猴外周血單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒
貨號(hào)：P4460
規(guī)格：200ml/KIT
保存：室溫避光儲(chǔ)存，有效期少 2 年,。

產(chǎn)品組成：

名稱(chēng)                                 規(guī)格
各種動(dòng)物外周血單個(gè)核細(xì)胞分離液       100ml×2
全血及組織稀釋液（贈(zèng)品）             100ml
細(xì)胞洗滌液（贈(zèng)品）                   100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
    本分離液為Ficoll,、羥乙基淀粉550與泛影酸葡甲胺的混合液?？鼓庵苎稍诜蛛x液中分層,。離心時(shí)，在Ficoll,、羥乙基淀粉的作用下紅細(xì)胞與粒細(xì)胞聚集并迅速沉降,；此時(shí)，單個(gè)核細(xì)胞仍處于分離液上層,，紅細(xì)胞污染可忽略不計(jì),。大部分血小板可在細(xì)胞清洗低速離心過(guò)程中去除。 其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液,，因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,，用戶在制定分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動(dòng)物種屬及被分離細(xì)胞的名稱(chēng),。
適用于從動(dòng)物抗凝血液中分離單個(gè)核細(xì)胞,，無(wú)菌條件下所分離的單個(gè)核細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)等。本品僅供科研使用,。

器材和設(shè)備 ：
    400g離心力的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī),、15ml玻璃離心管,、吸管等。

注意事項(xiàng)：
    A．本實(shí)驗(yàn)要求,，在正常大氣壓下,，分離液、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃,。分離液在低溫時(shí)呈較高密度,，在高溫時(shí)呈較低密度,。細(xì)胞分離液從冰箱取出后,，不可立即使用，操作前可將樣本和分離液復(fù)溫18-22℃,。為獲得佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，好在取血后2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液提取后存放時(shí)間越長(zhǎng)細(xì)胞活性越低,。
    B．實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，如需稀釋血液或洗滌細(xì)胞，不可使用含Ca,、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,，其成分會(huì)導(dǎo)致血細(xì)胞凝集，大大降低細(xì)胞得率及純度,。
    C．優(yōu)抗凝劑選擇：EDTA,、枸櫞酸、肝素,，其他抗凝劑也可使用,，但會(huì)影響細(xì)胞活性。應(yīng)注意在血液稀釋過(guò)程中去除抗凝劑體積,。
    D．當(dāng)血液樣本粘度過(guò)高或血液樣本大于等于3ml時(shí),，優(yōu)稀釋方法：將血液于18-22℃以250g離心10分鐘，棄去血漿,，補(bǔ)充添加全血及組織稀釋液,，添加量為所棄去血漿體積的1.5-2倍，混勻備用,。注：不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞?huì)降低細(xì)胞得率及活性,。
    E．實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，不可使用含粉手套,、不可使用內(nèi)毒素含量過(guò)高的液體,，手套中的粉末顆粒及高內(nèi)毒素會(huì)激活淋巴細(xì)胞從而降低細(xì)胞得率及活性。
    F．本實(shí)驗(yàn)不可使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品,，其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁影響分離效果,。推薦使用未經(jīng)過(guò)堿處理的玻璃離心管,。
    G．吸取過(guò)多的單個(gè)核細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。吸取過(guò)多的單個(gè)核細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜,。
    H．如需進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),，則需血液貯藏時(shí)間不得多于10小時(shí)，否則將導(dǎo)致細(xì)胞被激活,，得率降低,。
    I．為去除所混雜的血小板，可在分離液上層加上4-20%蔗糖梯度等滲溶液進(jìn)行二次離心,。
    J．細(xì)胞純度可在步驟10后使用瑞氏染色方法確定,，細(xì)胞活性可用臺(tái)盼藍(lán)處理后觀察。

    K．由于各品牌離心機(jī)的性能不同,，國(guó)內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,，可能影響分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時(shí)間,，摸索佳的分離條件（具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定）,。
 

分離方法 ：
     一、當(dāng)血液樣本小于3ml時(shí),，實(shí)驗(yàn)方法如下：
     1. 取一支15ml離心管,，加入3ml分離液置于18-22℃復(fù)溫。
     2. 將血液樣本小心加于分離液之液面上,。18-22℃,，400g離心20分鐘。低溫（如4℃）離心會(huì)降低細(xì)胞得率,。
     3. 離心后,，用吸管小心吸出分離液上層（包含單個(gè)核細(xì)胞的細(xì)胞層）0.5cm以上的上清液部分，棄去,。
     4. 用吸管小心吸取分離液層及淋巴細(xì)胞層于另一新離心管內(nèi),。
     5. 在步驟4中所得離心管中加入10ml細(xì)胞洗滌液混勻。
     6. 250g離心10分鐘,。
     7. 棄上清,。
     8. 用吸管以5ml細(xì)胞洗滌液重懸所得細(xì)胞。
     9. 250g離心10分鐘,。
     10. 棄上清,。重復(fù)步驟7、8,、9,，后以0.5ml后續(xù)試驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。

二,、當(dāng)血液樣本大于3ml時(shí),，實(shí)驗(yàn)方法如下：
     1. 先按“【注意事項(xiàng)】D項(xiàng)”所述方法稀釋血液樣本,。
     2. 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管，加入分離液（加入量與稀釋后的血液樣本體積相等）,，置于18-22℃復(fù)溫,。
     3. 將經(jīng)稀釋處理的血液樣本小心加于分離液之液面上。18-22℃,，400g離心20分鐘,。低溫（如4℃）離心會(huì)降低細(xì)胞得率。注：加入血液樣本后,，樣本及分離液總體積不得超過(guò)離心管總體積的三分之二,。
     4. 剩余步驟同“情況一”中步驟3步驟10。

產(chǎn)品性能 指標(biāo) ：
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
無(wú)菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10µm 以上的不溶性微粒20 粒以下,，
含25µm 以上的不溶性微粒5 粒以下

貯藏及保存期限 ：
     本分離液是敏光型的,，應(yīng)在18℃-25℃避光保存，有效期兩年,。啟封后置4℃保存，溶液變渾濁或污染細(xì)菌時(shí),，產(chǎn)品失效,。保存溫度較低（10℃以下）時(shí)分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果,。

猴外周血單個(gè)核細(xì)胞分離液試劑盒訂購(gòu)說(shuō)明：

1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨,。 
2,、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂,，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4,、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨,。
5,、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址,、姓名,、等以傳真、,、短信,、等形式通知我們。

運(yùn)輸說(shuō)明：

1,、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封,，膠帶層層粘住泡沫盒,，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中,，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,。
2,、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),，再使用泡沫盒密封,，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周）,，然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航,。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝,。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨,，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。