ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明書詳細(xì)介紹：

中文名：ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：100ml

分類：細(xì)胞組分分離

保存：4℃,12個(gè)月

用途：去除細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞,屬于溶解紅細(xì)胞方法的一種。

說明：無菌溶液,。注意無菌操作,經(jīng)過濾除菌處理,。

適用范圍：限于科研,，實(shí)驗(yàn) ,，不作臨床

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)使用說明：

1.取新鮮抗凝血，400～500g離心5min，離心棄上清,。   

2.裂解: 加入6～10倍細(xì)胞沉淀體積的ACK Lysis Buffer,，輕柔吹打混勻，裂解1～5min,。本操作步驟在4℃條件下操作更佳,，亦可在室溫下操作。（特別提醒：對(duì)于鼠的血液,，裂解1～2min已經(jīng)足夠,，對(duì)于人的外周血，宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至4～5min,，并且裂解過程中輕輕搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解）   

3.離心: 4℃,，400～500g離心5min，棄紅色上清,。如無低溫離心機(jī)本步驟亦可在室溫下操作,。   

4.如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不*，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次,。 

5.洗滌: 根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS,、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液,，輕柔混勻重懸沉淀4℃,，400～500g離心2～3min，棄上清,，離心步驟亦可在室溫下操作,。所加入的PBS、HBSS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上,。

6.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計(jì)數(shù),、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn),。 

注意： 對(duì)于微量或少量的血液樣本，可以不用第1步操作,，加入10倍血液體積的ACK Lysis Buffer進(jìn)行第2步操作,，并在4℃或室溫裂解4～15min。對(duì)于鼠的血液,，裂解4～5min已經(jīng)足夠,；對(duì)于人的外周血，宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至10min,，但通常不宜超過15min,，并且裂解過程中宜適當(dāng)搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解,。

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明書作用原理：
細(xì)胞裂解液一般都用的是含酶的,在血紅細(xì)胞表面上有紅細(xì)胞專屬的表面抗原,當(dāng)裂解液中含可以攻擊特定紅細(xì)胞表面抗原的酶的時(shí)候 就只會(huì)造成紅細(xì)胞的變形,生物通道擴(kuò)大,膨脹,裂解,或者引起紅細(xì)胞的變性.而不會(huì)攻擊其他細(xì)胞.另外紅細(xì)胞有自己的電負(fù)性,滲透脆性(通常是一些非酶細(xì)胞裂解液的突破點(diǎn)) ,懸浮穩(wěn)定性,這都是區(qū)別于其他種類細(xì)胞的區(qū)別點(diǎn).紅細(xì)胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細(xì)胞的.另外紅細(xì)胞裂解液不能達(dá)到100% 準(zhǔn)確的裂解紅細(xì)胞,總會(huì)或多或少導(dǎo)致其他種類細(xì)胞的裂解.

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明書注意事項(xiàng)： 

1.制備細(xì)胞懸液是應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需要，不一定要制備成單細(xì)胞懸液,。 

2.后續(xù)試驗(yàn)如果是用于細(xì)胞培養(yǎng),，操作過程中應(yīng)注意無菌操作，盡量在超凈工作臺(tái)內(nèi)操作,。

3.離心步驟盡量在4℃離心機(jī)上操作,。 

4.對(duì)于常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量,，并且洗滌效果也更好,，不需要大體積的離心管；快速步驟少了一次離心過程,，洗滌效果略差一些,，同時(shí)需要大體積的離心管。 

5.離心洗滌后,，通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè),。   

6.經(jīng)過ACK Lysis Buffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細(xì)胞時(shí)不必使用DEPC處理的溶液,，即無需在該操作中特意去除RNase,。

7.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)說明：

對(duì)于裂解,、去除有細(xì)胞核紅細(xì)胞，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞,，效果不佳,，裂解類似細(xì)胞時(shí)，不建議采用,。本裂解液經(jīng)過濾除菌,，經(jīng)過ACK Lysis Buffer處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè),。

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