原卟啉原氧化酶(PPOX)抗體
參考價(jià) | ¥ 2200 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱(chēng) 上海鑫閔生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2015/11/21 9:34:43
- 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù) 588
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
細(xì)胞株,,生化分析儀,酶標(biāo)儀,,洗板機(jī),,生化試劑,手術(shù)器械,,血液分析儀,,血凝儀,Elisa試劑盒,,抗體
產(chǎn)品名稱(chēng):原卟啉原氧化酶(PPOX)抗體 規(guī)格:0.1ml/0.2ml
價(jià)格:詢(xún)價(jià)
貨期:1-2周
保存溫度::-20℃可保存一年,,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
注:本試劑僅供科研,,不得用于臨床
如何選擇抗體:
檢測(cè)任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,,需要考慮如下幾種因素:試驗(yàn)應(yīng)用的類(lèi)型、樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì),、樣本的種屬,、抗體宿主的種類(lèi)、抗體的標(biāo)記和檢測(cè),。具體分析如下:
1.分析試驗(yàn)應(yīng)用的類(lèi)型
一般抗體說(shuō)明書(shū)都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過(guò)適用于何種分析類(lèi)型,,如:可以應(yīng)用于WB IHC ICC ELASA分析等,如果抗體說(shuō)明書(shū)沒(méi)有提及的應(yīng)用類(lèi)型,,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類(lèi)型,,而僅是說(shuō)明尚未經(jīng)過(guò)此種分析試驗(yàn)驗(yàn)證,如果抗體不適用某些分析試驗(yàn),,則會(huì)在抗體說(shuō)明書(shū)上標(biāo)注出來(lái)不適于某分析試驗(yàn),。
2.樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)
了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇zui合適的抗體,至少兩方面因素需要考慮:
A.待測(cè)樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域:抗體是由各種不同免疫原免疫宿主而制備得來(lái),,其中的免疫原包括:全長(zhǎng)蛋白,、蛋白片斷、多肽,、全有機(jī)體(如:細(xì)菌)或細(xì)胞,,抗體說(shuō)明書(shū)一般都有免疫原的描述,如果打算檢測(cè)的是蛋白片斷或一種特殊的同型物或蛋白全長(zhǎng)的某一區(qū)域,,則必須選擇用含此片段域的免疫原制備出的抗體,。如果打算用FACS流式檢測(cè)活細(xì)胞的表面蛋白,則需要選擇含該表面蛋白的胞外域來(lái)免疫制備的抗體,。
B.樣本的提取或處理過(guò)程:某些抗體要求樣本經(jīng)過(guò)某些特殊處理,,例如:許多抗體只識(shí)別還原和變性的、表位已暴露不受二級(jí)四級(jí)結(jié)構(gòu)阻礙的蛋白樣本,,另一方面,,某些抗體僅識(shí)別天然折疊狀態(tài)的蛋白。當(dāng)選擇免疫組化的抗體時(shí),,應(yīng)注意某些抗體只識(shí)別未固定的冷凍的組織,,而另一些抗體則適用于無(wú)需抗原修復(fù)解交聯(lián)步聚的甲醛固定石蠟包埋的組織,這些都會(huì)在抗體說(shuō)明書(shū)上應(yīng)用部分標(biāo)示出來(lái),。
3.樣本的物種
應(yīng)選擇物種相同或有交叉反應(yīng)的抗體,,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應(yīng),因其氨基酸序列同源性較高,,如果樣本的種類(lèi)未列入抗體說(shuō)明書(shū)上的交叉反應(yīng)種屬表中,并不意味著該抗體不適用于檢測(cè)該物種的蛋白,,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測(cè)驗(yàn)證過(guò),,應(yīng)通過(guò)序列比對(duì)的方法來(lái)預(yù)測(cè)交叉反應(yīng),可應(yīng)用Expasy 和 NCBI BLAST來(lái)進(jìn)行不同物種蛋白同源性比對(duì)。
4.一抗宿主物種的選擇
一般說(shuō)來(lái),,在使用偶聯(lián)二抗結(jié)合無(wú)偶聯(lián)物的一抗時(shí),,一抗宿主動(dòng)物的物種選擇較為重要,對(duì)于免疫組化而言,,盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗,,從而避免二抗與樣本內(nèi)源性免疫球蛋白產(chǎn)生交叉反應(yīng),例如:檢測(cè)小鼠樣本蛋白,,則不應(yīng)選擇小鼠或大鼠源的一抗,,選兔源的一抗,則二抗則可選擇偶聯(lián)了檢測(cè)分子(酶,、熒光素,、生物素等)的抗兔IgG。如果選擇有偶聯(lián)物的一抗則不適用上述情況,,除免疫組化外的其它對(duì)不含內(nèi)源性免疫球蛋白樣本的檢測(cè)方法,,則抗體宿主物種的影響不大,如對(duì)不含IgG的細(xì)胞裂解物樣本的western blotting檢測(cè),,盡管如此,,含有血清的組織裂解物和組織培養(yǎng)上清中含有免疫球蛋白,還原變性樣本中含IgG,,在western blot檢測(cè)中則結(jié)合出現(xiàn)IgG分子50 and 25 kDa的重鏈和輕鏈條帶,。
5.二抗的選擇
二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來(lái)源,例如:如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體,,二抗則選抗小鼠的二抗anti-mouse secondary,。建議檢查二抗說(shuō)明書(shū)確保該抗體適用于你的檢測(cè)應(yīng)用, 二抗一般連接熒光素FITC或發(fā)光團(tuán),。
6.雙重染色抗體的選擇
用未偶聯(lián)一抗進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來(lái)源于不同物種并且二抗分別識(shí)別其中之一,,二抗說(shuō)明書(shū)應(yīng)描述其與其它物種來(lái)源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
7.熒光和化學(xué)發(fā)光標(biāo)記
連接于二抗的標(biāo)記物是為了檢測(cè)抗體的結(jié)合,,選擇標(biāo)記物依賴(lài)于幾個(gè)參數(shù):
A.檢測(cè)方法:熒光或著色沉淀,,熒光標(biāo)記物用特殊波長(zhǎng)的光激發(fā)時(shí)發(fā)射出可見(jiàn)光。
B.封片介質(zhì):AEC, Fast Red, INT 或其它水性發(fā)光基團(tuán)是可以醇溶的并要求水性封片. 除上述之外的發(fā)光基團(tuán)是有機(jī)的所以使用有機(jī)性封片介質(zhì),。熒光素標(biāo)記物要求水性封片介質(zhì),,藻紅蛋白(藻青素 / 藻紅素要求不添加甘油的水性封片介質(zhì),因其有淬滅熒光的效應(yīng),。
C.生物素化的抗體:通常用于加強(qiáng)親和素-生物素-酶或熒光素復(fù)合物,。