正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

商品屬性：

測定意義：

α-L-Af 是一種能夠水解非還原呋喃阿拉伯糖殘基的糖苷酶類,，使細(xì)胞壁阿拉伯半乳聚糖,、阿拉伯甘露聚糖等中性糖不斷解離，促進(jìn)果膠的增溶和降解,。由于果實(shí)成熟過程中常常伴隨著阿拉伯糖的喪失,，該酶活性在果實(shí)成熟軟化中的研究具有重大意義。
測定原理：
α-L-Af分解對硝基酚阿拉伯呋喃糖苷生成對-硝基苯,，后者在400nm有最大吸收峰,，通過測定吸光值升高速率來計算α-L-Af活性。
自備用品：
酶標(biāo)儀/可見分光光度計,、臺式離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、96孔板/微量石英比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶,，4℃保存,。

試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存,；臨用前加入 2.5mL 蒸餾水,，充分溶解備用；用不完的試劑

仍-20℃保存,。

試劑二：液體 4mL×1 瓶,，4℃保存。

試劑三：液體 13mL×1 瓶,，4℃保存,。

組織樣本的前處理：

1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量

（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴,，功率 20％或 200W,，超聲 3s，間隔 10s,，重復(fù) 30 次）,；15000g 4℃離心 10min，取上清,，置冰上待測,。

2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL 提取液）,，進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心 10min,，取上清,，置冰上待測。

測定步驟：

1,、 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,，調(diào)節(jié)波長至 400nm，蒸餾水調(diào)零,。

2,、樣本測定（在 EP 管或 96 孔板中依次加入下列試劑）：

試劑名稱（μL） 測定管 對照管

試劑一 25

蒸餾水 25

試劑二 35 35

樣本 10 10

迅速混勻，放入 37℃保溫 30min

試劑三 130 130

充分混勻， 400nm 處測定吸光值 A,，計算 ΔA=A 測定-A 對照,。每個測定管需設(shè)一個對照管。

α-L-Af 活性計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為 y =0.00585x -0.0027,；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（nmol/mL）,，y 為吸光值。

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白每 min 產(chǎn)生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位,。

α-L-Af 活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T

=39.89×(ΔA+0.0027) ÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織每小時產(chǎn)生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位,。

α-L-Af 活性(nmol/min/g 鮮重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T

=39.89×(ΔA+0.0027) ÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：

單位的定義：每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞每小時產(chǎn)生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.00585×V 反總]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T=0.08×(ΔA +0.0027)

Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；V 反總：反應(yīng)體系總體積,，0.07mL,；V 樣：加入反應(yīng)體系

中樣本體積，0.01mL,；V 樣總：加入提取液體積,，1mL；W：樣本質(zhì)量,，g,； 500：細(xì)胞或

細(xì)菌總數(shù)，500 萬,；T：反應(yīng)時間,，30min。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為 y = 0.0039x -0.0027,；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（nmol/mL）,，y 為吸光值。

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白每小時產(chǎn)生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位,。

α-L-Af 活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T

=59.83×(ΔA+0.0027) ÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織每小時產(chǎn)生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位,。

α-L-Af 活性(nmol/min/g 鮮重)=[(ΔA+0.0027)÷0.0039×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T

=59.83×(ΔA+0.0027) ÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：

單位的定義：每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞每小時產(chǎn)生 1nmol 對-硝基苯定義為一個酶活性單位。

α-L-Af 活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V 反總]÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T

=0.12×(ΔA +0.0027)

Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.07mL,；V 樣：加入反應(yīng)體系

中樣本體積,，0.01mL；V 樣總：加入提取液體積,，1mL,；W：樣本質(zhì)量，g,； 500：細(xì)胞或

細(xì)菌總數(shù),，500 萬,；T：反應(yīng)時間，30min,。

生化檢測試劑盒實(shí)驗操作說明：

一,、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧陰離子清除能力分析,、葡萄糖氧化酶活性（GOD）檢測,、總抗氧化能力（TAC）檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測,、植物類黃酮含量檢測,、植物總酚（TP）含量檢測試劑盒。

氧化酶（XO）活性分析試劑盒為例,，提供了一種簡單易用的比色分析法,，用于測定各種樣品中的XO活性，特點(diǎn)是測定血清,，血漿,，組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性，以及廣泛的檢測范圍：15.6 -500 mU/mL,。

二,、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫（H2O2）檢測,、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析,、蛋白質(zhì)羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒,。

蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒（比色法）為例,，提供了一種簡單易用的比色法，用于分析不同生物樣品（細(xì)胞/組織裂解液,，生物液體）中蛋白質(zhì)羰基含量,。在370 nm處有特征吸收峰。

特點(diǎn)是：1.測定組織樣本,、細(xì)胞,、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量,。2.樣本處理,、實(shí)驗步驟以及結(jié)果計算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長,。

三,、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性檢測,、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒,。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例，提供一種簡單易用的比色測定法,，用于定量測定血清,，血漿，組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性,。

特點(diǎn)是：1.測定血清,，血漿，組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性,。2.通過WST-8法測定SOD活性,，zui大抑制率可接近100％，不受一些常見干擾因素的干擾,。3.廣泛的檢測范圍：3.13- 200U/mL,。

公司正在出售的產(chǎn)品：