸衍生物均可合成,。
多肽產(chǎn)物純度選擇
• 常見(jiàn)的質(zhì)譜級(jí)多肽純度,，一般要求>95%
• 用于抗體篩選純度,，一般>85%即可
• NMR和結(jié)晶試驗(yàn)中，純度一般>98%
• 粗品肽,，一般>50%即可用于多肽篩選
多肽
多肽是一種與生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能都相關(guān)的生物活性物質(zhì),，它的分子結(jié)構(gòu)介于氨基酸和蛋白質(zhì)之間，是由多種氨基酸按照一定的排列順序通過(guò)肽鍵結(jié)合而成的化合物,。多肽是涉及生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能的生物活性物質(zhì)的總稱,，常常被應(yīng)用于功能分析、抗體研究,、尤其是藥物研發(fā)等領(lǐng)域,。多肽合成技術(shù)的出現(xiàn)，讓這些多肽的應(yīng)用領(lǐng)域變得更寬,。

多肽合成技術(shù)
多肽合成技術(shù)多肽化學(xué)已經(jīng)走過(guò)了一百多年的光輝歷程,，1902年,，EmilFischer首先開(kāi)始關(guān)注多肽合成，由于當(dāng)時(shí)在多肽合成方面的知識(shí)太少,，進(jìn)展也相當(dāng)緩慢當(dāng)時(shí)合成采用了苯甲酰,，乙酰保護(hù)，脫去相當(dāng)困難,，而且容易導(dǎo)致肽鏈斷裂,。1963年，Merrifield提出了固相多肽合成方法（SPPS）,，這個(gè)在多肽化學(xué)上具有里程碑意義的合成方法,，一出來(lái)，就由于其合成方便,，迅速,，現(xiàn)在已經(jīng)成為多肽合成的方法，隨后的發(fā)展也證明了該方法不僅僅是一種合成方法,，而且也帶來(lái)了有機(jī)合成上的一次革命,，并成為了一支獨(dú)立的學(xué)科，固相有機(jī)合成（SPOS）,。
進(jìn)入21世紀(jì),，隨著蛋白質(zhì)組學(xué)的研究深入，對(duì)于多肽化學(xué)的要求不僅僅是合成方法,，而更多的集中在多肽標(biāo)記與修飾方法,，以及蛋白結(jié)構(gòu)與功能模擬多肽的合成以及長(zhǎng)肽或蛋白合成。多肽化學(xué)合成的基本介紹多肽化學(xué)合成方法,，包括液相和固相兩種方法,。液相合成方法現(xiàn)在主要采用BOC和Z兩種保護(hù)方法，現(xiàn)在主要應(yīng)用在短肽合成,，如阿斯巴甜,，力肽，催產(chǎn)素等,，其相對(duì)與固相合成,，具有保護(hù)基選擇多，成本低廉,，合成規(guī)模容易放大的許多優(yōu)點(diǎn),。與固相合成比較，液相合成主要缺點(diǎn)是,，合成范圍小,，一般都集中在10個(gè)氨基酸以內(nèi)的多肽合成，還有合成中需要對(duì)中間體進(jìn)行提純，時(shí)間長(zhǎng),，工作量大,。固相合成方法現(xiàn)在主要采用FMOC和BOC兩種方法，它具有合成方便,，迅速,，容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，而且可以比較容易的合成到30個(gè)氨基酸左右多肽,。
1.氨基酸保護(hù)基
20種常見(jiàn)氨基酸,，根據(jù)側(cè)鏈可以分為幾類：脂肪族氨基酸（Ala，Gly,，Val,，Leu，Ile,，）,，芳香族氨基酸（Phe，Tyr,，Trp,，His），酰胺或羧基側(cè)鏈氨基酸（Asp,，Glu,，Asn，Gln）,，堿性側(cè)鏈氨基酸（Lys,，Arg），含硫氨基酸（Cys,，Met）,，含醇氨基酸（Ser，Thr）,，亞氨型基酸（Pro）,。多肽化學(xué)合成中氨基酸的保護(hù)非常關(guān)鍵，直接決定了合成能夠成功的關(guān)鍵,。因?yàn)槌Ｒ?jiàn)的20中氨基酸中有很多都是帶有活性側(cè)鏈的,，需要進(jìn)行保護(hù),，一般要求,，這些保護(hù)基在合成過(guò)程中穩(wěn)定，無(wú)副反應(yīng),，合成結(jié)束后可以*定量的脫除,。合成中需要進(jìn)行保護(hù)的氨基酸包括：Cys，Asp，Glu,，His,，Lys，Asn,，Gln,，Arg，Ser,，Thr,，Trp，Tyr,。需要進(jìn)行保護(hù)的基團(tuán)：羥基,，羧基，巰基,，氨基,，酰胺基，胍基,，吲哚,，咪唑等。其中Trp也可以不保護(hù),，因?yàn)檫胚嵝再|(zhì)比較穩(wěn)定,。當(dāng)然在特殊的情況下，有些氨基酸也可以不保護(hù),，像 Asn,，Gln，Thr,，Tyr,。
氨基酸側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)非常多，同一個(gè)側(cè)鏈有多種不同的保護(hù)基,，可以在不同的條件下選擇性的脫除,，這點(diǎn)在環(huán)肽以及多肽修飾上具有很重要的意義。而且側(cè)鏈保護(hù)基和選擇的合成方法有密切的關(guān)系,，液相和固相不一樣,，固相中BOC和FMOC策略也不一樣，從某種意義上看,，多肽化學(xué)就是氨基酸保護(hù)基的靈活運(yùn)用與搭配,。關(guān)于側(cè)鏈保護(hù)基的使用，請(qǐng)參考王德心的《固相有機(jī)合成——原理及應(yīng)用指南》第四章,，我們這里主要介紹Cys,，Lys，Asp的幾種保護(hù)基及其脫除方法。Cys見(jiàn)的保護(hù)基有三種,，Trt,，Acm，Mob,，這三個(gè)保護(hù)基可以完成多對(duì)二硫鍵多肽的合成,。Lys見(jiàn)的保護(hù)基有：Boc，F(xiàn)moc,，Trt,，Dde，Allyl,，這對(duì)于固相合成環(huán)肽提供了很多正交的保護(hù)策略,。Asp見(jiàn)的保護(hù)基有：Otbu，OBzl,，OMe,，OAll，OFm,，同樣也提供了多種正交的保護(hù)策略,。
2.多肽縮合試劑
目前多肽合成中，主要采用羧基活化方法來(lái)完成接肽反應(yīng),，早使用的是將氨基酸活化為酰氯,，疊氮，對(duì)稱酸酐以及混合酸酐的方法,，但是由于這些條件下,，存在氨基酸消旋，以及反應(yīng)試劑危險(xiǎn)以及制備比較復(fù)雜,，逐漸被后來(lái)的縮合試劑取代,，按照其結(jié)構(gòu)可以分為兩種：縮合試劑主要有：碳二亞胺型，鎓鹽型（Uronium）,。
主要包括：DCC,，DIC， EDC.HCl等,。采用 DCC進(jìn)行反應(yīng),，由于反應(yīng)中生成的 DCU，在 DMF中溶解度很小,，產(chǎn)生白 色沉淀,，所以一般不用在固相合成中，但是由于其價(jià)格便宜,，在液相合成中,，可以通過(guò)過(guò)濾除去，應(yīng)用仍然相當(dāng) 廣泛,。EDC.HCl因?yàn)槠渌芙庑缘奶攸c(diǎn),，在多肽與蛋白的連接中使用比較多，而且也相當(dāng)成功,。但是該類型的縮 合試劑的一個(gè)大的缺點(diǎn),， 就是如果單獨(dú)使用， 會(huì)有比較多的副反應(yīng),， 但是研究表明如果在活化過(guò)程中添加 HOBt,， HOAt等試劑，可以將其副反應(yīng)控制在很低的范圍,。
鎓鹽型縮合試劑反應(yīng)活性高,，速度快，現(xiàn)在使用非常廣泛,，主要包括：HBTU,，TBTU，HATU,，PyBOP等,。該試劑使用過(guò)程中需要添加有機(jī)堿，如,，二異丙基乙胺（DIEA）,，N-甲基嗎啉（NMM），該試劑加入后,，才能活化氨基酸,。
3.多肽合成方法比較
液相多肽合成現(xiàn)在仍然廣泛的使用，在合成短肽和多肽片段上具有合成規(guī)模大,，合成成本低的顯著優(yōu)點(diǎn),，而且由于是在均相中進(jìn)行反應(yīng)，可以選擇的反應(yīng)條件更加豐富,，像一些催化氫化,，堿性水解等條件，都可以使用,，這在固相中,，使用卻由于反應(yīng)效率低，以及副反應(yīng)等原因,，無(wú)法應(yīng)用,。液相多肽合成中主要采用BOC和Z兩種反應(yīng)策略。
固相多肽合成現(xiàn)在使用的主要有兩種策略：BOC和FMOC兩種,。BOC方法合成過(guò)程中,，需要反復(fù)使用TFA脫BOC,，而且在后從樹(shù)脂上切割下來(lái)需要使用HF，由于HF必須使用專門(mén)的儀器進(jìn)行操作,，而且切割過(guò)程中容易產(chǎn)生副反應(yīng),，因此現(xiàn)在使用受到實(shí)驗(yàn)條件限制，使用也逐漸減少,。FMOC方法反應(yīng)條件溫和,，在一般的實(shí)驗(yàn)條件下就可以進(jìn)行合成，因此,，也得到了非常廣泛的應(yīng)用,。固相合成中樹(shù)脂，一般都是聚苯乙烯-二乙烯苯材料,，大小在75-150μm,，交聯(lián)度在1-2%之間，現(xiàn)在使用的大多是1%,，因?yàn)檫@種交聯(lián)度下,，樹(shù)脂在DMF，DCM中具有很好的溶脹性能,，立體上是一個(gè)空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),，反應(yīng)物分子可以在樹(shù)脂內(nèi)部自由移動(dòng)。樹(shù)脂中關(guān)鍵的部分是連接手臂,，它一端連接在樹(shù)脂上,，一端作為反應(yīng)位點(diǎn)。目前廣泛使用的樹(shù)脂有：PAM,，MBHA,，Wang，2-Cl-Trt,，Rink-Amide-MBHA等,。其中PAM，MBHA是用在BOC策略中,，因?yàn)槠鋵?duì)酸非常穩(wěn)定,，需要在HF，TFMSA等強(qiáng)酸條件下才能夠切割下來(lái),。
4.非放射性核素標(biāo)記
目前在非放射性核素標(biāo)記中,，使用廣泛的仍然是 C13，H2,，因?yàn)槠涫褂冒踩?，放射性小。現(xiàn)在有比較*的非放射性標(biāo)記的氨基酸,，可以按照正常的多肽合成方法將標(biāo)記好的氨基酸直接連接到多肽上,。
5.熒光標(biāo)記
熒光標(biāo)記由于沒(méi)有放射性,，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。因此,，目前在生物學(xué)研究中熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛,，熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系，對(duì)于有游離羧基的采用的方法與接肽反應(yīng)相同,，也采用 HBTU/HOBt/DIEA方法連接,。但是對(duì)于 FITC 標(biāo)記,，需要在連接 FITC 前,，增加一個(gè)氨基己酸，避免在切割的過(guò)程中被 TFA切割掉,。
6.生物素標(biāo)記
生物素 - 親合素系統(tǒng) (biotin-avidinsystem ,， BAS)，是 70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué),，并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng),。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級(jí)放大效應(yīng)，并與熒光素,、酶,、同位素等免疫標(biāo)記技術(shù)有機(jī)地結(jié)合，使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進(jìn)一步提高,。主要有用于標(biāo)記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯 (BNHS)和生物素對(duì)硝基酚酯 (pBNP),，其中以 BNHS，當(dāng)然,，也可以直接使用生物素也可以標(biāo)記,，因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)上有個(gè)游離的羧基， 采用 HBTU/HOBt/DIEA方法縮合,，由于生物素的溶解度低,， 使用 DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。
總之,，今后多肽化學(xué)的研究,，不僅是將更多的有機(jī)化學(xué)合成新方法，新技術(shù)引入到多肽研究當(dāng)中,，而且對(duì)蛋白的結(jié)構(gòu)以及功能模擬,，開(kāi)展結(jié)構(gòu)活性研究（structureactivityrelationship）將是研究開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)，因?yàn)檫@將為揭示蛋白的內(nèi)在的生物活性本質(zhì)提供大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),。

國(guó)肽生物主要提供：多肽合成,、多肽定制、同位素標(biāo)記肽,、人工胰島素,、磷酸肽,、生物素標(biāo)記肽、熒光標(biāo)記肽（Cy3,、Cy5,、Fitc、AMC等）,、目錄肽,、偶聯(lián)蛋白（KLH、BSA,、OVA等）,、美容肽、化妝品肽,、多肽文庫(kù)構(gòu)建,、抗體服務(wù)、糖肽,、訂書(shū)肽,、藥物肽、RGD環(huán)肽等,。詳情請(qǐng)咨詢國(guó)肽生物