單氨氧化酶B(MAOB)重組蛋白
- 公司名稱 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2023/3/22 14:13:21
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Monoamine Oxidase B (MAOB) |
| 種屬 | Mus musculus (Mouse,，小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
蛋白表達(dá)及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床,！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
單氨氧化酶B(MAOB)重組蛋白 | Recombinant Monoamine Oxidase B (MAOB) | Mus musculus (Mouse,，小鼠) |
商品介紹：
MAO-B; Amine oxidase [flavin-containing] B 酶與激酶 物種：Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 線粒體 預(yù)測分子量：37.6KDa 實(shí)際分子量：38kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽：Gln206~Thr505 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點(diǎn)：7.2 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
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過氧化氫酶(CAT)天然蛋白英文名稱：Native Catalase (CAT)Bos taurus; Bovine (Cattle,，牛)
操作步驟：
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；
2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL～1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min,；
6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。
2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織,，固定時(shí)間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí),。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果。因此,，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時(shí),，有時(shí)需要對抗原先進(jìn)行修復(fù)，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產(chǎn)品對人體有害，操作時(shí)請小心,，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5、為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
SHISA5產(chǎn)品名稱: SHISA5蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow
DGKD產(chǎn)品名稱: 甘油二酯激meiδ/DGK-δ抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
CLEC 4E產(chǎn)品名稱: C型凝集su4家族E抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse
DIAPH3產(chǎn)品名稱: 常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep
Integrin beta 7產(chǎn)品名稱: 整合suβ7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
POU6F1/BRN5產(chǎn)品名稱: 腦特異性同源POU結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
NUDT14產(chǎn)品名稱: NUDT14蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep, GuineaPig
HIV1 p55+p17產(chǎn)品名稱: 艾滋毒抗體標(biāo)記: Unconjugated
C2orf24產(chǎn)品名稱: 2號染色體開放閱讀框24抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Invadolysin產(chǎn)品名稱: Leishmalysin樣肽mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
單氨氧化酶B(MAOB)重組蛋白人分揀連接蛋白19(SNX19)ELISA試劑盒SNX19分揀連接蛋白19ELISA試劑盒Human Sorting Nexin 19(SNX19)ELISA Kit
人分揀連接蛋白17(SNX17)ELISA試劑盒SNX17分揀連接蛋白17elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Sorting Nexin 17(SNX17)ELISA Kit
人分揀連接蛋白16(SNX16)ELISA試劑盒SNX16分揀連接蛋白16elisa檢測試劑盒Human Sorting Nexin 16(SNX16)ELISA Kit
人分揀連接蛋白15(SNX15)ELISA試劑盒SNX15分揀連接蛋白15elisa kitHuman Sorting Nexin 15(SNX15)ELISA Kit
人分揀連接蛋白14(SNX14)ELISA試劑盒SNX14分揀連接蛋白14ELISA試劑盒Human Sorting Nexin 14(SNX14)ELISA Kit
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