葡聚糖凝膠G-25 Bio-sep G-25
- 公司名稱(chēng) 西安恒成生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2016/4/19 13:18:18
- 訪問(wèn)次數(shù) 503
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
葡聚糖凝膠G-25（Bio-sep G-25）
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
葡聚糖凝膠是一種具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物,它是由葡聚糖加入交聯(lián)劑環(huán)氧氯丙烷通過(guò)醚鍵互相交聯(lián)聚合而成的,，交聯(lián)度越大，網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)就越緊密,，吸水后的體積膨脹就越小,，能允許進(jìn)入凝膠內(nèi)部的分子的分子量也就越小，反之亦然,。層析時(shí),，大于凝膠孔徑的大分子,，被阻于凝膠相外，沿著凝膠顆粒之間的間隙走,，下移速度zui快,，故zui先洗脫下來(lái)，中分子物質(zhì)部份進(jìn)入凝膠內(nèi)部,，洗脫速度為其次,，而小分子物質(zhì)因全部進(jìn)入凝膠，受到阻力zui大,，故zui后被洗脫下來(lái),，如此物質(zhì)得到分離。
1 化學(xué)和物理性質(zhì)
葡聚糖凝膠G-25是一種珠狀的凝膠,，含有大量的羥基,，很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。型號(hào)G表明每克于凝膠吸水量的多少,，G-25表明每克干凝脫膠吸水2.5毫升,。這表征了凝膠所能膨脹的倍數(shù)，亦間接表征了凝膠孔徑的大小,。 葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響,。
1.1 化學(xué)穩(wěn)定性
葡聚糖凝膠G-25不溶于一切溶劑（除非它被化學(xué)降解）。它在水,、鹽溶液,、有機(jī)溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的,，在強(qiáng)酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解,。*接觸氧化劑將破壞凝膠，因而應(yīng)避免使用,。
1.2 物理穩(wěn)定性
葡聚糖凝膠G-25并不熔融,，可以在濕態(tài)、中性PH進(jìn)行滅菌或在高壓滅菌器120℃,、30分鐘而不影響它的色譜性質(zhì),。干態(tài)的凝膠加熱至120℃以上將開(kāi)始焦糖化。
2 產(chǎn)品說(shuō)明
產(chǎn)品名稱(chēng) | 粒徑（干） | 粒徑（濕） | 溶脹度 | 耐壓(Mpa) | zui大流速 （cm/h） | 應(yīng)用 | |
G -25 | 粗 | 100-300 | 172-516 | 4-6 | 0.24 | 480 | 分離范圍1000-5000; 適用于脫鹽,、肽與其它小分子的分離
|
中 | 50-150 | 86-256 | |||||
細(xì) | 20-80 | 34-138 | |||||
超細(xì) | 20-50 | 17-69 | |||||
2.1交聯(lián)葡聚糖凝膠微球G-25的排阻極限測(cè)定
交聯(lián)葡聚糖微球G-25排阻極限
樣品 | 保留體積(ml) | 分子量 | Log M | Kav |
芐醇 | 114.81 | 108 | 2.03 | 1.00 |
PEG400雙芐基醚 | 98.43 | 580 | 2.76 | 0.80 |
PEG600雙芐基醚 | 81.60 | 780 | 2.89 | 0.60 |
PEG1000雙芐基醚 | 65.72 | 1180 | 3.07 | 0.40 |
PEG1540雙芐基醚 | 55.14 | 1620 | 3.21 | 0.28 |
PEG4000雙芐基醚 | 33.81 | 4180 | 3.62 | 0.02 |
PEG6000雙芐基醚 | 32.64 | 6180 | 3.79 | 0.00 |
PEG7000雙芐基醚 | 32.63 | 7180 | 3.86 | 0.00 |
PEG10000雙芐基醚 | 32.42 | 10180 | 4.01 | 0.00 |
PEG20000雙芐基醚 | 32.41 | 20180 | 4.31 | 0.00 |
2.2交聯(lián)葡聚糖凝膠微球G-25的脫鹽實(shí)驗(yàn)研究
固定上樣量50μl,，分別以15, 30, 60, 90 cm/h的流速洗脫，色譜圖如圖所示：
流速15cm/h,，進(jìn)樣量50μl 流速30cm/h,，進(jìn)樣量50μl
流速60cm/h，進(jìn)樣量50μl 流速90cm/h，進(jìn)樣量50μl
3 使用方法
3.1 乙醇浸泡
在室溫下,，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí),，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用去離子水洗去殘存的乙醇濾干,。
3.2 去離子水浸泡
室溫下,，在去離子水中充分溶脹24小時(shí)，間隙攪拌,，以保證凝膠的*溶脹,。
3.3 鹽酸浸泡
在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時(shí)，間隙攪拌,，濾干,，水洗至中性。
3.4 裝柱
將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層,。
3.5 平衡
上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止（流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）
3.6 上樣
凝膠過(guò)濾的上樣量一般為5%的柱床體積,，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整,；脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50 cm
以下,，過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓,，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,，脫鹽時(shí)高徑比為5：1即可,。
3.7 洗脫方法
可以用去離子水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫,；在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化,。
3.8 在位清洗（CIP）
凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白,。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積,，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。
采購(gòu)中心
化工儀器網(wǎng)