大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離自海馬體,；海馬體（Hippocampus），又名海馬回,、海馬區(qū),、大腦海馬，海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí),。海馬神經(jīng)元細(xì)胞是海馬區(qū)的主要細(xì)胞組成,，主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié),、是老年性癡呆,、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng),，在學(xué)習(xí),、記憶、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用,，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細(xì)胞聚集區(qū),，具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對(duì)獨(dú)立分布的特點(diǎn)，境界相對(duì)清晰,，便于取材,，因此,，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究者當(dāng)做理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀：ｑR神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細(xì)胞生物學(xué)特性和外源干擾因素作用（細(xì)胞因子）的有效細(xì)胞模型,，其在神經(jīng)生物學(xué),，發(fā)育生物學(xué)體外實(shí)驗(yàn)研究中已被廣泛應(yīng)用。

細(xì)胞簡(jiǎn)介

平臺(tái)編號(hào)：Bio-129602

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞信息：RHNC

細(xì)胞名稱(chēng)：大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞RHNC

產(chǎn)品規(guī)格：T25培養(yǎng)瓶x1,；1.5ml凍存管x2

細(xì)胞數(shù)量：1x10^6,；1x10^6

保存溫度：37℃；-198℃

運(yùn)輸方式：常溫保溫運(yùn)輸,；干冰運(yùn)輸

安全等級(jí)：1

用途限制：僅供科研2類(lèi)

培養(yǎng)體系：神經(jīng)元細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

培養(yǎng)溫度：37℃

二氧化碳濃度：5%

簡(jiǎn)介：大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞RHNC取自雄性SD大鼠,，貼壁培養(yǎng)。

注釋?zhuān)罕对鰰r(shí)間41h

用途：細(xì)胞系

注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,，非藥用,，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）

細(xì)胞復(fù)蘇操作說(shuō)明（針對(duì)凍存細(xì)胞）

實(shí)驗(yàn)儀器：超凈工作臺(tái) ，CO2 培養(yǎng)箱 ,，倒置顯微鏡 ,，水浴鍋 ，離心機(jī)

實(shí)驗(yàn)試劑：DMEM 培養(yǎng)基 ,，胎牛血清 ，三抗

實(shí)驗(yàn)材料：T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 ,，需復(fù)蘇的細(xì)胞 ,，移液槍 ，槍頭 ,，離心管

實(shí)驗(yàn)步驟：

1,、從液氮罐中取出凍存管 ，直接浸入 37℃溫水中 ,，并不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化,。

2、從 37℃水浴中取出凍存管 ,，打開(kāi)蓋子 ,，移液槍吸出細(xì)胞懸液 ，加到離心管并滴加 5 倍以上培養(yǎng)基并混勻,。

3,、操作離心 ， 調(diào)至 1000 轉(zhuǎn)/分 ,，時(shí)長(zhǎng) 10 分鐘

4,、棄去上清液 ，重懸離心管底部細(xì)胞沉淀,，在 T25 培養(yǎng)瓶中加入 5-6ml 培養(yǎng)基 ,，計(jì)數(shù) ,，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶,，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。

5、次日更換一次培養(yǎng)液,，繼續(xù)培養(yǎng),。

6、注意：凍存細(xì)胞建議三管一起復(fù)蘇到一個(gè) T25 培養(yǎng)瓶中

細(xì)胞傳代操作說(shuō)明（貼壁細(xì)胞）

實(shí)驗(yàn)儀器：超凈工作臺(tái) ,，CO2 培養(yǎng)箱 ,，倒置顯微鏡 ，離心機(jī)

實(shí)驗(yàn)試劑：DMEM 培養(yǎng)基 ,，胎牛血清 ,，0.25%胰酶 ，三抗

實(shí)驗(yàn)材料：T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 ,，需傳代的細(xì)胞 ,，移液槍 ，槍頭 ,，離心管

實(shí)驗(yàn)步驟：

1,、細(xì)胞于培養(yǎng)箱中 ，愈合度達(dá)到 80% ,，可進(jìn)行傳代,。

2、按 T25 培養(yǎng)瓶計(jì) ,，吸出培養(yǎng)基 ,，并 PBS 緩沖液輕沖 3 遍 ，添加 0.25%含 EDTA 胰酶 2ml ,，消化 2min（具體時(shí)間視細(xì)胞而定）,，后用培養(yǎng)基將細(xì)胞沖洗下來(lái)。 1000r/min 離心 10 min ,，棄上清 收集細(xì)胞,，鋪至 2 個(gè) T25 培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，各添加 7ml 培養(yǎng)基,。

3,、注意：消化時(shí)間不易過(guò)長(zhǎng)，消化前血清成分務(wù)必去除干凈,，終止消化請(qǐng)用新鮮培養(yǎng)基,，原瓶培養(yǎng)基不可繼續(xù)使用（終止消化或傳代）。

細(xì)胞傳代操作說(shuō)明（懸浮細(xì)胞）

實(shí)驗(yàn)儀器：超凈工作臺(tái) ,，CO2 培養(yǎng)箱 ,，倒置顯微鏡 ,，離心機(jī)

實(shí)驗(yàn)試劑：DMEM 培養(yǎng)基 ，胎牛血清 ,，三抗

實(shí)驗(yàn)材料：T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 ,，需傳代的細(xì)胞 ，移液槍 ,，槍頭 ,，離心管

實(shí)驗(yàn)步驟：

1、細(xì)胞于培養(yǎng)箱中,，密度達(dá)到懸浮細(xì)胞傳代標(biāo)準(zhǔn)（沉降后可鋪滿(mǎn)底面）,，可進(jìn)行傳代。

2,、按 T25 培養(yǎng)瓶計(jì),，吹打均勻，吸出培養(yǎng)基,，1000r/min 離心 10 min,，棄上清收集細(xì)胞，鋪至 2 個(gè)T25 培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，各添加 7ml 培養(yǎng)基,。

3、注意：原瓶培養(yǎng)基不可繼續(xù)使用（傳代）,。

細(xì)胞凍存操作說(shuō)明

實(shí)驗(yàn)儀器：超凈工作臺(tái) ,，CO2 培養(yǎng)箱 ，倒置顯微鏡 ,，離心機(jī)

實(shí)驗(yàn)試劑：DMEM 培養(yǎng)基 ，胎牛血清 ,，0.25%胰酶 ,，三抗 ，DMSO

實(shí)驗(yàn)材料：T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 ,，需凍存的細(xì)胞 ,，移液槍 ，槍頭 ,，離心管 ,，凍存管 ，記號(hào)筆

實(shí)驗(yàn)步驟：

1,、取待凍存的細(xì)胞（按 T25 計(jì) ）用 0.25EDTA 胰酶 2ml 消化 2min ,，用培養(yǎng)基將細(xì)胞沖洗下來(lái)。1000r/min 離心 10min ,，棄上清收集細(xì)胞,。 如果是懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞 ,，則可直接離心收集細(xì)胞。

2,、加入 1ml 凍存液(90%FBS+10%DMSO )制成細(xì)胞懸液,。

3、細(xì)胞懸液裝入 3 支凍存管中,。

4,、凍存管在 4℃下存放 30 min ，轉(zhuǎn)放-20℃ 1.5～2 h ,，再轉(zhuǎn)人-70℃ 4-12 h 后即可轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(- 196℃) ,，并登記。

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