通用細(xì)胞凍存液的使用步驟:
1,、培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)晚期,,顯微鏡觀察其外觀、形態(tài),、有無(wú)污染等,,取狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作。
2,、離心,,棄上清。
3,、加入適量的通用細(xì)胞凍存液,,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1~10×106/ml,,置于凍存管中,,密閉、不要擰的太緊,,避免彎曲變形,。
4、一般遵循1℃/min的速率進(jìn)行冷凍,。亦可采用4℃ 20min,,-20℃ 30min,-70℃過夜,,然后置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ),。
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