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產(chǎn)品名稱:Anglne細胞
中文名稱:人卵巢癌細胞系
生長狀態(tài):貼壁生長
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貨號:suer0043
運輸方式:干冰運輸或復(fù)蘇活細胞
細胞數(shù)量:>5×100000cells/瓶
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
特惠價格:致電
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復(fù)蘇原則:快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶,,對細胞造成損害。
凍存原則:階梯溫度凍存:分別經(jīng)過4度,,-20度,,-80度和液氮的依次過程進行凍存,可以zui大限度的保存細胞活力,。
一. 實驗前準(zhǔn)備:
1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃
2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面,。
3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管,、培養(yǎng)瓶等等,。
二.取出凍存管:
1.根據(jù)細胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細胞的編號,。
2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,,同時核對管外的編號。
三.迅速解凍:
1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,,并要不斷的搖動,,使管中的液體迅速融化。
2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,,再拿入超凈臺內(nèi)。
四.平衡離心:用架盤天平平衡后,,放入離心機中3000r/min 離心3min
五.制備細胞懸液:
1.吸棄上清液,。
2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液,。
六.細胞計數(shù):細胞濃度以5×105/ml為宜,。
七.培養(yǎng)細胞:
將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),,換液的時間由細胞情況而定,。
初學(xué)者易犯錯誤:
1水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
2.水浴鍋內(nèi)凍存管太多,,導(dǎo)致傳熱不佳,,使融化時間延長。
3.離心前忘記平衡,,導(dǎo)致離心機損壞和細胞丟失,。
4.一次復(fù)蘇細胞過多,忘記更換吸頭和吸管,,導(dǎo)致細胞交叉污染,。