合肥星肽生物科技有限公司成立于2019年，注冊資金100萬元,，公司辦公場所坐落合肥光谷生物城,。星肽生物致力于為行業(yè)內(nèi)的客戶提供技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢,、技術(shù)轉(zhuǎn)讓等服務(wù),，秉承著“我們用心 客戶省心”的服務(wù)理念打造出一支敢于創(chuàng)新、敢于挑戰(zhàn)的綜合服務(wù)團隊,。

星肽生物主營業(yè)務(wù)：293F(人胚腎細(xì)胞),、細(xì)胞庫、試劑,、/抗原,、、多肽,、耗材/消耗品,、實驗儀器/設(shè)備、器械等,。

星肽生物以技術(shù)為主導(dǎo),，產(chǎn)品的質(zhì)量為核心，服務(wù)體系為保障,，發(fā)揮人才優(yōu)勢,，長期致力于打造成*的科研企業(yè)與機構(gòu)。

星肽生物持續(xù)通過開放的合作態(tài)度,、專業(yè)的服務(wù)機制、持續(xù)的**理念全力打造企業(yè)的核心競爭力為成為上等的行業(yè)服務(wù)供應(yīng)商銳意進(jìn)取,。

293F(人胚腎細(xì)胞),。復(fù)蘇操作流程

1. 準(zhǔn)備工作，開水浴鍋,，預(yù)熱試劑,，超凈工作臺紫外照射 30min,找到對應(yīng)細(xì)胞在液氮罐中的位置

2. 紫外照射后風(fēng)機吹 10min 后，酒精擦拭臺面,，放入試劑和離心管,，取 15ml 離心管，加入 9ml 培養(yǎng)液

3. 在液氮罐中取出細(xì)胞,，先擰松放液氮,，再擰緊,，將凍存管放入 PE 手套中，然后水浴融化后取出,，1-2min

4. 將凍存管噴酒精后放入超凈臺內(nèi),，擦干管壁，用 1ml 頭將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到已加培養(yǎng)液的離心管中

5. 800-1000rpm 離心 5min,注意配平

6. 將離心好的細(xì)胞棄上清,，加入 5ml *培養(yǎng)基重懸,，用移液管吹打 8-10 次， 避免產(chǎn)生氣泡,，將細(xì)胞懸液接種到 10cm 培養(yǎng)皿中,，補加 5ml 培養(yǎng)液

7. 混勻，十字法或者 8 字法

8. 將混好的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

293F(人胚腎細(xì)胞),。注意事項

1. 上述操作方案的數(shù)據(jù)可作為參考,，實際操作已實驗室配備的耗材為準(zhǔn)，

2. 凍存時含 10%DMSO,事先加 9ml 培養(yǎng)液是為了稀釋 DMSO,，理論上 1%DMSO

對細(xì)胞性

3. 隔著 PE 手套能有效防止水浴過程中導(dǎo)致污染

4. 重懸的體積只是作為參考,，具體的根據(jù)需要可進(jìn)行調(diào)整

5. 由于復(fù)蘇過程中已經(jīng)離心，第二天可根據(jù)實際情況選擇換液或者不換液（主要針對貼壁細(xì)胞）

293F(人胚腎細(xì)胞),。培養(yǎng)操作

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL293F(人胚腎細(xì)胞),。懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

293F(人胚腎細(xì)胞),。培養(yǎng)注意事項

1. 收到293F(人胚腎細(xì)胞)。后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系,。
2. 仔細(xì)閱讀293F(人胚腎細(xì)胞),。說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、比例、所需細(xì)胞因子等,，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān),。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶壁脫落,，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察,。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力,，如果證實細(xì)胞活力正常,， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4.靜置細(xì)胞貼壁后,，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待細(xì) 胞匯 合度80%左右時正常傳代,。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,。
6.建議客戶收到293F(人胚腎細(xì)胞)。后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和 志偉技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。