ClodronateLiposomes巨噬細(xì)胞清除套裝

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

清除巨噬細(xì)胞(depletion of macrophages)是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法,。荷蘭阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開(kāi)發(fā)的一款Clodronate Liposomes,，可以利用巨噬細(xì)胞的內(nèi)吞機(jī)制，將脂質(zhì)體包裹的膜不通透性的氯磷酸(clodronate)帶入細(xì)胞內(nèi),，利用“特洛伊木馬機(jī)制”從而達(dá)到去除巨噬細(xì)胞的目的。

作用原理:

兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體,，磷脂雙分子層中間通過(guò)水相分隔,。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質(zhì)體的過(guò)程中被包裹進(jìn)磷脂雙分子層之間的水相中(如圖1)。游離的氯磷酸鹽不能自由的通過(guò)脂質(zhì)體的磷脂雙分子層,。隨著脂質(zhì)體被巨噬細(xì)胞吞噬,，在巨噬細(xì)胞溶酶體磷酸酶的作用下,，溶解在脂質(zhì)體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來(lái)，并累積在細(xì)胞內(nèi),，當(dāng)其達(dá)到一定濃度時(shí),，巨噬細(xì)胞將會(huì)受到不可逆轉(zhuǎn)的損傷，從而進(jìn)入凋亡過(guò)程,。從死亡的巨噬細(xì)胞中釋放出來(lái)的氯磷酸鹽在細(xì)胞外的半衰期極短(大約15min),，可以通過(guò)泌尿系統(tǒng)排除體外。

CLODRONATE LIPOSOMES & CONTROL LIPOSOMES (PBS)

氯膦酸鹽脂質(zhì)體和對(duì)照脂質(zhì)體（PBS）

SKU: CP-005-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質(zhì)體CP-005-005構(gòu)成：

氯膦酸鹽脂質(zhì)體：

由同心磷脂雙層構(gòu)成的人造球,，該雙層包裹著含有氯膦酸鹽的PBS（磷酸鹽緩沖液）水溶液,。脂質(zhì)體是顆粒，大小大,。3微米,。它們?cè)赑BS中形成懸浮液，在儲(chǔ)存時(shí)會(huì)沉淀,，在試管或燒瓶的底部形成沉淀,。在對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥之前，應(yīng)先搖晃懸浮液,，以回收均勻的懸浮液,。

對(duì)照脂質(zhì)體（PBS）：

對(duì)照脂質(zhì)體不含氯膦酸鹽。它們僅含有PBS,，可用于對(duì)照實(shí)驗(yàn),，以查明注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體后觀察到的效果是否僅是由于巨噬細(xì)胞耗竭所致。

clodronateliposomes脂質(zhì)體CP-005-005產(chǎn)品描述

磷脂雙層由磷脂酰膽堿和膽固醇組成,。將所有脂質(zhì)體制劑懸浮在無(wú)菌磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中：

– 10 mM的Na2HPO4,；

– 10毫米NaH2PO4；

– 140毫米氯化鈉,。

我們所有的脂質(zhì)體均帶負(fù)電荷,，因此不會(huì)一起阻塞。懸浮液中的脂質(zhì)體沒(méi)有大小,，這意味著它也包含越來(lái)越大的脂質(zhì)體（大3微米）,。平均而言，脂質(zhì)體的大小為1.7微米,。

氯膦酸鹽脂質(zhì)體：人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液,，包裹了氯膦酸鹽。懸浮液中氯膦酸鹽的濃度約為,。5毫克/毫升 氯膦酸鹽以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封裝在脂質(zhì)體囊泡中,。

PBS脂質(zhì)體：人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液，其中包裹了PBS水溶液,。這些不含氯膦酸鹽,，可用于對(duì)照實(shí)驗(yàn),。

熒光DiI脂質(zhì)體：人工制備的脂質(zhì)囊泡的懸浮液，其中包封了PBS水溶液,，并用熒光染料DiI標(biāo)記,。它們不含氯膦酸鹽，可用于研究通過(guò)特定給藥途徑注射的脂質(zhì)體是否能夠到達(dá)要研究的巨噬細(xì)胞,。

儲(chǔ)存和使用說(shuō)明

到達(dá)脂質(zhì)體后,，應(yīng)將其儲(chǔ)存在4 – 8ºC（或39 – 47ºF）之間。脂質(zhì)體懸浮液不得冷凍,，也不要暴露于高溫下,。這可能會(huì)對(duì)磷脂雙層造成干擾，可能導(dǎo)致氯膦酸鹽從脂質(zhì)體中泄漏出來(lái),。

給藥前,，首先使脂質(zhì)體達(dá)到室溫，然后輕輕搖動(dòng)或攪拌懸浮液,。一段時(shí)間后,，脂質(zhì)體易于沉淀，導(dǎo)致小瓶中的分布不均勻,。當(dāng)注射花費(fèi)太多時(shí)間時(shí),，脂質(zhì)體甚至可能在注射器中沉淀。如果使用同一注射器注射多只動(dòng)物,，可能會(huì)導(dǎo)致劑量不同,。

不建議稀釋懸浮液，但如有必要,，請(qǐng)使用PBS或鹽水,。

我們建議客戶在發(fā)貨后16周內(nèi)使用脂質(zhì)體制劑。強(qiáng)烈建議不要在到期日期之后使用,。在此期間之后,，污染的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)增加，并且可能會(huì)發(fā)生輕微的功能喪失,。

作用機(jī)理

巨噬細(xì)胞在免疫和非免疫防御機(jī)制中起重要作用,。它們是抵御滲透到脊椎動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)菌，病毒和其他形式的微生物污染的首道防線,。巨噬細(xì)胞是大型細(xì)胞,，幾乎存在于所有身體組織中，它們可以具有不同的形式和名稱（例如庫(kù)普弗細(xì)胞,，肺泡巨噬細(xì)胞,，小膠質(zhì)細(xì)胞，破骨細(xì)胞,，紅髓巨噬細(xì)胞）,。巨噬細(xì)胞“清除”，它們攝入并消化可能是潛在病原體的所有異物,，微生物,，癌細(xì)胞和細(xì)胞碎片。該過(guò)程稱為吞噬作用,。巨噬細(xì)胞主要通過(guò)可溶性分子如細(xì)胞因子和趨化因子的介導(dǎo)來(lái)進(jìn)一步調(diào)節(jié)許多非吞噬細(xì)胞的功能,。他們參與先天免疫，

脂質(zhì)體是人工制備的球體,，由同心磷脂雙層組成,。當(dāng)磷脂分散在水中時(shí)，親水性頭部將構(gòu)成脂質(zhì)體的兩個(gè)外部部分,，而疏水性脂肪酸基團(tuán)將構(gòu)成內(nèi)部部分（見(jiàn)圖1）,。水室分隔雙層，親水分子可以溶解在其中,，形成脂質(zhì)體包封的分子,。氯膦酸鹽（二氯亞甲基雙膦酸酯或Cl2MBP）是一種親水性分子，可以封裝在磷脂雙層中,。游離氯膦酸鹽不易穿過(guò)細(xì)胞膜,，并通過(guò)腎臟系統(tǒng)從循環(huán)中迅速清除（即數(shù)分鐘內(nèi)）。但是,，氯膦酸鹽脂質(zhì)體包埋在脂質(zhì)體中時(shí),，會(huì)被巨噬細(xì)胞吞噬，無(wú)法逃脫（見(jiàn)圖2）,。磷脂雙層被溶酶體磷脂酶消化,，而氯膦酸鹽未被消化并且保留在巨噬細(xì)胞中。巨噬細(xì)胞攝入的磷脂雙層和脂質(zhì)體越多,，在巨噬細(xì)胞內(nèi)積累的氯膦酸鹽越多,。超過(guò)一定的細(xì)胞內(nèi)濃度，氯膦酸鹽將通過(guò)啟動(dòng)程序性細(xì)胞死亡（即凋亡）來(lái)消除巨噬細(xì)胞,。

圖1.氯膦酸鹽脂質(zhì)體的示意圖,。囊泡由同心的磷脂雙層構(gòu)成，被水性隔室隔開(kāi),。雙層由親水和疏水基團(tuán)組成,。將氯膦酸鹽（在此以黑色方塊表示）溶解在水溶液中并封裝在脂質(zhì)體內(nèi)。

圖2.巨噬細(xì)胞對(duì)氯膦酸鹽脂質(zhì)體的攝取和消化示意圖,。巨噬細(xì)胞通過(guò)胞吞作用攝入氯膦酸鹽脂質(zhì)體，然后與含有磷脂酶的溶酶體（L）融合（箭頭）,。磷脂酶破壞的磷脂雙層越多,，在巨噬細(xì)胞內(nèi)釋放的氯膦酸鹽（黑色方塊）越多,。巨噬細(xì)胞終通過(guò)凋亡被殺死。（N =巨噬細(xì)胞核）,。

因此,，氯膦酸鹽脂質(zhì)體可用于通過(guò)消耗巨噬細(xì)胞來(lái)研究巨噬細(xì)胞功能。例如,，它們可以應(yīng)用于各種自身免疫性疾病,，移植，神經(jīng)系統(tǒng)疾病和基因治療的模型,。氯膦酸鹽脂質(zhì)體只有在可以達(dá)到的情況下才能耗盡巨噬細(xì)胞,。一些組織可以形成脂質(zhì)體的屏障。通過(guò)選擇氯膦酸鹽脂質(zhì)體的正確給藥途徑,，可以耗盡特定的器官或組織的巨噬細(xì)胞,。有關(guān)管理協(xié)議的更多信息，請(qǐng)單擊此處,。

PBS脂質(zhì)體主要用于對(duì)照實(shí)驗(yàn),。但是，這些也可以在某些時(shí)間段內(nèi)通過(guò)飽和來(lái)阻止吞噬作用,。因此,，PBS脂質(zhì)體不能代表正常健康的，未阻斷的,，未抑制的和未活化的巨噬細(xì)胞的對(duì)照實(shí)驗(yàn),。當(dāng)比較氯膦酸鹽脂質(zhì)體和PBS脂質(zhì)體的作用時(shí)，其作用因此可能小于預(yù)期,。

有關(guān)更多信息,，請(qǐng)參見(jiàn)：

– Van Rooijen，N.和Sanders,，A.（1994）,。脂質(zhì)體介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞耗竭：作用機(jī)理，脂質(zhì)體制備和應(yīng)用,。免疫學(xué)雜志,，174（1-2），83-93,。

– Van Rooijen,，N.，Sanders,，A.和van den Berg,，TK（1996）。脂質(zhì)體介導(dǎo)的氯膦酸鹽和丙am的細(xì)胞內(nèi)遞送誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡。免疫學(xué)雜志,，193（1）,，93-99。

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