淀粉分支酶（SBE）測定試劑盒 微量法

測定意義：SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,，測定SBE活性在淀粉生物合成,、農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義

測定原理：淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收，SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支，從而降低了淀粉-碘復合物在660nm吸收值,，一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。

需要的儀器,，耗材:可見分光光度計/酶標儀,、水浴鍋、臺式離心機,、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰,、蒸餾水。

 淀粉分支酶（SBE）測定試劑盒 微量法

一,、粗酶液提取按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿,。15000g 4℃離心 10min,，取上清，置冰上待測,。二,、測定步驟試劑名稱（μL） 對照管 測定管 95℃水浴 1min 后滅活的粗酶液 250 粗酶液 250 試劑一 320 320 試劑二 30 30 混勻，37℃準確保溫 20 min,，95℃水浴 1 min（蓋緊防止水分散失）,，冷卻試劑三 500 500 試劑四 40 40 混勻，室溫靜置 10min,，用蒸餾水調(diào)零,，660nm 處讀取各管吸光值。,，注意： 1,、 可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液，然后集中進行 1min95℃水浴處理,。 2,、 試劑一如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混勻,。

1,、按照蛋白濃度計算單位的定義：以波長 660nm 的吸光度下降百分率表示，每 mg 蛋白在反應體系中每降低 1％碘藍值為一個酶活性單位,。 SBE 活性(U/mg prot)=( A 對照管-A 測定管)/A 對照管÷Cpr ×100 2,、按照樣本鮮重計算單位的定義：以波長 660nm 的吸光度下降百分率表示，每 g 組織在反應體系中每降低 1％碘藍值為一個酶活性單位。 SBE 活性(U/g 鮮重)=(A 對照管-A 測定管)/A 對照管÷(W÷V 樣總)×100 V 樣總：提取液總體積,，1mL,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣品質(zhì)量,，g；T：反應時間,，5min,。

相關(guān)文獻：

《ARSENATE INDUCED CHLOROSIS 1/ TRANSLOCON AT THE OUTER ENVOLOPE MEMBRANE OF CHLOROPLASTS 132 Protects Chloroplasts from Arsenic Toxicity 》 作者:Peitong Wang, Xi Chen, Xuan Xu, Chenni Lu, Wei Zhang, Fang-Jie Zhao 期刊:Plant physiology 影響因子:6.305 PMID: