基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白
- 公司名稱 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2023/3/20 21:13:38
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) |
| 種屬 | Bos taurus; Bovine (Cattle,，牛) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
商品介紹：
CLG3; Collagenase 3 酶與激酶 腫瘤免疫 骨骼代謝 風(fēng)濕病學(xué) 物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) 來(lái)源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量：28.2kDa 實(shí)際分子量：32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽：Tyr104~Glu319 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點(diǎn)：5.6 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,，不得用于臨床,！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) | Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) |
蛋白表達(dá)及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。
3.通過(guò)親和,，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品：
Recombinant Human SH3BP4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human RUFY1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human HGS宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human MBD4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟：
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；
2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL～1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；
6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
應(yīng)用類型: Other英文名稱: ERK5英文別名: Big MAP kinase 1; BMK 1; BMK 1 kinase; BMK-1; BMK1; BMK1 Kinase; EC 2.7.11.24; ERK 4; ERK 5; ERK-5; ERK4; Extracellular Signal Regulated Kinase 5; Extracellular signal-regulated kinase 5; MAP kinase 7; MAPK 7; MAPK7; Mitogen Activated Protein Kinase 7; Mitogen-activated protein kinase 7; MK07_HUMAN; OTTHUMP00000065906; OTTHUMP00000065907; PRKM 7; PRKM7; PROTEIN KINASE, MITOGEN-ACTIVATED, 7.
CDMP1產(chǎn)品名稱: 軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1/GDF 5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
PRCP產(chǎn)品名稱: 脯氨酰羧肽mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
Bax產(chǎn)品名稱: Bax單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Monkey
CYP2D6產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色suP450 2D6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Cat
Caspase-12產(chǎn)品名稱: 半胱胺suan蛋白mei蛋白-12抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
PI3 Kinase p110 beta產(chǎn)品名稱: 磷脂酰肌醇激mei（PI3Kβ）抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
Collagen II產(chǎn)品名稱: Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig
N-Cadherin產(chǎn)品名稱: N-鈣粘附分子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
CYP11A1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色suP450 11A1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白人血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒PS血漿抗凝蛋白Selisa kitHuman PS ELISA Kit
人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒PC血漿抗凝蛋白CELISA試劑盒Human plasma anticoagulant protein C,PC ELISA Kit
人血漿酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒CETP血漿酯轉(zhuǎn)移蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human cholesterolestertransferprotein,，CETP ELISA Kit
人血紅su加氧mei2(HO-2)ELISA試劑盒HO-2血紅su加氧mei2elisa檢測(cè)試劑盒Human heme oxygenase2,HO-2 ELISA Kit
人血紅su加氧mei1(HO-1)ELISA試劑盒HO-1血紅su加氧mei1elisa kitHuman heme oxygenase1,HO-1 ELISA Kit
注意事項(xiàng)：
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。
2、雖然作用溫和,，但能硬化組織,，固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆，切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí),。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色,，影響免疫組化結(jié)果。因此,，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4,、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
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