豬外周血單個核細胞分離液試劑盒
貨號：P4420
規(guī)格：200ml/KIT
保存：室溫避光儲存,，有效期少 2 年。

產(chǎn)品組成：

名稱                                 規(guī)格
各種動物外周血單個核細胞分離液       100ml×2
全血及組織稀釋液（贈品）             100ml
細胞洗滌液（贈品）                   100ml

產(chǎn)品簡介：
    本分離液為Ficoll,、羥乙基淀粉550與泛影酸葡甲胺的混合液,。抗凝外周血可在分離液中分層,。離心時,，在Ficoll、羥乙基淀粉的作用下紅細胞與粒細胞聚集并迅速沉降,；此時,，單個核細胞仍處于分離液上層，紅細胞污染可忽略不計,。大部分血小板可在細胞清洗低速離心過程中去除,。 其他人及動物多種比重細胞分離液，因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同,，用戶在制定分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重,、動物種屬及被分離細胞的名稱。
適用于從動物抗凝血液中分離單個核細胞,，無菌條件下所分離的單個核細胞可用于細胞培養(yǎng)等,。本品僅供科研使用,。

器材和設(shè)備 ：
    400g離心力的水平轉(zhuǎn)子離心機、15ml玻璃離心管,、吸管等,。

注意事項：
    A．本實驗要求，在正常大氣壓下,，分離液,、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃。分離液在低溫時呈較高密度,，在高溫時呈較低密度,。細胞分離液從冰箱取出后，不可立即使用,，操作前可將樣本和分離液復(fù)溫18-22℃,。為獲得佳的實驗結(jié)果，好在取血后2小時內(nèi)進行實驗,，血液提取后存放時間越長細胞活性越低,。
    B．實驗過程中，如需稀釋血液或洗滌細胞,，不可使用含Ca,、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液，其成分會導(dǎo)致血細胞凝集,，大大降低細胞得率及純度,。
    C．優(yōu)抗凝劑選擇：EDTA、枸櫞酸,、肝素,，其他抗凝劑也可使用，但會影響細胞活性,。應(yīng)注意在血液稀釋過程中去除抗凝劑體積,。
    D．當血液樣本粘度過高或血液樣本大于等于3ml時，優(yōu)稀釋方法：將血液于18-22℃以250g離心10分鐘,，棄去血漿,，補充添加全血及組織稀釋液，添加量為所棄去血漿體積的1.5-2倍,，混勻備用,。注：不當?shù)南♂尫椒〞档图毎寐始盎钚浴?br />    E．實驗操作時，不可使用含粉手套,、不可使用內(nèi)毒素含量過高的液體,，手套中的粉末顆粒及高內(nèi)毒素會激活淋巴細胞從而降低細胞得率及活性。
    F．本實驗不可使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品,，其帶有的靜電作用將導(dǎo)致細胞貼壁影響分離效果,。推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管,。
    G．吸取過多的單個核細胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加。吸取過多的單個核細胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜,。
    H．如需進行細胞計數(shù),，則需血液貯藏時間不得多于10小時,，否則將導(dǎo)致細胞被激活,，得率降低。
    I．為去除所混雜的血小板,，可在分離液上層加上4-20%蔗糖梯度等滲溶液進行二次離心,。
    J．細胞純度可在步驟10后使用瑞氏染色方法確定，細胞活性可用臺盼藍處理后觀察,。

    K．由于各品牌離心機的性能不同,，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異，可能影響分離效果,，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時間,，摸索佳的分離條件（具體分離條件各實驗室自定）。
 

分離方法 ：
     一,、當血液樣本小于3ml時,，實驗方法如下：
     1. 取一支15ml離心管，加入3ml分離液置于18-22℃復(fù)溫,。
     2. 將血液樣本小心加于分離液之液面上,。18-22℃，400g離心20分鐘,。低溫（如4℃）離心會降低細胞得率,。
     3. 離心后，用吸管小心吸出分離液上層（包含單個核細胞的細胞層）0.5cm以上的上清液部分,，棄去,。
     4. 用吸管小心吸取分離液層及淋巴細胞層于另一新離心管內(nèi)。
     5. 在步驟4中所得離心管中加入10ml細胞洗滌液混勻,。
     6. 250g離心10分鐘,。
     7. 棄上清。
     8. 用吸管以5ml細胞洗滌液重懸所得細胞,。
     9. 250g離心10分鐘,。
     10. 棄上清。重復(fù)步驟7,、8,、9，后以0.5ml后續(xù)試驗所需相應(yīng)液體重懸細胞,。

二,、當血液樣本大于3ml時,，實驗方法如下：
     1. 先按“【注意事項】D項”所述方法稀釋血液樣本。
     2. 取一支適當?shù)碾x心管,，加入分離液（加入量與稀釋后的血液樣本體積相等）,，置于18-22℃復(fù)溫。
     3. 將經(jīng)稀釋處理的血液樣本小心加于分離液之液面上,。18-22℃,，400g離心20分鐘。低溫（如4℃）離心會降低細胞得率,。注：加入血液樣本后,，樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二。
     4. 剩余步驟同“情況一”中步驟3步驟10,。

產(chǎn)品性能 指標 ：
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
無菌 直接接種培養(yǎng)14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10µm 以上的不溶性微粒20 粒以下,，
含25µm 以上的不溶性微粒5 粒以下

貯藏及保存期限 ：
     本分離液是敏光型的，應(yīng)在18℃-25℃避光保存,，有效期兩年,。啟封后置4℃保存，溶液變渾濁或污染細菌時,，產(chǎn)品失效,。保存溫度較低（10℃以下）時分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果,。

豬外周血單個核細胞分離液試劑盒訂購說明：

1,、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨,。 
2,、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂,，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂,。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期,、批次等因素發(fā)生變化,，若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4,、每日訂單截止時間為16點整,，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨,。
5,、請辦理完貨款后，將收據(jù),、底單等連同收貨人的地址,、姓名,、等以傳真、,、短信,、等形式通知我們。

運輸說明：

1,、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸,。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封,，膠帶層層粘住泡沫盒,，放入索萊寶的箱子,，然后交付給合作快遞,，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,，為您的實驗保駕護航,。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸,。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒,，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周）,，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中,，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,，為您的實驗保駕護航。
3,、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝,。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中,。