高流速丁基瓊脂糖微球（Butyl Bio-Sep 4FF）

                      產(chǎn)品說(shuō)明書

高流速丁基瓊脂糖微球是將丁基鍵合在高流速4FF瓊脂糖微球上形成的一種可利用疏水相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)品純化分離的疏水類介質(zhì),。用于生物大分子純化分離。

1.外觀

本品為白色球狀凝膠,無(wú)嗅,、無(wú)味,、無(wú)肉眼可見雜質(zhì)。

2.理化指標(biāo)

*檢測(cè)條件： 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl

3． 包裝

產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝,，外貼標(biāo)簽，注明“品名,、體積,、顆粒大小、保質(zhì)期,、批號(hào),、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)單位及地址” 等內(nèi)容,。所選用的包裝應(yīng)有利于保證產(chǎn)品質(zhì)量,、方便運(yùn)輸和貯存。

4. 運(yùn)輸

運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬,、雨淋,、重壓，嚴(yán)禁與有毒,、有害物品混運(yùn),。

5. 貯存

產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~30℃（保存溶液為20% 乙醇+0.1M醋酸鈉），通風(fēng),、干燥,、清潔的地方。不能冷凍,。

用過(guò)的柱子貯存在4℃（20% 乙醇）,。

6.保質(zhì)期：暫定5年。

7.應(yīng)用

丁基瓊脂糖微球是一種疏水層析介質(zhì),，利用樣品中組分疏水性的不同進(jìn)行分離,。用于乙肝疫苗和其他生物大分子的純化分離。

下面簡(jiǎn)要介紹介質(zhì)的使用過(guò)程,。

7.1 裝柱

⑴讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫,。配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液,。

 ⑵根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠,，清洗掉20%乙醇,，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿,。勻漿作脫氣處理,。

⑶將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無(wú)氣泡,。

⑷  用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

⑸ 打開蠕動(dòng)泵,，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò),，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子,。

7.2平衡

讓平衡緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液,，如0.02~0.05mol/L的PBS中加1~2.5mol/L(NH₄)₂SO₄等,。

7.3上樣

⑴樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣,。

⑵一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品,。

⑶介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于介質(zhì)配基的疏水性,、樣品的疏水性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和溫度,。鹽濃度大,、溫度高、樣品組分疏水性和介質(zhì)配基的疏水性強(qiáng),，介質(zhì)對(duì)組分吸附牢,。

7.4洗脫

可用以下幾種方式之一進(jìn)行洗脫，也可結(jié)合使用,。

⑴降低鹽析離子的濃度或提高鹽溶離子的濃度,。

⑵逐漸增加表面活性劑的量。

⑶可通過(guò)給洗脫液中加入乙二醇等有機(jī)溶劑以降低極性,。

⑷通過(guò)降低溫度,。

常用的洗脫液是低鹽濃度的緩沖液，如0.02~0.05mol/L的PBS。

7.5再生

一般用低鹽濃度的緩沖液洗,，洗10倍以上柱體積,，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用,。必要時(shí)加表面活性劑和可溶性有機(jī)溶劑洗去雜質(zhì),，再用水、梯度增加乙醇濃度洗,、水洗,，zui后用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡。