糖尿病自身免疫-胰島素抗體RIA試劑盒

僅供科研使用

糖尿病自身免疫-胰島素抗體RIA試劑盒

RSR 公司生產(chǎn)的胰島素自身抗體(Insulin Ab) RIA 檢測試劑盒僅用于定量檢測人類血清中胰島素抗體。需專業(yè)技術(shù)人員操作,。

一,、糖尿病自身免疫抗體檢測-胰島素抗體背景：
胰島β細胞自身抗體是I 型糖尿病（type 1 DM）重要的血清標志物,，該抗體可以識別抗原包括胰島素,，谷氨酸脫羧酶（GAD65）和胰島細胞抗原IA-2、ICA-512以及鋅轉(zhuǎn)運體8。

二,、糖尿病自身免疫抗體檢測-胰島素抗體檢測原理：

在RSR 的胰島素自身抗體RIA 檢測方法中,，受測血清在*步孵育中先與[^125I]-(A14)單碘胰島素結(jié)合，而后在第二步中與加入的抗人IgG 結(jié)合,，使已形成的碘標記的胰島素-抗胰島素抗體復(fù)合物產(chǎn)生沉淀,。經(jīng)離心后經(jīng)測定碘125 的放射量可測得沉淀中胰島素抗體的濃度。本試劑盒測定范圍為0.4 至50u/mL(RSR單位),。

三,、實驗步驟：
所有試劑除緩沖液外使用前需室溫放置(20-25℃)至少30 分鐘；所有試劑使用前請混勻,。在步驟2,4,5 中建議使用非一次性的Eppendorf 移液器,。
1.各自向做好標記的測定管中加入20μL 患者血清、陰性質(zhì)控品,、標準品和陽性
質(zhì)控品,。實驗推薦進行雙管。
2.每支管中加入25μL 碘125 標記的胰島素,。準備兩只額外的空管,，向其中加入
標記胰島素用以測定總計數(shù)。
3.使用渦旋攪拌器混勻每支測定管,。室溫下隔夜孵育(16-20 小時),。
4.每支管中加入100μL 抗人IgG。(總計數(shù)測定管除外)使用渦旋攪拌器混勻,，蓋
好測定管,，在2-8℃下孵育1 小時。
5.每支管仲加入2mL 冷藏溫度(2-8℃)的緩沖液(總計數(shù)測定管除外),。使用渦旋攪
拌器混勻,，在4℃下使用冷凍離心機1500g 離心20 分鐘。
6.離心完成后棄去上清液,。請留意操作,，不要損失沉淀物。
7.重復(fù)步驟5 和步驟6.
8.使用gamma 計數(shù)器測量每支管(含總計數(shù)測定管),，測量一分鐘,。