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大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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    doc
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    16.5KB
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    2025年07月08日
關鍵詞
標準品,大鼠白介素5,IL-5 抗體,酶標板,生物素化抗體
上傳者
本生(天津)健康科技有限公司
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資料簡介

  以下是關于大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒的實驗使用說明,綜合了多個來源的可靠信息:

  BS-2970 大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒

  一,、實驗原理

  采用雙抗體夾心法檢測樣本中IL-5含量,。預包被抗大鼠IL-5抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-5,再依次加入生物素化檢測抗體和HRP標記的鏈霉親和素,,形成復合物后通過TMB顯色反應定量,。顏色深淺與IL-5濃度成正比,通過標準曲線計算含量?,。

  二,、試劑盒組成

  核心組分?:預包被酶標板、標準品(凍干粉,,需復溶),、生物素化抗體、HRP酶結合物,、TMB顯色液,、終止液?

  輔助溶液?:20×濃縮洗滌液(需1:20稀釋)、樣品稀釋液,、標準品稀釋液?

  耗材?:封板膜,、密封袋?

  三、樣本處理要求

  血清/血漿?:采集后室溫靜置10-20分鐘,,2000-3000g離心20分鐘,,避免溶血或脂血干擾?。

  細胞培養(yǎng)上清?:直接離心去除顆粒物,-20℃保存時避免反復凍融?,。

  組織勻漿?:PBS沖洗后稱重勻漿,,離心取上清,建議添加蛋白酶抑制劑?,。

  四,、標準操作步驟

  標準品稀釋?:復溶后梯度稀釋(如2000-31.2 pg/mL),建議設置8個濃度點?,。

  加樣與孵育?:

  每孔加100μL樣本或標準品,,37℃孵育90分鐘

  洗滌5次后加入生物素化抗體(100μL/孔),37℃孵育60分鐘?

  顯色與檢測?:

  加入TMB底物避光顯色15分鐘,,終止反應后30分鐘內測定450nm吸光度?,。

  五、關鍵注意事項

  質量控制?:每板需設空白孔和標準曲線,,OD值需扣除空白背景?,。

  干擾避免?:避免使用NaN3防腐劑(抑制HRP活性),溶血/高脂樣本需預處理?,。

  保存條件?:未使用的板條需密封干燥保存于2-8℃,,標準品復溶后需當日使用?。

  六,、性能參數(shù)

  檢測范圍?:典型為15.6-1000 pg/mL,,靈敏度可達3.9 pg/mL?。

  精密度?:板內/板間變異系數(shù)分別<10%

  注:以上資料僅供參考,,不作為實驗依據(jù),,具體請咨詢技術老師或品牌供應商。

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