一,、霉菌

不是分類學(xué)上的名詞,，而是一些絲狀真菌的通稱，屬真菌的一部分,；其對人類具有雙重性,，有利的方面是它可以用來釀造、工業(yè)發(fā)酵,、抗生素和酶制劑的生產(chǎn)等,，不利方面是它能引起農(nóng)副產(chǎn)品、食品,、原料及器材的腐爛,，也感染并引起人類和動、植物的多種疾病,，少數(shù)種類,，如黃曲霉，能產(chǎn)生是一種致癌物質(zhì),，危害人,、畜的健康和生命。因此,，霉菌的檢測對于食品的安全性很重要,。

食品中常見的霉菌：毛霉屬、根霉屬,、曲霉屬,、青霉屬等。

二,、檢測中的注意事項

1,、取樣的代表性。

2,、取樣工具的無菌,。空氣中霉菌的孢子含量很高,，所以,，取樣的工具、容器等要經(jīng)過嚴(yán)格的高壓滅菌,。

3,、檢樣的方法。

(1)由于霉菌易被攜帶,，所以,，檢樣時操作人員應(yīng)盡量避免自身攜帶的可能,。

(2)樣品的均質(zhì)及充分振搖。因為有些孢子是連成串的,，故均質(zhì)和振搖能使其充分散開,，同時，在各梯度連續(xù)稀釋時,，也要用滅菌吸管反復(fù)吹吸幾次,，使孢子充分散開。

4,、培養(yǎng)溫度和時間,。培養(yǎng)溫度 25-28℃培養(yǎng)，5 天后觀察,。

霉菌檢驗中常用的培養(yǎng)基：孟加拉紅瓊脂,、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、察氏瓊脂,、高鹽察氏瓊脂等,。

5,、檢樣中常見的問題,。

(1)不同稀釋度計數(shù)結(jié)果不相同；

(2)不生長或生長很好連成片無法計數(shù),；

原因：①稀釋時未經(jīng)反復(fù)振搖,，吹吸，導(dǎo)致孢子未充分散開,，影響了計數(shù)的結(jié)果,。

②由于培養(yǎng)基不適宜，PH 值低等,，致使生長較慢,。

③觀察時間的掌握。真菌生長較慢,，故需 5d 后才能觀察出結(jié)果,。

三、微生物操作中常見問題的討論與分析

1,、劃線獲得單個菌落的方法,。劃不出單個菌落的原因：

(1)平板上有過多的水分；

(2)劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒,；

(3)多區(qū)劃線,，三區(qū)或四區(qū)劃線。

2,、涂布和傾注的區(qū)別：

涂布利于觀察,，但由于涂布棒上會帶有少量的菌液,，可能影響計數(shù)的準(zhǔn)確性；傾注更為準(zhǔn)確,，但不利于觀察菌落的狀態(tài),。

3、培養(yǎng)基配制時應(yīng)注意的問題：

(1)滅菌溫度要嚴(yán)格控制,，按照要求滅菌,，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過高會導(dǎo)致糖分焦化,，影響質(zhì)量,；

(2)瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分,；

(3)培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌,，反復(fù)滅菌也會導(dǎo)致營養(yǎng)成分的破壞；

(4)含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后,，要搖勻,。

4、平板的保存：

大多數(shù)平板如 VRBA,、DC,、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存,。

5,、產(chǎn)品的保存：

(1)干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結(jié)塊后不能使用,。

(2)亞碲酸鉀卵黃增菌液,、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時,，要常溫解凍,，避免水浴加熱。

(3)抗生素類：冷藏保存,，溫度過高會導(dǎo)致靈敏度的下降,。

(4)兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果。

6,、觀察時間的掌握：

按 SN,、GB 等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說明所述時間進(jìn)行觀察，時間過短或時間過長,，單菌落的特征都不會很明顯,。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基，時間短單菌落看不到卵磷脂環(huán),，時間長綿羊李氏菌也會產(chǎn)生沉淀環(huán),。OXA,、PALCAM的觀察也如此，時間過長,，李氏菌使整個平板成黑色,，不利于觀察單個菌落。

7,、添加劑的添加：

(1)溫度的掌握,。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。

(2)定量,。過多會抑制一些目標(biāo)菌,，太少又導(dǎo)致雜菌的過度生長。

8,、培養(yǎng)溫度的掌握：

(1)真菌類,。25-28℃培養(yǎng)

(2)細(xì)菌類。李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在 30℃左右,。

(3)其他一般在 36℃左右,。

9、接種方法：

常用的方法主要有劃線,、三點接種,、穿刺接種、傾注接種,、涂布接種,、液體接種。

10,、革蘭氏染色方法：

染色時間的掌握、沖洗的方法,。

11,、生化實驗：

(1)接種的方法

(2)氧化型和發(fā)酵型實驗操作

(3)陽性菌種的對照

(4)接種前的純化。挑取單個菌落進(jìn)行一系列的生化,。

12,、關(guān)于殺菌的幾個概念：

(1)抑制：是在亞抑制劑量因子作用下導(dǎo)致微生物生長停止，但在移去這些因子后生長仍可以恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象,。

(2)死亡：在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長時間的作用下,，導(dǎo)致微生物生長能力不可逆喪失，即使移去這種因子后生長仍不能恢復(fù)的生物學(xué)現(xiàn)象,。

(3)防腐：在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下,，能防止或抑制微生物生長的一種措施，它能防止食物防止食物霉變,。

(4)消毒：利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所原微生物的一種措施,，它可以起到防止感染和傳播的作用,。

(5)滅菌：利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所原微生物的一種措施。

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