猴B病毒elisa試劑盒使用說明書

公司是一家技術(shù)服務(wù)型渠道企業(yè),在行業(yè)發(fā)展中所承擔(dān)的角色是一種溝通產(chǎn)出方和需求方（科研和市場）的媒介,，我們致力為行業(yè)人才提供了包括科研在內(nèi)的更多出口，為科研提供了有力的硬件支持,，有效地促進科研和市場需求結(jié)合,，提高了科研成果的轉(zhuǎn)化效率，使得科研更具活力,。目前國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視，但更多地側(cè)重于科研的投入,，行業(yè)內(nèi)缺乏*的技術(shù)服務(wù)體系和渠道支撐...
藥品名稱：
通用名：猴B病毒酶聯(lián)免疫分析試劑盒
elisa試劑盒使用目的：
　　本試劑盒定性測定猴血液、或其它相關(guān)組織中B病毒的表達
實驗原理：
　　本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）測定標本中猴B病毒,。用純化的B病毒抗體包被微孔板,，制成固相抗體，可與樣品中B病毒相結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標記的B病毒抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較，從而判定標本中猴B病毒的存在與否,。
elisa試劑盒組成：
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1/瓶 8 陽性對照 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 陰性對照 0.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1瓶 12 密封袋 1個
標本要求：
1．標本處理：血清、血漿標本可直接檢測
2．標本按要求制備后盡早進行實驗,。如不能及時檢測,，可將標本在-20℃保存一個月,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
elisa試劑盒操作步驟：
編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,，每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔,、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）
加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照（標準品）50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻，
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
配液：將30倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5,。
顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

結(jié)果判定：
　 試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.15
　 臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為猴B病毒陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為猴B病毒陽性
注意事項
1．操作嚴格按照說明書進行,，本試劑不同批號組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5．底物請避光保存,。
6．試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為2M的liu酸,，使用時必須注意安全。