苯基高流速瓊脂糖微球Phenyl Bio-sep FF
- 公司名稱 西安恒成生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2016/4/19 11:42:46
- 訪問次數(shù) 329
聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
苯基高流速瓊脂糖微球（Phenyl Bio-Sep 6FF）
產(chǎn)品說明書
苯基瓊脂糖微球是將苯基鍵合在6FF瓊脂糖微球上形成的一種可利用疏水相互作用來實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)品純化分離的疏水類介質(zhì),。用于生物大分子和乙肝疫苗的純化分離,。
1.外觀：本品為白色球狀凝膠,無嗅,、無味、無肉眼可見雜質(zhì),。
2.理化指標(biāo)
項(xiàng) 目 | 指 標(biāo) | |
配 基 | R-OCH2-CH(OH)-CH2-O-C6H5 | |
基 質(zhì) | 6% 交聯(lián)瓊脂糖 | |
形狀 | 球形 | |
粒徑 | 50~160 μm | |
蛋白質(zhì)吸附容量（HSA） | 36mg/ml(高),；24mg/ml(低) | |
zui高流速(25℃) | 600 cm/h* | |
耐 壓 | 0.3 MPa | |
耐 熱 | pH水中120℃20min | |
工作溫度 | 4~40℃ | |
pH適用范圍 | 2~14 (短時(shí)間 ，在位清洗),；3~13(長時(shí)間) | |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 以下溶液中穩(wěn)定,； 1mol/L NaOH;70%EtOH;30%異丙醇；0.5%SDS;6mol/L鹽酸胍,； 8mol/L尿素;3 mol/L(NH4)2SO4 | |
*柱子：內(nèi)徑16mm,、柱長30cm。柱床高15cm,25℃, 流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl,。
3． 包裝
產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝,，外貼標(biāo)簽，注明“品名,、體積,、顆粒大小、保質(zhì)期,、批號(hào),、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)單位及地址” 等內(nèi)容,。所選用的包裝應(yīng)有利于保證產(chǎn)品質(zhì)量,、方便運(yùn)輸和貯存。
4. 運(yùn)輸
運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬,、雨淋,、重壓，嚴(yán)禁與有毒,、有害物品混運(yùn),。
5. 貯存
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~30℃（保存溶液為20% 乙醇+0.1M醋酸鈉），通風(fēng),、干燥,、清潔的地方。不能冷凍,。
用過的柱子貯存在4℃（20% 乙醇）,。
6.保質(zhì)期：暫定5年,。
7.應(yīng)用
苯基瓊脂糖微球是一種疏水層析介質(zhì),，利用樣品中組分疏水性的不同進(jìn)行分離。用于生物大分子的純化分離,。
下面簡要介紹介質(zhì)的使用過程,。
7.1 裝柱
⑴讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫,。配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。
⑵根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠,，清洗掉20%乙醇,，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿,。勻漿作脫氣處理,。
⑶將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡,。
⑷ 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
⑸ 打開蠕動(dòng)泵,，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過,，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子,。
7.2平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液,，如0.02~0.05mol/L的PBS加1~2.5mol/L(NH4)2SO4等,。
7.3上樣
⑴樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣,。
⑵一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品,。
⑶介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質(zhì),、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和溫度。鹽濃度大,、溫度高或樣品組分疏水性強(qiáng),，介質(zhì)對組分吸附牢。
7.4洗脫
疏水介質(zhì)可用減小鹽濃度進(jìn)行洗脫,。加表面活性劑或有機(jī)溶劑可加強(qiáng)洗脫,。zui常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液，如0.02~0.05mol/L的PBS,。
7.5再生
一般用低鹽濃度的緩沖液洗,，洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡,，可再次使用,。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,，可用在位清洗（CIP）除去。
7.6 在位清洗
⑴ 對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,，可以用2M Nacl去除,。
⑵ 對沉淀蛋白、對以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,，可用1M NaOH 去除,。
⑶ 對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡,。
清洗完畢后,，用至少3倍緩沖液平衡柱子。
7.7注意
在裝柱,、使用和保存柱子的時(shí)候,，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入,。
7.8 去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí),。或用以下方法步驟去除：
⑴ 2倍柱體積的70%乙醇
⑵ 2倍柱體積50mM Tris-Hcl pH7.5
⑶ 1倍柱體積4M尿素
⑷ 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl
以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制
7.9 消毒
用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,，初始緩沖液平衡柱子,。
7.10滅菌
置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下20分鐘。
采購中心
化工儀器網(wǎng)