小鼠棕色脂肪原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

小鼠棕色脂肪細胞分離自棕色脂肪組織,；動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,，白色脂肪堆積在皮下，負責(zé)儲存多余熱量,；棕色脂肪負責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪，將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳,、水和熱量，本身不儲存熱量,。棕色脂肪組織呈棕色,，其特點是組織中有豐富的毛細血管,，脂肪細胞內(nèi)散著許多小脂滴，線粒體大而豐富,，核圓形，位于細胞中央,，這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,，新生兒及冬眠動物較多，在新生兒主要分布在肩胛間區(qū),、腋窩及頸后部等處,。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發(fā)揮作用,，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫,。隨著年齡增長,，棕色脂肪會逐漸消失,。終，動物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細胞,，分布于頸部和鎖骨。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色（棕色）脂肪細胞,，常呈白色,，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達到,，此后數(shù)量一般不再增加,。細胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,，稱為脂質(zhì)泡，富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),。此外,，還有一種褐色脂肪細胞,，在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部,、腋窩、縱隔及腎臟周圍,，含有高度團縮的褐色脂肪,，作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,，調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪細胞采用膠原酶消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪細胞經(jīng)油紅O染色檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

大鼠骨髓瘤細胞;IR983F  RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞)   CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人原代輸尿管上皮細胞 狗原代臍靜脈內(nèi)皮細胞

NKB (Neurokinins B 0.5mgNKB (Neurokinins B) 神經(jīng)激肽B(抗原)

CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白

FGF14重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白 Protein

CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白

PTX3重組人 PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-14 蛋白 Protein

大鼠二價金屬離子轉(zhuǎn)運體(DMT1)試劑盒 ,，英文名： DMT1 ELISA Kit

Pig sodium glucose co anspoer 1 (SGLT1) ELISA Kit 豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(SGLT1)試劑盒

鵝特定基因序列(Goose)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforM2-PK(MousePyruvateKinase)ELISAKit小鼠同酸激酶M2型同工酶

體液總氨基酸含量比色法定量試劑盒20次

ELISAKitTNF-α雞腫瘤壞死因子α

小鼠白介素15(IL-15)試劑盒   96T/48T

小鼠白介素13(IL-13)試劑盒   96T/48T

小鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒   96T/48T

小鼠白介素12(IL-12/P40)試劑盒   96T/48T

小鼠棕色脂肪原代細胞豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒 ,，英文名： OVA sIgG ELISA Kit

Human resistin (Resistin) ELISA Kit 人抵抗素(Resistin)試劑盒

MonkeyE-SelectinELISAkit 猴E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBGP/Gehrelin(Mousebrain-gpeptides)ELISAKit小鼠腦腸肽

細菌牛奶石蕾瓊脂平板50個

RabbitLaminin,LNELISAKit兔子層連蛋白/板層素(LN)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL17A重組小鼠 IL17 / IL17A 蛋白 Protein

蛋白激酶Bγ(PKBγ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase B Gamma (PKBg)

TPM4重組人 TPM4 / Tropomyosin 4 蛋白 Protein

CD28 Protein Human 重組人 CD28 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

LAYN Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Layilin / LAYN 蛋白

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。