小鼠口腔粘膜成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

小鼠口腔粘膜成纖維細胞分離自口腔粘膜組織,；口腔（oral cavity）是消化道的起始部分,。前借口裂與外界相通,，后經(jīng)咽峽與咽相續(xù)?？谇粌?nèi)有牙,、舌等器官?？谇坏那氨跒榇?、側壁為頰、頂為腭,、口腔底為黏膜和肌等結構,。口腔借上,、下牙弓分為前外側部的口腔前庭（oral vestibule）和后內(nèi)側部的固有口腔（oral cavity proper）,；當上、下頜牙咬合時,，口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來,。成纖維細胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動,，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長，不聚集成團,；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠口腔粘膜成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠口腔粘膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜,，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3,、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

SW1990細胞,，人胰腺癌細胞 人胸膜瘤細胞,SMC-1細胞 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7  小腸粘膜上皮細胞Many   SHG-44細胞，膠質瘤細胞 NCTC克隆929細胞,L129細胞 人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系 人原代子宮平滑肌細胞 大鼠原代腸巨噬細胞

BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉錄因子抗原

BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽)

TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein

CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白

ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)試劑盒 ,，英文名： GAD-Ab-IgG ELISA Kit

Porcine ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒

侵襲性大腸桿菌(EIEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIGF/CXCL9(Humanmonocyteierferongammainducingfactor)ELISAKit人γ干擾素誘導單核細胞因子

體液賴(lysine)含量化學比色法定量試劑盒20次

ELISAKitMHC/BoLA牛主要組織相容性復合體

心肌肌鈣蛋白1   英文名稱：   cardiac oponin 1   規(guī)格：      英文縮寫：   CTn1

Ⅰ型膠原C端肽   英文名稱：   C-telopeptide of type Ⅰ collagen   規(guī)格：      英文縮寫：   CTX-Ⅰ

   英文名稱：   Cytochrome C   規(guī)格：      英文縮寫：   Cytochrome C

CXC趨化因子受體1   英文名稱：   CXC chemokine receptor 1   規(guī)格：      英文縮寫：   CXCR1

小鼠口腔粘膜成纖維原代細胞小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cytokine receptor (sCKR) ELISA Kit 人可溶性細胞因子受體(sCKR)試劑盒

HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit 人鳥脫羧酶(ODC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3(Mouse25-DihydroxyvitaminD3)ELISAKit小鼠25羥基3

飲料比色法定量試劑盒20次

MouseL-phenylalanine,LPAELISAKit小鼠苯(LPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL1R2重組小鼠 IL1R2 / CD121b 蛋白 Protein

二氫二醇脫氫酶2(DDH2)重組蛋白 Recombinant Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2)

KIR2DL4重組人 KIR2DL4 / CD158D 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

ACVR1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 蛋白 (Fc 標簽)